标签:跨膜受体蛋白 古朵生物 抗原抗体 您了解跨膜受体蛋白Notch-1抗体吗? 英文名称:Notch1 中文名称:跨膜受体蛋白Notch-1抗体 别 名:Notch 1 extracellular truncation; Notch 1 intracellular domain; hN1; Lin-12; LIN12; MIS6; Motch A; mT14; Neurogenic locus notch homolog protein 1; Neurogenic locus notch protein homolog; NICD; Notch1 intracellular domain; NOTC1_HUMAN; Notch 1; NOTCH; Notch gene homolog 1 (Drosophila); Notch homolog 1 translocation associated (Drosophila); Notch homolog 1, translocation-associated (Drosophila); NOTCH, Drosophila, homolog of, 1; notch1; p300; TAN 1; TAN1; TAN1; Translocation Associated Notch Homolog; Translocation Associated Notch Homolog; Translocation associated notch protein TAN 1; Translocation-associated notch protein TAN-1. 规格价格0.1ml 0.2ml 研究领域:细胞生物 发育生物学 神经生物学 信号转导 干细胞 表观遗传学 抗体来源:Rabbit 克隆类型:Polyclonal 交叉反应:Human, Mouse, Rat, 产品应用:WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500 (石蜡切片需做抗原修复) not yet tested in other applications. optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user. 分 子 量86/89/271kDa 细胞定位:细胞核 细胞膜 性 状:Lyophilized or Liquid 浓 度:1mg/1ml 免 疫 原:KLH conjugated synthetic peptide derived from human C-terminal sequence of Notch 1 extracellular truncation and Notch 1 intracellular domain 亚 型IgG 纯化方法:affinity purified by Protein A 储 存 液:0.01M TBS(pH7.4) with 1% BSA, 0.03% Proclin300 and 50% Glycerol. 保存条件:Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C. 您了解跨膜受体蛋白Notch-1抗体吗? 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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2022.10.14
标签:质粒提取试剂盒 古朵生物 ELISA检测试剂盒 人降钙素原(PCT)ELISA试剂盒使用说明 上海古朵生物科技详细为您介绍人降钙素原(PCT)ELISA试剂盒使用说明书,用途,规格,保质期,价格,品牌等详情,本司提供ELISA试剂盒代测服务,一周内出结果,ELISA种属有:大鼠ELISA检测试剂盒,小鼠ELISA检测试剂盒,人ELISA试剂盒,马ELISA检测试剂盒,羊ELISA检测试剂盒,猴ELISA试剂盒,猪ELISA试剂盒,狗ELISA检测试剂盒,植物ELISA试剂盒,猴ELISA试剂盒,其他动试剂盒,欢迎来电订购! 中文名:人降钙素原(PCT)ELISA试剂盒 别名:人降钙素原(PCT)ELISA Kit 货号:fk-00010 供应商:上海古朵生物 规格:48t/96t 保存:2~8℃ 有效期:6个月 样本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。 特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。 用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。 种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。 运输方式:现货供应,一般为快递运输,江浙沪隔天到,外地及偏远地方三至五天时间到货。 检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法。 人降钙素原(PCT)ELISA试剂盒使用说明特点: 1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。 2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。 3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定,因此有利于样品的保存。 4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察,又可用显微镜观察,也可以用分光光度计进行比色测定,还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变,从而引起被检测物的显示。 5.可以定量测定。溶液中的抗原物质,应用酶免吸附技术进行比色测定,依据光密度值的变化,可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。 6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测,免疫酶技术都能在较短时间内完成。 7.仪器和试剂简单。对免疫没技术来说,不需要荧光显微镜,也不需要测定放射性的特殊仪器,所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂,普通实验室及生产应用单位均易购置. 人降钙素原(PCT)ELISA试剂盒使用说明操作步骤: 1. 取出试剂盒,室温(20-25℃)放置 30 分钟。 2. 分组:取出 96 孔板,根据待测样品数量加上标准品的数量决定所需的板条数,把剩余的板条继续冷藏处理。分别设标准品组(6 个浓度)、空白孔、待测样品组。 注:为减少实验误差,保证准确性,建议设置复孔。 3. 加样:依照标准品的顺序分别加入 100ul 的标准品溶液于空白微孔中;空白对照孔加入 100ul 的蒸馏水;其余微孔中加入100ul 的待测样本。 4. 加酶标溶液:标准品组、待测样本组各孔中加入 50ul 的酶标溶液(空白对照孔除外)。 5. 温育:酶标板用封板纸密封后,放入湿盒内于 37℃恒温孵育 1 小时。 6. 洗板:用稀释后的洗涤液注满每孔,静置 15-30s,充分清洗酶标板 5 次,用吸水纸彻底拍干。 7. 显色:各孔加入显色剂 A 液 50ul 后,再加入显色剂 B 液 50ul。 8. 终止:25-37℃下避光反应 10-15 分钟,加入 50ul 终止液。 9. 读板:在 450nm 波长读取各孔的 OD 值。 人降钙素原(PCT)ELISA试剂盒使用说明上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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2022.10.14
标签:质粒提取试剂盒 古朵生物 ELISA检测试剂盒 古朵生物| 质粒提取试剂盒中各溶液配方及作用 提质粒是分子生物学中基本,easy的实验。完全不需要借助大脑,直接照着提取试剂盒中的操作说明傻瓜操作即可(其实应该由机器人在实验室中操作这些简单却耗时的实验)。尽管操作简单,提质粒却也是一个比较重要的步骤,提出质粒的质量和数量将直接决定着后续实验室的成败。当我们按照试剂盒中操作说明进行操作时,我们会看到P1,P2,N3, PE,EB等不同的溶液(不同试剂盒可能标识不同)。那么大家是否知道每瓶溶液中装的什么?它们在质粒提取过程中的作用又是怎样的? 质粒提取采用的是强碱裂解法(alkaline lysis),那么我们现在来看一下溶液 P1 , P2, N3, PE, EB都是什么。 溶液1(P1) 组分浓度 25 mM Tris-HCl(pH8.0),10 mM EDTA,50 mM 葡糖糖(Glucose) 溶液1的主要作用是将菌体沉淀悬浮起来。25mM Tris-HCl是缓冲溶液,保证反应体系的pH恒定。EDTA是金属离子螯合剂,10 mM EDTA的作用是与微生物体内的金属离子相互结合,抑制DNase的活性。50 mM葡萄糖的作用是增加溶液的粘度,保证菌体悬浮,延缓菌体沉降的时间。溶液1在使用前通常要加入RNA酶(RNase A),RNA酶的作用很清楚,降解掉溶液中的RNA。由于RNA酶属于蛋白质,蛋白质稳定性很差,所以加了RNase A的溶液1需要低温4oC保存。 溶液2(P2) 组份浓度 250 mM NaOH,1%(W/V)SDS(十二烷基硫酸钠) 溶液2的主要作用是细胞裂解。溶液1将细胞悬浮后,就需要添加溶液2了,溶液2的作用就是对细胞进行裂解。溶液2只包括两种成分:氢氧化钠和SDS。真正起到到细胞裂解作用的是氢氧化钠,这也是为什么这个方法会被叫做碱裂解法。氢氧化钠会破坏细胞膜的结构,使之发生bilayer(双层膜)结构向micelle(微囊)结构的相变化,从而导致细胞的裂解。SDS的作用将在下一步提到。添加溶液2后需要注意的一个是时间一定不能过长,另一个是不可以剧烈震动离心管。时间过长以及剧烈震动都将导致氢氧化钠破坏基因组DNA,断裂的基因组DNA碎片将会与相似大小质粒一同被抽提,污染样品。 溶液3(N3) 组份浓度 3M 醋酸钾(potassium acetate),5M 醋酸 溶液3的主要作用是中和第二步加入的强碱以及清除掉蛋白质等细胞内的杂质。N是neutralized的缩写。强碱溶液氢氧化钠长时间与DNA基础会破坏其结构,因此需要进行中和。中和氢氧化钠,5 M醋酸就足够了,为何又要加入醋酸钾呢?做过质粒提取实验的同学应该记得,在加入溶液N3后,会有大量沉淀出现。这些沉淀其实醋酸钾与溶液2中的SDS相互作用,反应生成的十二烷基硫酸钾(potassium dodecylsulfate, PDS)。加入溶液N3后,SDS遇到钾离子,生成PDS不溶于水,会迅速发生沉淀。 那么溶液3的加入是如何清除掉蛋白质,基因组DNA等杂质的呢?道理是,溶液2中加入的十二烷基硫酸钠(SDS)很容易与蛋白质结合,平均两个氨基酸就会结合一个SDS分子,二者结合会形成SDS2多肽复合体,这样变性蛋白质将溶解在溶液中,从而使得多肽链更好地与基因组DNA缠绕。加入溶液3后,由于十二烷基硫酸盐与变性蛋白质结合成复合体,十二烷基硫酸钾的沉淀就将变性的蛋白质一起沉淀,同时变性的蛋白质与基因组DNA缠绕,结果也大部分被共沉淀了。而高离子浓度的溶液又加速了这一沉淀过程。此外,溶液被中和后变性蛋白质表面电荷减少,也可以促进变性蛋白质沉淀。 溶液PE (wash buffer) 组分浓度10 mM Tris-HCl (pH 7.5), 80 % 乙醇(Ethanol) Wash buffer的作用主要是清洗掉多余的盐离子。试剂盒中都是利用硅胶柱进行DNA提取的。在DNA与硅胶柱吸附后,需要利用Wash buffer清洗掉多余的盐离子。Wash buffer中含有高浓度的乙醇,由于乙醇会影响后续的酶切或测序反应,在洗脱DNA前必须要在离心机内”空甩”柱子,完全清除掉乙醇。 溶液EB(Elution buffer) 组分浓度10 mM Tris-HCl (pH 7.5) EB的作用就是洗脱硅胶柱上的DNA样品。Elution buffer中不能含有过高浓度的盐离子,因为在高盐环境中,盐阳离子会打破硅胶负氧根和水之间的氢键,使得整体的硅胶携带正电,会吸引携带负电的DNA分子。另外,加热过的洗脱液( 不同公司的质粒提取试剂盒中溶液成分可能有所差异,比如P1中可以去除掉葡萄糖,溶液PE甚至可以直接用水来代替等等。质粒提取实验是分子生物学中的基本且重要的实验,尽管实验本身简单,但其原理还是有些复杂的。小编相信,知其然亦要知其所以然,清楚实验的原理,当实验出现问题之时,会能够更容易找到原因并给予纠正。 质粒提取试剂盒中各溶液配方及作用 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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2022.10.14
古朵阐述:ELISA检测血清的详细事项 大部分elisa检测均以血清为标本。血清标本可按惯例方法收集,应留意防止溶血,红细胞溶解时会释放出具有过氧化物酶活性的物质,以HRP为符号的ELISA测定中,溶血标本可能会添加非特异性显色。血清标本宜在新鲜时检测。如有细菌污染,菌体中可能含有内源性HRP,也会发生假阳性反应。 一般说来,在5天内测定的血清标本可放置于4℃。超越一周测定的需-20℃保存。冻住血清融解后,蛋白质局部浓缩,散布不均,应充沛混匀并防止发生气泡。混浊或有沉积的血清标本应先离心或过滤,弄清后再检测。重复冻融会使抗体效价下跌,所以测抗体的血清标本如需保存作屡次检测,宜少量分装冰存。保存血清自收集时就应留意无菌操作,也可参加适当防腐剂。 ELISA试剂盒检测血清的详细留意事项: 1) 要留意防止呈现严峻溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因而,在以HRP为符号酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很简单在温育过程中吸附于固相,然后与后边参加的HRP底物反应显色。 2) 冰冻保存的血清标本须留意防止因停电等形成的重复冻融。标本的重复冻融所发生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子发生损坏效果,然后引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应留意,不要进行剧烈振荡,重复倒置混匀即可。 3) 标本在保存中如呈现细菌污染所造成的的混浊或絮状物时,应离心沉积后取上清检测。 4) 样本的收集及血清别离中要留意尽量防止细菌污染,一则细菌的成长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白发生分化效果;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作符号的测定方法发生非特异性搅扰。 5) 血清标本如是以无菌操作别离,则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则主张冰冻保存。样本的长期保存,应在-70℃以下。 古朵阐述:ELISA检测血清的详细事项 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。上海古朵生物公司中“古朵”取自good的音译,寓意是质量好,品牌好,服务好!欢迎新老客户洽谈!
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2022.10.13
古朵生物技术解析:PBS和D-PBS缓冲溶液配制 磷酸盐缓冲液(简称PBS)的是生物化学中常用的一种阻碍溶液pH变化的缓冲溶液,这种由盐溶液中含有氯化钠,磷酸盐,磷酸盐,氯化钾和磷酸钾组成。组份浓度:137 mM 氯化钠,2.7 mM 氯化钾,10 mM 磷酸二氢钠,2 mM 磷酸二氢钾。本文总结了PBS和D-PBS溶液的配制方法。 1. 常规PBS磷酸盐缓冲液 组成成份: 磷酸二氢钾 34 g 1 mol/L氢氧化钠溶液 175 ml 蒸馏水 825 ml PH 7.2 配制: 先将磷酸盐溶解于500 mL蒸馏水中,用1 mol/L氢氧化钠溶液校正pH后,再用蒸馏水稀释至1000 mL。 稀释液: 取储存液1.25 mL,用蒸馏水稀释至1000 mL。分装每瓶100 mL或每管10 mL,121 ℃高压灭菌15 min。 用途:主要用于一些化学实验中不影响实验反应的情况下调节pH值,以便让实验的化学反应在佳条件下进行。部分用于食品或是饲料行业加工,如食品或者饲料真菌毒素检验中Elisa方法的洗板应用或者食品微生物检验中的稀释缓冲液。 2. PBS Buffer的配制具体步骤 组份浓度: 137 mM NaCl, 2.7 mM KCl, 10 mM Na2HPO4, 2 mM KH2PO4 配制量:1 L 配制方法: (1)称量下列试剂,置于1 L烧杯中。 NaCl 8 g KCl 0.2 g Na2HPO4 1.42 g KH2PO4 0.27 g (2)向烧杯中加入约800 ml的去离子水,充分搅拌溶解。 (3)滴加浓盐酸将pH值调节至7.4,然后加入去离子水将溶液定容至1 L。 (4)高温高压灭菌后,室温保存。 注意: 上述PBS Buffer中无二价阳离子,如需要,可在配方中补充1 mM CaCl2和0.5 mM MgCl2。 3. D-PBS是杜氏磷酸缓冲液 全称为:Dulbecco's Phosphate Buffered Saline 组分 分子量 浓度 (gm/L) 摩尔浓度 (mM) 氯化钾 (KCl) 75 0.20 2.67 磷酸二氢钾 (KH2PO4) 136 0.20 1.47 氯化钠 (NaCl) 58 8.00 138.00 磷酸氢二钠 (Na2HPO4) 142 1.15 8.10 pH值为7.4。 (1)杜氏磷酸盐缓冲液(Dulbecco's Phosphate Buffered Saline,D-PBS)也是一种磷酸盐缓冲液,与常规PBS的不同之处在于磷酸盐的含量稍低些,并含有钙镁离子。D-PBS主要用于胚胎学方面的研究,多用于胚胎的冲洗液、冻存液和培养液。 (2)D-PBS配方:氯化钠8 g,氯化钾0.2 g,磷酸氢二钠1.15 g,磷酸二氢钾0.2 g,氯化钙0.1 g,含6个结晶水的氯化镁0.1 g溶于1 L ddH2O中。 (3)以上配方为含有钙镁离子的D-PBS,如不加氯化钙和氯化镁,即为无钙镁的D-PBS。 (4)在以上配方的基础上,还可以加入葡萄糖、丙酮酸钠等,以利于培养物的生长。 D-PBS是杜氏磷酸缓冲液,也是一种磷酸盐缓冲液,与常规磷酸缓冲液大的不同点在于磷酸盐的含量稍低些,根据是否含钙镁分为两种即D-PBS w/钙 & 镁和D-PBS w/o 钙 古朵生物技术解析:PBS和D-PBS缓冲溶液配制上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。上海古朵生物公司中“古朵”取自good的音译,寓意是质量好,品牌好,服务好!欢迎新老客户洽谈!
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2022.10.13
化学发光免疫分析技术和免疫荧光技术有什么区别 免疫荧光细胞化学是根据抗原抗体反应的原理,先将已知的抗原或抗体标记上荧光素制成荧光标记物,再用这种荧光抗体(或抗原)作为分子探针检查细胞或组织内的相应抗原(或抗体)。 在细胞或组织中形成的抗原抗体复合物上含有荧光素,利用荧光显微镜观察标本,荧光素受激发光的照射而发出明亮的荧光(黄绿色或桔红色),可以看见荧光所在的细胞或组织,从而确定抗原或抗体的性质、定位,以及利用定量技术测定含量 。 用荧光抗体示踪或检查相应抗原的方法称荧光抗体法;用已知的荧光抗原标记物示踪或检查相应抗体的方法称荧光抗原法。这两种方法总称免疫荧光技术,以荧光抗体方法较常用。用免疫荧光技术显示和检查细胞或组织内抗原或半抗原物质等方法称为免疫荧光细胞(或组织)化学技术。 古朵生物详解:免疫荧光细胞化学分直接法、夹心法、间接法和补体法。 一、直接法 1.检查抗原法 这是最早的方法,用已知特异性抗体与荧光素结合,制成荧光特异性抗体,直接与细胞或组织中相应抗原结合,在荧光显微镜下即可见抗原存在部位呈现特异性荧光。此法很特异和简便,但一种荧光抗体只能检查一种抗原,敏感性较差 2.检查抗体法 将抗原标记上荧光素,即为荧光抗原,用此荧光抗原与细胞或组织内相应抗体反应,而将抗体定位检测出来。 二、间接法 1.检查抗体法(夹心法) 此法是先用特异性抗原与细胞或组织内抗体反应,再用此抗原的特异性荧光抗体与结合在细胞内抗体上的抗原相结合,抗原夹在细胞抗体与荧光抗体之间,故称夹心法。 2.检查抗体法 用已知抗原细胞或组织标本的切片,加上待检血清,如果其中含有切片中某种抗原的抗体,抗体便沉淀结合在抗原上,再用间接荧光抗体(抗种属特异性igg荧光抗体)与结合在抗原上的抗体反应(如检测人血清中的抗体必需用抗人igg荧光抗体等),在荧光显微镜下可见抗原抗体反应部位呈现明亮的特异性荧光。此法是检验血清中自身抗体和多种病原体抗体的重要手段 间接法 3.检查抗原法双薄片 此法是直接法的重要改进,先用特异性(对细胞或组织内抗原)抗体(或称第一抗体)与细胞标本反应,随后用缓冲盐水洗去未与抗原结合的抗体,再用间接荧光抗体(也称第二抗体,种特异性)与结合在抗原上的抗体(是第二抗体的抗原)结合,形成抗原-抗体-荧光抗体的复合物。由于结合在抗原抗体复合物上的荧光抗全显著多于直接法,从而提高了敏感性。 如细胞抗原上每个分子结合3~5个分子抗体,当此抗体作为抗原时又可结合3~5分子的荧光抗体,所以和直接法相比荧光亮度可增强3至4倍。此法除灵敏性高外,它只需要制备一种种属间接荧光抗体,可以适用于多种第一抗体的标记显示。这是现在最广泛应用的技术。 三、补体法 1.直接检查组织内免疫复合物法 用抗补体c3等荧光抗体直接作用组织切片,与其中结合在抗原抗体复合物上的补体反应,而形成抗原抗体补体复合物---抗补体荧光抗体复合物,在荧光显微镜下呈现阳性荧光的部位就是免疫复合物的存在处,此法常用于肾穿刺组织活检诊断等。2.间接检查组织内抗原法 常将新鲜补体与第一抗体混合同时加在抗原标本切片上,经37℃孵育后,如发生抗原补体抗体反应,补体就结合在此复合物上,再用抗补体荧光抗体与结合的补体反应,形成抗原抗体—抗补体荧光抗体的复合物,此法优点是只需一种荧光抗体可适用于各种不同种属来源的第一抗体的标记显示。 四、双重免疫荧光标记法 在同一细胞组织标本上需要同时检查两种抗原时,要进行双重荧光染色,一般均采用直接法,将两种荧光抗体(如抗a和抗b)以适当比例混合,加在标本上孵育后,按直接法洗去未结合的荧光抗体,抗a抗体用异硫氰酸荧光素标记,发黄绿色荧光;抗b抗体用tmritc或rb200标记,发红色荧光,可以明确显示两种抗原的定位。 五、对照试验 为了保证免疫荧光细胞化学染色的准确性,排除某些非特异性染色,必须在初次试验时进行以上对照试验: 1.直接法 需设下述对照试验 (1)标本自发荧光对照:标本只加pbs或不加pbs,缓冲甘油封片,荧光显微镜观察应呈阴性荧光(无与特异性荧光相似的荧光)。 (2)抑制试验:可分为二步法和一步法。 ①二步抑制法:标本先加未标记的特异性抗体,再加标记荧光抗体,结果应呈阴性或明显减弱的荧光。 ②一步抑制法:先将荧光抗体用未标记抗体作适量混合,再加在标本上染色,结果应为阴性。此法效果较二步法好,并且简便。 (3)阳性对照:用已知阳性标本作直接法免疫荧光染色,结果应呈阳性荧光。 如对照(1)和(2)无荧光或弱荧光,(3)和待检查标本呈强荧光即为特异性阳性荧光。 2.间接法 (1)自发荧光对照:同上(一)。 (2)荧光抗体对照:标本只加间接荧光抗体染色,结果阴性。 (3)抑制试验:同上。 (4)阳性对照:同上。 如对照(1)、(2)、(3)均呈阴性,阳性对照和待检标本阳性则为特异性荧光。 3.补体法 (1)自发荧光对照 (2)荧光抗体对照 (3)抑制试验 (4)补体对照:取新鲜豚鼠血清1:10稀释先作用标本,再用抗补体荧光抗体染色,结果阴性。 (5)抑制试验:标本加灭活的第一抗体,再用1:10稀释度的新鲜豚鼠血清孵育后,再加未标记的抗补体血清与抗补体荧光抗体等量混合稀释液,结果应为阴性。 (6)阳性对照:(1)~(5)结果阴性,(6)和待检标本阳性时,则为特异性荧光。 化学发光免疫分析技术和免疫荧光技术有什么区别上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。上海古朵生物公司中“古朵”取自good的音译,寓意是质量好,品牌好,服务好!欢迎新老客户洽谈!
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2022.10.13
标签:白介素-5 古朵生物 小鼠试剂盒 荧光染色试剂盒 小鼠白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒检测说明书 小鼠白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒检测说明书,预期应用,用途,特点,说明书,价格,品牌等由上海古朵生物提供详细介绍,本司专业销售进口/国产ELISA检测试剂盒,酶联免疫试剂盒,生化试剂盒,染色试剂盒,金标检测试剂盒,白介素试剂盒,其他科研试剂盒,提供代测服务,一周内出结果,ELISA种属有大鼠,小鼠,人,兔,羊,鸡,豚鼠,植物,马,牛,猪,犬,鱼,猴及其他动物,若有需要,欢迎订购! 中文名:小鼠白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒 别名:小鼠白介素-5(IL-5)ELISA Kit 规格:48t/96t 保存温度:2-8℃低温保存 有效期:6个月 试剂盒成分:酶标板,试剂,标准品等。 预期应用:ELISA法定量测定人血清、血浆、细胞培养上清或其它相关生物液体中IL-52含量。 检测原理:采用双抗体夹心ABC-ELISA法 用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。 特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。 实验方法: 酶联免疫法/酶免法(ELISA) 适用范围:只作科研使用,不作临床使用。 本司ELISA试剂盒具有以下: 1.专一性强。抗原与抗体的免疫反应是专一反应,而免疫酶技术以免疫反应为基础,所检测的对象是抗原(或抗体),使用的抗体除标记了酶以外,与普通抗体的免疫反应特性并无多大差别。 2.灵敏度高。由于抗体联结上了酶,因此,借助于酶与底物的显色反应,显示抗原与抗体的结合,大大提高了检测的灵敏性,使检测水平接近放射免疫测定法。 3.样品易保存。经过酶反应显示的有色产物大多比较稳定,因此有利于样品的保存。 4.结果易观察。对检测结果即可用肉眼观察,又可用显微镜观察,也可以用分光光度计进行比色测定,还可用显微镜观察。这是因为某些酶反应产物能使电子密度发生改变,从而引起被检测物的显示。 5.可以定量测定。溶液中的抗原物质,应用酶免吸附技术进行比色测定,依据光密度值的变化,可以定量。预计用细胞分光光度计可对组织内的抗原进行免疫酶技术的定量测定。 6.可以大规模测定样品。如有成千上万份样品需要进行检测,免疫酶技术都能在较短时间内完成。 7.仪器和试剂简单。对免疫没技术来说,不需要荧光显微镜,也不需要测定放射性的特殊仪器,所用仪器及试剂均属一般性仪器与试剂,普通实验室及生产应用单位均易购置。 小鼠白介素-5(IL-5)ELISA检测试剂盒基本原理: ①抗原或抗体能吸附到固相载体表面,并保持其免疫学活性; ②抗原或抗体可通过共价键与酶连接形成酶结合物,仍保持其免疫学和酶学活性; ③酶结合物与相应抗原或抗体结合后,可根据加入底物的颜色反应来判定是否有免疫反应的存在,而且颜色反应的深浅是与标本中相应抗原或抗体的量成正比例,因此,可以按底物显色的程度显示试验结果。 小鼠白介素-5(IL-5)ELISA检测试剂盒试剂准备: 试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。 1. 标准品复溶:试剂盒提供6管标准品,每管已标定浓度,并且冻干。实验前在每个标准品管中加入0.5mL样本稀释液,盖好后静置10分钟以上,然后反复颠倒/搓动助其溶解,使其恢复为每个标准品管身标注的浓度。 2. 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。 小鼠白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒样本处理及要求: 1.血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如出现沉淀,应再次离心。 2.血浆:应根据标本的要求选择EDTA、者柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂,混合10-20分钟后,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应该再次离心。 3.尿液:用无菌管收集,离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清,保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4.细胞培养上清:检测分泌性的成份时,用无菌管收集。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。检测细胞内的成份时,用PBS(PH7.2-7.4)稀释细胞悬液,细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融,以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成,应再次离心。 5.组织标本:切割标本后,称取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS(PH7.4),用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右(2000-3000转/分)。仔细收集上清。分装后一份待检测,其余冷冻备用。 6. 标本采集后尽早进行提取,提取按相关文献进行,提取后应尽快进行实验。若不能马上进行试验,可将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融. 7. 不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制辣根过氧化物酶的(HRP)活性。 小鼠白介素-5(IL-5)ELISA检测试剂盒组成及试剂配制: 1、 酶标板:一块(96孔) 2、 标准品(冻干品): 2瓶,请临用前15分钟内配制。每瓶以样品稀释液稀释至1ml,盖好后室温静置大约10分钟,同时反复颠倒/搓动以助溶解,其浓度为1,000 pg/ml,然后做系列倍比稀释(注:不要直接在板中进行倍比稀释),分别配制成1,000 pg/ml,500 pg/ml,250 pg/ml,125 pg/ml,62.5 pg/ml,31.2 pg/ml,15.6 pg/ml,样品稀释液直接作为空缺孔 0 pg/ml。如配制500 pg/ml标准品:取0.5ml (不要少于0.5ml )1,000 pg/ml的上述标准品加进含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中,混匀即可,其余浓度以此类推。 3、 样品稀释液:1×20ml。 4、 检测稀释液A:1×10ml。 5、 检测稀释液B:1×10ml。 6、 检测溶液A:1×120 /瓶(1:100)。临用前以检测稀释液A 1:100稀释(如:10 检测溶液A / 990 检测稀释液A),充分混匀,稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制(100 /孔),实际配制时应多配制 0.1-0.2ml。 7、 检测溶液B:1×120 /瓶(1:100)。临用前以检测稀释液B 1:100稀释。稀释方法同检测溶液A。 8、 底物溶液:1×10ml/瓶。 9、 浓洗涤液:1×30ml/瓶,使用时每瓶用蒸馏水稀释25倍。 10、终止液:1×10ml/瓶(2 mol/L H2SO4)。 11、覆膜:5张 12、使用说明书:1份 小鼠白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒操作步骤: 1、加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、标准孔、待测样品孔。在酶标包被板上标准品准确加样50µl,待测样品孔中先加样品稀释液40µl,然后再加待测样品10µl(样品终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。 2、温育:用封板膜封板后置 37℃温育30分钟。 3、配液:将30倍浓缩洗涤液用蒸馏水30倍稀释后备用 4、洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此 重复5次,拍干。 5、加酶:每孔加入酶标试剂50µl,空白孔除外。 6、显色:每孔先加入显色剂A50µl,再加入显色剂B50µl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色 10 分钟. 7、终止:每孔加终止液50µl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。 8、测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。测定应在加终止液后15分钟以内进行。 小鼠白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒检测说明书注意事项: 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4.请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本od值大于标准品孔孔的od值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5.封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 10.如与英文说明书有异,以英文说明书为准。 小鼠白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒检测说明书标本的采集及保存: 1、 血清:全血标本请于室温放置2小时或4 过夜后于1000 g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20 或-80 保存,但应避免反复冻融。 2、 血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂,标本采集后30分钟内于 1000 g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20 或-80 保存,但应避免反复冻融。 3、 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000 g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20 或-80 保存,但应避免反复冻融。 小鼠白介素-5(IL-5)ELISA试剂盒储存及有效期: 1. 未开封的试剂盒:所有试剂均按试剂瓶标签上所示保存。请注意,收到试剂盒后请尽快将TMB 洗涤液,终止液保存于4℃,其他试剂保存于-20℃。 2. 使用后的试剂盒:剩余试剂仍需按照试剂瓶标签所示的温度保存,开封后的酶标板要加干燥剂后密封保存于-20℃,避免潮湿。 注意: 试剂盒内酶标条可拆卸,按实验需求可分多次使用;使用后的剩余试剂盒建议在次实验后1个月内使用完毕。产品过期时间以盒子上的标签为准,保质期内所有组分都确保是稳定的。 免疫荧光染色|七色多重荧光染色试剂盒技术原理上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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2022.10.12
标签:免疫荧光染色 古朵生物 七色多重试剂盒 荧光染色试剂盒 免疫荧光染色|七色多重荧光染色试剂盒技术原理 免疫荧光染色|七色多重荧光染色试剂盒 (六标七色) 原理介绍:酪酰胺信号放大(TSA,Tyramidesignalamplification)技术是一类利用辣根过氧化酶(HRP)对靶蛋白进行标记的酶学检测方法,类似常规免疫组化的DAB显色方法,TSA技术同样采用HRP标记的二抗,同样有对应的“显色”步骤(HRP催化加入反应体系的酪胺荧光素底物,产生活化荧光底物,活化底物可与抗原上的酪氨酸等残基共价结合,使样品上稳定的共价结合酪胺荧光素。之后用热修复法洗去非共价结合的一抗-二抗-HRP复合物,重复下一种一抗-hrp二抗来第二轮孵育,换另一种酪胺荧光素底物,如此往复就可实现多重标记。 TSA详细原理是利用酪胺Tyramide的过氧化物酶反应(酪胺盐在HRP催化H202下形成共价键结 合位点),产生大量的酶促产物,该产物能与周围的蛋白残基(包括色氨酸、组氨酸和酪氨酸残基)结合,这样在抗原-抗体结合部位就有大量的荧光素沉积,结果使其检测信号得到10-100倍增强。简单来说,用这种方法做多重免疫荧光是利用二抗上带有的HRP(而不是直接偶联荧光素),来催化后续添加入体系的非活性荧光素。荧光素在HRP和过氧化氢的作用下被活化,跟临近蛋白的酪氨酸残基共价偶联,使得蛋白样品与荧光素稳定结合。然后微波或煮沸或者水浴等热修复处理,前一轮非共价结合的抗体被洗掉,共价结合的荧光素稳定共价结合在样本切片蛋白上。再换个一抗来第二轮孵育,周而复始。等到所有抗体孵育结束,荧光素都结合好后,最后去检测结果。由于每次体系中都只有单一抗体孵育,因此无需担心抗体交叉反应,以及一抗二抗种属匹配问题,大大减少了实验设计时不同种属抗体选择匹配的限制。也就是说,如果用TSA技术,同一张片子上所有的靶标都可以选用特异性高的兔单克隆抗体。搭配同一支抗兔的HRP二抗就可以进行实验,而且信号放大的倍数大大增强。本公司开发的试剂盒具体酪胺荧光染料为以下其中一种或者多种:480,520,570,620,690,780。此试剂盒中的荧光染料可单独或配合使用。可以实现单标、双标、三标以及更多重荧光放大/多重同源抗体荧光标记等功能,极大丰富了此试剂盒的内涵。 试剂盒组成: 480荧光染料(即用型,5mL),-20℃;520荧光染料(绿光)(即用型,5mL),-20℃;570荧光染料(红光)(即用型,5mL),-20℃;-620荧光染料(即用型,5mL),-20℃;690荧光染料(即用型,5mL),-20℃;780荧光染料(即用型,5mL),-20℃;TSA+增强剂,100ul,-20℃(可选); 高敏多聚hrp山羊抗兔二抗(20mL)4℃。 备注:480荧光染料、520荧光染料、570荧光染料、620荧光染料、690荧光染料、780荧光染料在-20度下,均为固体,使用之前需解冻。 TSA+增强剂使用方法:TSA+增强剂能够进一步增强荧光信号放大液的放大信号5-10倍,TSA+增强剂:荧光放大液=1:500,使用TSA+增强剂不是必须的选项,可以根据具体的情况选择添加或者不选择添加。 操作流程: 1、石蜡切片脱蜡至水:依次将切片放入二甲苯Ⅰ15min-二甲苯Ⅱ15min-无水乙醇Ⅰ5min-无水乙醇Ⅱ。取出放在通风厨内,酒精晾干后放入自来水中稍洗,蒸馏水洗。 2、抗原修复:组织切片置于盛满PH9.0EDTA碱性抗原修复液或者PH6.0柠檬酸修复缓冲液的修复盒中于微波炉内进行抗原修复(也可以用高压1-2min100度水煮15min95度水浴20min 免疫荧光染色|七色多重荧光染色试剂盒技术原理上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
参数原理
2022.10.12
标签:ELISA试剂盒 古朵生物 检测试剂盒 进口ELISA检测试剂盒为什么会呈现假阳性现象呢? 导读:进口ELISA检测试剂盒出现假阳性的现象一般是与错误的操作有关,本文与大家聊一聊如何避免假阳性现象。 1、加样 对于间接进口ELISA检测试剂盒标本一般都要进行稀释,如果加样不准就会造成误差,尤其当稀释倍数大时,很小的误差,会导致较大的相对误差,使阴性(或弱阳性)标本呈阳性(或阴性)。加样时应将所加物加在ELISA板孔的底部,避免加在孔壁上部,并注意不可溅出,不可产生气泡。目前,大部分血站都已使用全自动酶免加样系统处理标本,可较好地避免以上误差。 2、洗涤 在进口ELISA检测试剂盒中正确的洗涤是保证得到可重复结果的关健一步,应引起操作者重视。无论是手工操作还是机器操作,得出不正确的结果常与不正确的洗涤有关,ELISA就是靠洗涤来达到分离游离和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以消除残留在板孔中没能与固体抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性吸附于固相载体的干扰物质。 3、 温育 每种试剂都有其合适的反应模式,其中温度和温育时间控制是重要因素。因孵育温度高,反应时间长,会造成整板本底高,阳性率高。温育一般用湿盒或水浴,反应板不宜叠放,以保证各板温度都能迅速平衡,为避免蒸发,板上应加盖。 4、酶标仪判读 作为记录测定结果的仪器,酶标仪的性能稳定与否,决定结果的可靠度。先酶标仪应定期进行保养,对滤光片要定期校正;其次酶标仪波长设置要正确,使用双波长,一个检测波长,一个参比波长,以消除微孔板底部划痕、不平、指印或液面高度差异造成的光干扰。此外,在用酶标仪读数时先擦试微孔板底部并压平板条。由于各种酶标仪性能有所不同,使用中应详细阅读说明书 由于酶联免疫吸附技术目前在技术上缺乏标准化,尽管目前上以及我国有了部分标准血清或参比血清(血清盘)。但由于受方法学及技术条件的限制,在酶联吸附测定中有时不可避免的会出现一定的非特异性,但我们可以通过以上措施把非特异性显色降至低限底,从而提高检测的特异性,并得到更准确、可靠的实验结果。 进口ELISA检测试剂盒为什么会呈现假阳性现象呢?上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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2022.10.12
标签:血清白蛋白 古朵生物 生物试剂 牛血清白蛋白(BSA)在生化实验技术资料详解 牛血清白蛋白(BSA),是牛血清中的一种球蛋白,包含607个氨基酸残基,分子量为66.446KDa,等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用。 主要成分: 1.蛋白质——是牛血清中主要成份。除包括可携带金属离子、脂肪酸和自身是激素类蛋白外主要还有白蛋白,球蛋白。 2.多肽——血小板促生长因子能促细胞分裂,是多肽家庭的主要成员之一,是主要的促细胞增殖因子;成纤维细胞生长因子、表皮细胞生长因子、神经细胞生长因子等,血清中含量虽很少,但对细胞生长也有一定作用。 3.激素——胰岛素:促进细胞摄取葡萄糖和氨基酸,与促细胞分裂有关;类胰岛素生长因子:能与细胞表达的胰岛素受体结合,从而有胰岛素同样的作用;促生长激素:促细胞增殖效应。 4.其他成份——氨基酸、葡萄糖、酮酸等对多种营养成分的合成培养基意义不大。与蛋白相结合状态的微量元素对细胞培养有意义。 结构与作用: 牛血清中的简单蛋白,是血液的主要成分(38g/1000ml),分子量68kD。等电点4.8。含氮量16%,含糖量0.08%。仅含己糖和己糖胺,含脂量只有0.2%。白蛋白由581个氨基酸残基组成,其中35个半胱氨酸组成17个二硫键,在肽链的第34位有一自由巯基。白蛋白可与多种阳离子、阴离子和其他小分子物质结合。血液中的白蛋白主要起维持渗透压作用、PH缓冲作用、载体作用和营养作用。在动物细胞无血清培养中,添加白蛋白可起到生理和机械保护作用和载体作用。牛血清白蛋白(BSA),又称第五组分,是牛血清中的一种球蛋白,包含583个氨基酸残基,分子量为66.430 Da,等电点为4.7。牛血清白蛋白在生化实验中有广泛的应用,例如在wesern blot中作为Blocking agent。 BSA一般做为稳定剂被用于限制酶或者修饰酶的保存溶液和反应液中,因为有些酶在低浓度下不稳定或活性低。加入BSA后,它可能起到“保护”或“载体”作用,不少酶类添加 BSA后能使其活性大幅度提高。不需要加BSA的酶加入BSA一般不会受到什么影响。对多数底物DNA而言,BSA可以使酶切完全,并可实现重复切割。在37℃,酶切反应超过1h时,BSA可以使酶加稳定,因为在不含BSA的反应缓冲液中,许多限制性内切酶在37℃下只能存活10"20min甚至短的时间。而BSA可以结合缓冲液或底物DNA中抑制限制性内切酶活性的金属离子和其它化学物质。 牛血清白蛋白(BSA)的用途如下: 1、用于生化研究、遗传工程和医药研究 2、用作医药保健食品、调味品 3、维持渗透压、pH缓冲、载体作用 4、在PCR体系中有助于Taq酶的稳定性及活性,可以提高PCR的效率 应用: 牛血清白蛋白(BSA)在生化实验中有广泛的应用, 例如在WB实验中加入BSA, 通过提高溶液中蛋白质的浓度,对酶起保护作用。防止酶的分解和非特异性吸附,能减轻有些酶的变性,减轻不利环境因素如加热,表面张力及化学因素引起的变性的 牛血清白蛋白(BSA)在生化实验技术资料详解 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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2022.10.11
标签:血清白蛋白 古朵生物 生物试剂 血清白蛋白和球蛋白的分析测定技术资料 【目的与原理]】 掌握血清白蛋白和球蛋白测定的原理和方法,并用盐析法测定水产动物血清中白蛋白和球蛋白的含量。 血清中含有多种不同成分的蛋白质,主要为白蛋白和球蛋白。用盐析法沉淀血清中球蛋白,用双缩脲法测定上清液中白蛋白,同时测定血清总蛋白。血清球蛋白的量从两者的差值求得。 【试剂与器材】 试剂: 1、球蛋白沉淀剂:称取硫酸钠(Na2SO4)208g,及亚硫酸钠(Na2SO3)70g,加入蒸馏水约900ml,并加入浓硫酸2ml,使蒸馏水酸化。不停搅拌,待完全溶解后将溶液移入1L容量瓶内,用蒸馏水稀释至1L刻度。保存于25℃以上的温度中。 2、双缩脲试剂 3、标准血清:市售或配制。 4、乙mi 器材: 可见分光光度计,离心机,试管若干及试管架,旋涡混合器,塑料试剂瓶,1L容量瓶,烧杯2个,吸管若干支,滤纸,擦镜纸。 【实验步骤】 1、准确吸取血清样本0.2ml,置于10×100mm试管内。以5ml刻度吸管加入球蛋白沉淀剂3.8ml,塞住管口,反复倒转混和10次(不宜过多)。以1ml刻度吸管吸取悬液1ml(相当于血清0.05ml),置于另一试管内,作为“总蛋白测定管”。剩余的混悬液另加乙mi约2ml,揿住管口,在约20秒钟内颠倒混和40次,然后经每分钟2500转的速度离心沉淀5分钟。此时试管内分成三层:上层为乙mi,中层为球蛋白,下层为澄清的白蛋白溶液。将试管斜置在桌面片刻或轻击试管,待蛋白块自管壁分离后,将1ml吸管插入白蛋白溶液中并吸取此溶液1ml(小心,准确,且不可触及球蛋白块片)。取出吸管,用滤纸拭去管尖可能附着的球蛋白沉淀,将白蛋白溶液加入另一试管内,作为“白蛋白测定管”。在另一试管内加入标准血清0.2ml及球蛋白沉淀剂3.8ml,混和后准确吸取混悬液1ml,加入一试管中作为“标准管”。再取一试管加球蛋白沉淀1ml,作为“空白管”。 2、每管中各加入双缩脲试剂4毫升,充分混和后置室温暗处30分钟,用540nm或绿色滤光片进行比色,以空白管校正光密度到0点,读取各管光密度读数。 3、计算 将所测得的光密度读数按下列公式计算出白、球蛋白含量及其比值: (1)总蛋白测定管光密度/ 标准管光密度×标准血清蛋白浓度(g/100ml)=血清总蛋白g/100ml (2)白蛋白测定管光密度/标准管光密度×标准血清蛋白浓度(g/100ml)=血清白蛋白g/100ml (3)血清总蛋白—血清白蛋白=血清球蛋白g/100ml (4)血清白蛋白÷血清球蛋白=血清白蛋白、球蛋白比值(A/G) 4、标准曲线绘制:同血清(浆)总蛋白测定双缩脲法 但用球蛋白沉淀剂代替生理盐水作为标准血清的稀释剂。 【方法评估】 本方法采用盐析法定量测定白蛋白和球蛋白的,用硫酸钠和亚硫酸钠分离血清白、球蛋白,所得结果与电泳法相符合。但由于盐类浓度较高,操作需在较高的温度下进行,否则将有结晶析出。在25℃操作时,无结晶析出。用亚硫酸钠作为沉淀剂除可在较低的温度操作外,还有另一个优点,即它具有缓冲作用。亚硫酸钠溶液呈碱性,其pH值高于所有血清蛋白的等电点,使各蛋白质均带有相同的电荷,这将有利于它们的分离。血清经盐析分离后,蛋白质的测定一般均用比色法。 【应用意义】 白蛋白和球蛋白的量是按鱼种不同而有所变化,一些鱼白蛋白>球蛋白,另一些鱼白蛋白 【注意事项】 1、某些用乙mi及离心沉淀不易得到白蛋白澄清液的标本,在加入球蛋白沉淀剂后,可不加乙mi,而用优质小张中速滤纸在37℃水浴箱中反复过滤多次,后可获得澄清液作白蛋白测定,必要时可按1:20比例扩大血清及球蛋白沉淀剂用量。 2、本法测定结果与电泳法相符合,但操作须在25℃以上的室温中进行。如受实验室条件限制,只能在较低的温度下进行测定时,可改用盐浓度较低的球蛋白沉淀剂(其它试剂及操作方法均与本法相同),但测定结果白蛋白值较本法略高。常用的低浓度球蛋白沉淀剂为23%硫酸钠溶液(无水硫酸钠230g,加蒸馏水至1L)或21%亚硫酸钠溶液(无水亚硫酸钠210g,加蒸馏水到1L) 血清白蛋白和球蛋白的分析测定技术资料 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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2022.10.11
标签:化学试剂 溶液 古朵生物 化学试剂及溶液的有效期您明白吗? >>纯种分离 化学试剂是进行化学研究、成分分析的相对标准物质,是化学实验重要的消耗性物资,广泛用于物质的合成、分离、定性和定量分析。试剂的有效日期是影响实验结果准确性的重要因素。 在实际使用过程中,人们总是习惯于用生产日期来判断化学试剂的有效性,其实这是不对的。化学试剂不像食品和药品有严格的保质期,化学试剂一般没有保质期的具体要求和界限,这与化学试剂的保质期受多方面因素影响有关,要根据化学性质、保存条件等,再结合工作的实际情况判断试剂是否出现变质、能否继续使用。 各种因素对化学试剂有效期的影响吧! 化学试剂一般没有注明保质期,确定试剂是否变质主要是凭经验和做新旧试剂对比试验。化学试剂的有效期随着化学品的化学性质的改变,有着很大的区别。一般情况下,化学性质稳定的物质,保存有效期就越长,保存条件也简单。 一般遵循以下几个原则(一般原则,不是原则): 无机化合物,只要妥善保管,包装完好无损,理论上可以长期使用。 但是容易氧化(如亚硫酸盐、苯酚、亚铁盐、碘化物、硫化物等应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放;水溶液亚硫酸、氢硫酸溶液要密封存放; 钾、钠、白磷要采用液封形式)、容易潮解的物质,在避光、阴凉、干燥的条件下,只能短时间(1~5年)内保存,具体要看包装和储存条件是否符合规定。 有机小分子量化合物,一般挥发性较强,包装的密闭性要好,可以长时间保存(3~5年),但容易氧化、受热分解、容易聚合、光敏性物质等,在避光、阴凉、干燥的条件下,只能短时间(1~5年)内保存,具体要看包装和储存条件是否符合规定。 有机高分子,尤其是油脂、多糖、蛋白、酶、多肽等生命材料,极易受到微生物、温度、光照的影响,而失去活性,或变质腐败,故此,要冷藏(冻)保存,而且时间也较短。 基准物质、标准物质和高纯物质,原则上要严格按照保存规定来保存,确保包装完好无损,避免受到化学环境的影响,而且保存时间不宜过长。一般情况下,基准物质必须在有效期内使用。在常温(15?C~25?C)下保存时间一般不超过 2个月,超过两个月要重新标定或检查之后再用。 培养基,按规定配制并消毒好培养基,冷至室温,保存在阴暗处(尽可能贮藏在冰箱内),配制好的培养基应在1个月内用完。 除另有规定外、试液、缓冲液、指示剂(液)的有效期均为半年。液相用的流动相、纯化水有效期为15天。除另有规定外,液体试剂开启后一年内有效,固体试剂开启后三年内有效。 化学试剂保存环境对有效期的影响 1.空气的影响: 空气中的氧易使还原性试剂氧化而破坏。强碱性试剂易吸收二氧化碳而变成碳酸盐,水分可以使某些试剂潮解、结块;纤维、灰尘能使某些试剂还原、变色等。 2.温度的影响: 试剂变质的速度与温度有关。夏季高温会加快不稳定试剂的分解;冬季严寒则促使甲醛聚合而沉淀变质。 3.光的影响: 日光中的紫外线能加速某些试剂的化学反应而使其变质(例如,银盐、汞盐、溴和碘的钾、钠、铵盐和某些酚类试剂)。 4.杂质的影响: 不稳定试剂的纯净与否、对其变质情况的影响不容忽视。例如纯净的实际上不受光的影响,而含有微量溴化亚汞或有机物杂质的遇光易变黑。 5.贮存期的影响: 不稳定试剂在长期贮存后可能发生歧化聚合,分解或沉淀等变化。在贮存期和有效期内液体如发现有分层、浑浊、变色、发霉等异常现象,流动相用于样品检测时,样品的保留时间或相对保留时间发生明显变化,固体如发现吸潮、变色等异常现象则应停止使用。 化学试剂的使用要求对有效期的影响 大多数化学品的稳定性还是比较好的,具体情况要由实际使用要求来判定。如果分析数据作为一般了解,或者分析结果没有特定的准确要求,如一般教学实验,对化学试剂的质量级别就可以做一般要求。但工厂化验数据为指导生产而用,化学试剂的质量指标不能含糊。 而用于一般合成制备使用的化学试剂,在大多数情况下,使用工业级别的化学试剂就可以满足。但研究型和某些特种化学品的合成制备,有些情况下,对原料的质量要求非常严格,需要严格把关。 对于储存期久的试剂可以用在要求不高的检测任务中,对可能变质的试剂可以与新购的试剂对比使用来判断是否变质了。只要化学性质不变,没有引入杂质原则上都能用。 化学试剂及溶液的有效期您明白吗?海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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2022.10.10
标签:古朵生物 瑞氏染液染色 溶液 古朵详述:瑞氏染液染色的具体步骤 瑞氏染液的染色步骤: 1.先用甲醇固定2~3分钟。 2.将血或骨髓涂片放置姬姆萨使用液15~30分钟。 3.涂片用自来水冲洗,在室温中干燥待查。 瑞氏染液的鉴定方法: 1.取1滴染液于乳白玻板上,自行迅速扩散开,其颜色变紫红色,且有伪足形成。 2.取1滴染液加1滴,缓冲液,染液由深蓝色立即变为紫红色。 3.取血片或骨髓片进行试染检查,观察染色后各类细胞的胞核、胞浆及颗粒着色,pH是否合适及染色合适时间。如有上述变化,表明染液合格,可供使用。 瑞氏染液的注意: (1)血涂片干透后固定,否则细胞在染色过程中容易脱落。 (2)冲洗时应以流水冲洗,不能先倒掉染液,以防染料沉着在血涂片上。冲洗时间不能过久,以防脱色。如血涂片上有染料颗粒沉积,可滴加甲醇,然后立即用流水冲洗。 (3)染色过淡可以复染,复染时应先加缓冲液,然后加染液。染色过深可用流水冲洗或浸泡,也可用甲醇脱色。 (4)瑞氏染色Ⅰ液由瑞氏染料、甲醇(AR级以上)和甘油组成,Ⅱ液为磷酸盐缓冲液(pH6.4~pH6.8)。 古朵详述:瑞氏染液染色的具体步骤上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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2022.10.10
标签:标准溶液 古朵生物 标准液 自行配制的标准溶液必配的要素! 标准溶液配制基本要求: 1.应采用具有高纯度的溶质或基准物质(如金属、金属氧化物或金属化合物;酸、碱、金属有机化合物、适宜的盐类、有机溶剂等)。 2.为确保配制标准溶液的可靠性、准确性,实验室的设备、环境设施均应满足其要求,(应有监测、控制和记录环境条件。特别对灰尘、电磁干扰、放射、温度、湿度、供电等)。 3.具有符合称量要求器具、应有正确称量的电子分析天平,并通过周期性的检定,有质检部门检定的证书。 4.要有配制标准溶液的纯度高的溶剂(采用双重蒸馏去离子水、高纯浓度的酸、碱或有机溶液)。 5.配制所用的器皿用具,必须根据所测项目要求,分类对器皿进行洁净的处理,且符合特定洁净的要求,保证所配的标准溶液无污染,对检测不产生不良影响。 6.应采用洁净的优质硬玻璃容量瓶作最终体积的容器。 7.根据所配标准溶液对盛放容器的要求,必须选用适当质料的洁净器皿存放标准溶液,并按规定要求(如避光、通风、阴凉、冷藏等条件)放置配制好的标准溶液。 8.必须作好配制标准溶液的原始记录的登记,标准溶液标签填写完整(如标准溶液名称、浓度mg/ml或mol/ml,配制人,配制日期、有效期等),并将标签贴在试剂瓶上。 金属标准溶液的配制和标定 1.水溶性金属标准溶液的配制 直接用经酸清洗或打光的高纯金属丝、棒、片,或高纯金属氧化物,或优级纯的(光谱级、基准纯度的)金属盐类,溶解于高纯度的酸中,加双重蒸馏去离子水配制成酸性水溶金属标准溶液。 2.非水金属标准溶液 将高纯或优级纯以上的金属有机化合物溶解于合适的高纯有机溶液中:(以C或C脂肪族酯或酮、C烷烃为佳)配制成非水金属标准溶液,或将金属离子转变为可萃络合物,用合适的高纯有机溶液萃取,有机相中的金属离子的含量通过它在测定水相中的含量,间接地加以标定。 3.标准贮备液 配制成的标准溶液,贮备液浓度一般为1.00mg/1.0m1,或100μg/1.0ml,含酸量为10%。如,用高压聚乙/烯瓶盛装并且密封好,常温下可保证2a,4℃冰箱中冷藏4a,其含量可保持基本不变。 4.标准工作液用贮备液 稀释成工作液溶液的酸度为5%,选用适合存放溶液的酸度为5%的硬质玻璃瓶,常温下可保存2~3个月其含量不变。 5.标准工作液稀释成使用工作液 溶液的酸度为1%酸度时,玻璃瓶装1周内不变;溶液的酸度为0.2%酸度,用玻璃瓶装的只能当天配当天使用,如用高压聚乙/烯瓶盛装可保存1周,用四氟乙/烯瓶装则保存的时间可为2个月左右。 6.酸化的金属标准液 金属标准溶液用盐酸酸化至pH=2.0时,用聚乙/烯容器瓶盛装,可保证金属元素不受损失其结果令人满意;贮备液浓度应于1.0mg/ml以上;硬质玻璃瓶和塑料瓶中元素的数值,其未经盐酸酸化的比经过盐酸酸化的损失要少;浓度 常用标准溶(水溶液)的配制和标定 1.标准溶液的标定 用优级纯以上的酸、碱或强溶解性的相应盐类等基准物质,用双重蒸馏去离子水溶解于容量瓶中,并定容至所需的贮备溶液,浓度为(mol/L),并按要求选取洁净容器盛装,贴好标签,按规范要求贮存。 2.标定物质 应选用基准物质的纯试剂作为标定物质,标定前应干燥至恒重,并准确称取。 3.标定过程 标准溶液在标定过程中,严格执行2人双平行标定,用精确的标定物,对标准溶液进行标定、计算,在误差很小,数据又相当接近的情况下,则取平均值为该标准溶液的浓度。 4.标定时间 常温下1.000mol/L及以上浓度贮备液,应每2a标定1次;0.5000mol/L浓度贮备液,应每1a标定1次;0.1000mol/L浓度贮备液,应每6个月标定1次;低于0.1000mol/L浓度的应用液,应每3个月标定1次。 标准溶液配制注意事项 自配制的标准溶液作为工作标准溶液的,一般用于日常检验分析,不用于其他具有法律效应的检测结果。除非能够证明其作为测量参考标准的性质不会失效。 有机溶液的标准物质在贮存过程中,应避免标准溶液与塑料胶木瓶盖直接接触。 对使用量较大的自配的标准贮备原液,必要时与有证的、并在有效期内的标准物质进行比对,避免发生化学变化,以确保自配标准溶液量值的准确性。 自行配制的标准溶液必配的要素!上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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2022.10.09
标签:γ-氨基丁酸 古朵生物 GABA elisa测试盒 古朵带您了解γ-氨基丁酸(GABA) elisa测试盒 ELISA试剂盒规格: (1) 规格:96T 可以测90个样,5个标准孔,1个空白孔 (2) 规格:48T 可以测42个样,5个标准孔,1个空白孔 大鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA试剂盒产品种属分布: 家禽类:鸡、鸭、鹅等。 飞禽类:鸽子、鸟类等。 水产类:鱼、牛蛙等。 动物类:小鼠、大象、虎、羊、马、蝌蚪、蟾蜍、牛、熊猫、金黄地鼠、猪、兔、蜥蜴、河马、猕猴、类人猿、狒狒、鹿等。 【产品货号】:GD-S1977-A 【中文名称】:大鼠γ氨基丁酸(GABA)ELISA试剂盒 【英文名称】:Rat Gamma-aminobutyric acid,GABA ELISA Kit 【产品规格】:48T/96T 【试剂盒检测目的】用于测定血清,血浆及相关液体等样本。例如适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本。 【详细说明】性能:敏感性高,特异性强,重复性 古朵生物公司长期提供酶联免疫Elisa试剂盒、ELISA检测试剂盒、人Elisa试剂盒、大小鼠Elisa试剂盒、抗体抗原、各种系列ELISA检测试剂盒,仅适用于科研,不适用于临床诊断。公司还将提供免费代测服务。本公司试剂盒供货方式为快递,有效保障了全国到货的及时性,外地及偏远地方三至五天即可到货,请广大客户放心购买,我司将竭诚为您服务。 古朵带您了解γ-氨基丁酸(GABA) elisa测试盒上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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2022.10.09
标签:抗体 重组蛋白 古朵生物 抗原抗体 抗体与重组蛋白的使用及保存方法一致吗? 无论是保存还是运输,请避免反复冻融。反复冻融,冰晶会破坏抗体和重组蛋白的空间结构,导致蛋白变性形成多聚体和重组蛋白构象改变,从而降低抗体的结合能力,也加快了抗体球蛋白和重组蛋白的降解速度。抗体和重组蛋白保存得当与否,直接决定了抗体和重组蛋白的活性使用效果,如果保存得当,抗体和重组蛋白活性大部分都可以维持数年。 1. 抗体和重组蛋白后的操作 收到抗体和重组蛋白后(大部分抗体和重组蛋白是溶液态),请务必在 4℃,12000rpm,离心 3 分钟,再打开管盖进行分装、溶解和保存(如果抗体和重组蛋白体积小于 50?l,请延长离心时间至 5 分钟,以保证全部抗体和重组蛋白均离心下来,干粉状态的同样适用)。抗体和重组蛋白使用特制的储存管,只有在 12000rpm 离心 3 分钟,才能将附着在管壁或盖内的抗体和重组蛋白全部离心下来(即使是在 10000rpm 离心也会离心不完全,导致出现抗体和重组蛋白的量不足的现象)。请详细阅读说明书,并按照推荐的保存条件正确保存和使用抗体和重组蛋白。 2. 抗体和重组蛋白的长期保存 对于 大部分抗体和重组蛋白,比较合适的保存方式是:抗体分装后保存在 -20℃,重组蛋白分装后保存在 -80℃。 (1)分装可以-大程度的降低反复冻融对抗体和重组蛋白活性的损害,同时也降低了由于多次从同一管中吸取抗体和重组蛋白造成的污染可能性。 (2)分装的量以一次实验用完为好,少不能少于 10 ?l 每份。因为分装体积越小,抗体和重组蛋白的浓度越可能会受到蒸发以及管壁吸附的影响。 (3)复融后的分装抗体和重组蛋白如果一次用不完,将剩余母液保存在 4℃,避免再冻起来。 (4)抗体和重组蛋白工作液应该当天配制当天用完,4℃ 保存尽量不要超过 1 天。 (5)绝-对避免将抗体和重组蛋白保存在自动除霜冰箱中,将抗体和重组蛋白保存在冰箱里层,避免温度变化造成反复冻融。 3. 抗体和重组蛋白的短期保存 大部分 的抗体和重组蛋白收到后 4℃ 短暂保存 1~2 周,对抗体和重组蛋白活性没有影响。如果抗体和重组蛋白很快会使用(1~2 周内),推荐在 4℃ 保存,这是为了避免反复冻融对抗体和重组蛋白活性的损害。关键的一点是要根据说明书推荐的方式来正确的保存抗体和重组蛋白。 4. 抗体和重组蛋白的运输条件 一般的运输过程需要 1~2 周的时间,所以是在低温 4℃ 的条件下来完成的。4℃ 运输主要的目的是为了避免反复冻融对抗体和重组蛋白活性的损害(如果使用干冰运输,那么收到时抗体和重组蛋白是冻起来的,为了分装就需要解冻,这就多了一次冻融的过程),所以运输过程中一般避免干冰运输。 5. 抗体和重组蛋白的稳定性 (1)抗体的稳定性是自然界长期进化的结果,抗体是免疫系统中重要的分子之一,其稳定性是自然进化筛选的结果,在众多物种中,抗体分子形成了保守而稳定的结构。 (2)抗体的高Tm值,在室温下,甚至短时间温度达到 50~60℃,抗体分子都能维持正确折叠,保持其应有的活性。 (3)抗体和重组蛋白的纯度。 采用先进的抗体和重组蛋白纯化技术,确保抗体和重组蛋白产品的高纯度,保障其抗体和重组蛋白产品的稳定性。 (4)抗体和重组蛋白的浓度。高浓度的抗体和重组蛋白产品可减少容器表面吸附造成的物质损失,高浓度的抗体和重组蛋白稳定性更好。 大部分抗体和重组蛋白浓度为 1mg/ml,抗体和重组蛋白纯度高,特异性好,效价更高。 6. 重组蛋白的特性 重组蛋白分为冻干粉和溶液态两种保存形式,原核细胞表达的重组蛋白为冻干粉状态,真核细胞表达的重组蛋白为溶液态保存,这样使得重组蛋白非常稳定,在 -80℃ 条件下可保存数年。冻干粉在使用前需进行溶解,其中溶解的方法非常关键,因为溶解不好会降低蛋白的效用。溶液态保存的重组蛋白在冻融稀释使用过程中也需要仔细注意,这些都是用户在实际应用中经常遇到的问题。 (1)原核细胞表达的重组蛋白。 大肠杆菌表达的冻干重组蛋白,已经从包涵体中提纯,添加了蛋白保护剂,使用过滤后的无菌水作为复溶剂即可,复溶冻干蛋白 100?g,用 86?l 的超纯水,轻轻摇晃使蛋白溶解,再用移液枪的枪头轻吹几下即可完全溶解,一定不能使用涡旋仪进行快速振荡或剧烈摇晃。 (2)真核细胞表达的重组蛋白。有活性的蛋白质不仅要转录和翻译,还要进行翻译后的加工,使得蛋白质的空间折叠方式维持正常,所以重组蛋白必须在真核细胞中进行,如哺乳动物细胞能够识别和去除基因中的内含子,对翻译后的蛋白质进行加工,这样表达的蛋白质具有生物活性。我们用溶液态来保存,保持了其良好的活性和稳定性。 (3)重组蛋白的保护剂。在冻干和储存过程中常用的保护剂或稳定剂有糖类,多元醇,聚合物,表面活性剂,某些蛋白和氨基酸等。我们通常加 8%(质量比体积)的海藻糖和作为冻干保护剂。海藻糖可明显阻止蛋白质二级结构改变以及冻干过程中蛋白质的伸展和聚集,也是一种普遍应用的冻干保护剂和填充剂。 抗体与重组蛋白的使用及保存方法一致吗?上海古朵生物科技有限公司,由具有资深行业背景和丰富市场经验的专业人士组成,致力于为生命科学研究领域提供优质产品,为广大科研工作者提供服务。 既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。 抗体与重组蛋白的使用及保存方法一致吗? 古朵生物既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。产品涵盖有机试剂、无机试剂和生 化试剂,标准物质、天然植物提取物及中药标准品,核酸、酶、缓冲剂、显色底物,医药中间体、原料药、催化剂、高纯溶剂、特种高分子材料及实验室常用耗材。 品种类超过2万种,广泛应用于细胞药理、药剂、分子生物学等科研领域。
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2022.10.08
标签:单抗 古朵生物 抗原抗体 如何确定选择单抗还是多抗定制? 多抗是多个B细胞克隆产生的针对多种抗原表位的多种抗体混合物,单抗是一个B细胞克隆产生的针对一种抗原表位的的单一抗体。对抗体的特异性要求高,用量较大或需要长期使用一致的抗体,制备的抗体应用要求多。例如,WB/IP/IF/ICC等,一般选择单抗。对抗体的特异性要求不高,需要做沉淀和凝集反应的检测性实验或者只需做ELISA检测,一般选择多抗。 单克隆抗体 优点 特异性强 背景噪音低 几乎不存在交叉反应 批次间差异小 缺点 制备周期长 费用高 难以识别与免疫原蛋白具有高度同源性的蛋白 应用 检测特定抗原 免疫组织化学、免疫细胞化学和免疫荧光实验 检测分子构象或磷酸化状态的变化 免疫治疗 多克隆抗体 优点 由于识别多个表位,对抗原的亲和力 更高稳定性好 易于生产,价格便宜,时间短 缺点 存在批次间差异 存在交叉反应 背景噪音高 应用 检测具有高抗原同源性的抗原的亚型 检测可能具有遗传多态性、糖基化或构象改变的靶点 在具有不同PH和盐浓度的溶液中检测目标抗原 如何确定选择单抗还是多抗定制? 古朵生物既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。产品涵盖有机试剂、无机试剂和生 化试剂,标准物质、天然植物提取物及中药标准品,核酸、酶、缓冲剂、显色底物,医药中间体、原料药、催化剂、高纯溶剂、特种高分子材料及实验室常用耗材。 品种类超过2万种,广泛应用于细胞药理、药剂、分子生物学等科研领域。
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2022.10.08
标签:伊文思蓝 古朵生物 标准品 伊文思蓝的主要应用? 主要应用: 伊文思蓝属于一种常用的偶氮染料制剂,在血液中与血浆白蛋白有很高的亲和力,因此在神经科学研究中常被用于示踪剂观察血脑屏障(BBB)的完整性,也用于测定血容量。 测定血脑屏障完整性 由于正常状态下血浆白蛋白无法透过血脑屏障,所以染色时,如神经系统是完整的,与血浆白蛋白结合的依文思蓝无法使其着色。相反如果神经系统血脑屏障被破坏,依文思蓝就可以进入神经系统并使其着色。在荧光波长470与540 nm 各有一强峰,680 nm处有一弱峰 。其在组织中的含量常使用化学透析法和比色法进行检测。 染色区分活细胞 有活性的细胞因有外排功能而无法被伊文思蓝染色,因此可以通过此方法在显微镜下区分死细胞与活细胞,缺点是难以区分死亡与坏死。 测定血容量 作临床药物用于测定血浆和血容量,也可作动脉插管(化疗)的定位用。 用量用法:每次以25mg用1~2ml等渗盐水稀释后空腹时静注,9分钟后抽血测定。 注意事项: 使用时注意远离火源。穿戴适当的防护服和手套。 若发生事故或感不适,立即就医(可能的话,出示其标签)。避免接触,使用前须获得特别指示说明。 伊文思蓝的主要应用? 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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2022.09.30
标签:α1微球蛋白 古朵生物 ELISA试剂盒 人试剂盒 古朵| 人α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒资料 人α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒使用说明,用途,规格,保质期,价格,品牌等详情,本司提供ELISA试剂盒代测服务,一周内出结果,ELISA种属有:大鼠ELISA检测试剂盒,小鼠ELISA检测试剂盒,人ELISA试剂盒,马ELISA检测试剂盒,羊ELISA检测试剂盒,猴ELISA试剂盒,猪ELISA试剂盒,狗ELISA检测试剂盒,植物ELISA试剂盒,猴ELISA试剂盒,其他动试剂盒,欢迎来电订购! 中文名:人α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒使用说明 英文简称:Human α1-microglobulin,α1-MG ELISA kit 供应商:上海古朵 规格:48T , 96T 存储条件: 频繁使用时(2-8摄氏度),较长时间储存时(-20摄氏度) 有效期:2-8摄氏度2周,-20摄氏度 存放6个月 使用范围:本产品仅科研实验,严禁用于临床使用 人α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒使用说明 检测中样品的处理 1.细胞培养物上清:细胞培养物于室温1000g,离心10分钟后收集上清,并将标本保存于-20℃,且应避免反复冻融。 2.血清:标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g,4℃离心20分钟,取上清即可检测,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。 3.血浆:可用EDTA或肝素作为抗凝剂标本采集后30分钟内于2-8℃,1000g离心15分钟,或将标本放于-20℃保存,但应避免反复冻融。 4.尿液:无菌收集取初尿,离心除去沉淀物,即可用于检测,要长期保存尿样,可以加入0.05%的NaN3在4-8℃保存,或加入尿样冰冻保护液放入-20℃冰箱长期保存。 5.组织匀浆:将组织标本先用PBS洗涤,除去多余血液,匀浆化后放在PBS于-20℃放置过夜,再经过二次反复冻融破膜,5000g,4℃离心5分钟,取上清即可检测。注:取样和样品处理过程中,防止有毒物质对操作人员的危害,要采取相应的保护措施。 人α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒使用说明 使用原理: 1,ELISA的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。 2,结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性,酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性,又保留酶的活性。 3,在测定时,受检标本(测定其中的抗体或抗原)与固相载体表面的抗原或抗体起反应。 4,用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。 5,此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后,底物被酶催化成为有色产物,产物的量与标本中受检物质的量直接相关,故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。 6,由于酶的催化效率很高,间接地放大了免疫反应的结果,使测定方法达到很高的敏感度。 注意事项: 1.试剂盒从冷藏环境中取出应在室温平衡15-30分钟后方可使用,酶标包被板开封后如未用完,板条应装入密封袋中保存。 2.浓洗涤液可能会有结晶析出,稀释时可在水浴中加温助溶,洗涤时不影响结果。 3.各步加样均应使用加样器,并经常校对其准确性,以避免试验误差。一次加样时间控制在5分钟内,如标本数量多,推荐使用排枪加样。 4. 请每次测定的同时做标准曲线,做复孔。如标本中待测物质含量过高(样本OD值大于标准品孔一孔的OD值),请先用样品稀释液稀释一定倍数(n倍)后再测定,计算时请后乘以总稀释倍数(×n×5)。 5. 封板膜只限一次性使用,以避免交叉污染。 6.底物请避光保存。 7.严格按照说明书的操作进行,试验结果判定必须以酶标仪读数为准. 8.所有样品,洗涤液和各种废弃物都应按传染物处理。 9.本试剂不同批号组分不得混用。 10. 如与英文说明书有异,以英文说明书为准。 古朵| 人α1微球蛋白(α1-MG)ELISA试剂盒资料 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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2022.09.30
标签:DAPI染DNA 生物试剂 古朵生物 DAPI染DNA的原理及使用方法@古朵资讯 DAPI 即4',6-二脒基-2-苯基吲哚(4',6-diamidino-2-phenylindole),分子式为C16 H15 N5 ·2C3 H6 O3 ,分子量457.48。 DAPI 是一种能够与DNA强力结合的荧光染料。它结合到双链DNA小沟的AT碱基对处,一个DAPI分子可以占据三个碱基对的位置。结合到双链DNA上DAPI分子的荧光强度提高大约20倍,常用与荧光显微镜观测,根据荧光的强度可以确定DNA的量。另外,因为DAPI可以透过完整的细胞膜,它可以用于活细胞和固定细胞的染色。 在荧光显微镜观察下,DAPI染剂是利用紫外光波长的光线激发。单独DAPI的大吸收波长为340nm,大发射波长为488nm;当DAPI与双链DNA结合时,大吸收波长为364nm,大发射波长为454nm(10 mM Tris pH7.0,100 mM NaCl,10 mM EDTA),其发散光的波长范围含盖了蓝色至青绿色。DAPI也可以和RNA结合,但产生的荧光强度只有与DNA结合的荧光强度的1/5,其发散光的波长范围约在500nm左右。 DAPI的配制及贮存: 固体粉末 :避光,2-8 ℃保存,3年没有问题。 贮存液 :用无菌水配制成浓度1 mg/ml 的贮存液,配好后用锡纸包起来,避光,可在-20 ℃下长期保存。(DAPI易溶于水,在PBS中溶解度不高) 使用浓度 :贮存液用1xPBS稀释到终浓度100 ng/ml。 荧光封片液 :0.5 mol/L碳酸盐缓冲液与甘油等体积混合,pH9.5 染色与观察 :制好的玻片上滴加几滴DAPI染液,染色10分钟,流水冲去染液,滤纸吸除多余水分,加一滴荧光封片液,置于荧光显微镜下观察,激发波长360-400nm。 注意事项 :DAPI可能具有致癌性,全部操作过程中必须带塑料或乳胶手套。 推荐厂商 :Invitrogen,Sigma 结构式 : 以下英文介绍摘自Wikipedia 。 DAPI or 4',6-diamidino-2-phenylindole is a fluorescent stain that binds strongly to DNA. It is used extensively in fluorescence microscopy. Since DAPI will pass through an intact cell membrane, it may be used to stain both live and fixed cells. For fluorescence microscopy, DAPI is excited with ultraviolet light. When bound to double-stranded DNA its absorption maximum is at 358 nm and its emission maximum is at 461 nm. (This emission is fairly broad, and appears blue/cyan.) DAPI will also bind to RNA, though it is not as strongly fluorescent. Its emission shifts to around 500 nm when bound to RNA. DAPI's blue emission is convenient for microscopists who wish to use multiple fluorescent stains in a single sample. There is fluorescence overlap between DAPI and green-fluorescent molecules like fluorescein and green fluorescent protein (GFP), or red-fluorescent stains like Texas Red, but using spectral unmixing or taking images sequentially can get around this. Apart from labelling cell nuclei, the most popular application of DAPI is in detection of mycoplasma or virus DNA in cell cultures. Because DAPI easily enters live cells and binds tightly to DNA, it is toxic and mutagenic. Care should be taken in its handling and disposal. The Hoechst stains are similar to DAPI in that they are also blue-fluorescent DNA stains which are compatible with both live- and fixed-cell applications DAPI染DNA的原理及使用方法@古朵资讯 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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2022.09.29
正值国庆佳节之际,首先感谢您对古朵生物一直以来的支持。在您的支持和信赖下,我们才得以在激烈的市场环境下不断进步! 根据国家法定假期的规定,并结合公司实际情况,现对国庆节放假做如下安排:2022年国庆节放假时间为10月1日(周六)—10月7日(周五),共7天。10月8日-10月9日(周六,周日)正常上班。如有需要请客户及早下单备货以免耽误您的宝贵时间,网站客服(18321664727 QQ:2712232205) 温馨提示:根据以往出行经验,很容易导致汽车扎堆,节前出门不妨做好功课,随时留意路况信息,以免赶上拥堵路段,另外游客出行会比较集中。车流量也会较大,请路上注意安全!节假日期间我司不安排人员值班,如有产品咨询以及技术问题留言到我司网-站,我们会在节假日为您报价处理,感谢您对上海古朵生物的信赖和支持!在此我司全体员工提前祝各位科研人员以及新老客户节日快乐! 上海古朵生物科技有限公司 2022年9月29日
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2022.09.29
标签:细胞因子 古朵生物 生物试剂 古朵阐述:细胞因子的分类和选择标准 2017 年是 CAR-T 细胞疗法的元年,使得越来越多的人开始关注细胞治疗领域,包括干细胞治疗、TCR-T 疗法等等。几乎所有的细胞治疗都有一个共同点,即都需要使用细胞因子来诱导细胞增殖或分化。 细胞因子虽然在细胞中含量很少,但是种类丰富,并且是作用广泛,那么,到底什么是细胞因子?细胞因子的作用是什么?怎么选择合适的细胞因子?我们跟随本生小编一起来看看。 什么是细胞因子? 为了维持机体的生理平衡,抵抗病原微生物的侵袭,防止肿瘤发生,机体的许多细胞,特别是免疫细胞合成和分泌许多种微量的小分子量可溶性蛋白与多肽类因子,这样一大类因子已发现的有上百种,统称为细胞因子。 它们在细胞之间传递信息,可广泛调控机体免疫应答、细胞生长分化以及造血功能,并参与炎症损伤等病理过程,在异常情况下也有可能引起发烧、炎症、休克等病理过程。 细胞因子包括淋巴细胞产生的淋巴因子、单核细胞产生的单核因子、各种生长因子等。 细胞因子的分类: ■ 白细胞介素因子(interleukin,IL):由淋巴细胞、单核细胞或其它非单个核细胞产生的细胞因子,在细胞间相互作用、免疫调节、造血以及炎症过程中起重要调节作用。 ■ 集落刺激因子(colonystimulatingfactor,CSF):能够刺激不同发育阶段的造血干细胞和祖细胞增殖的分化,还可促进成熟细胞的功能。 ■ 干扰素(interferon,IFN):***初发现某种病毒感染的细胞能产生一种物质可干扰另一种病毒的感染和复制,因此得名。由白细胞、成纤维细胞和活化T细胞所产生,具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等作用。 ■ 肿瘤坏死因子(tumornecrosisfactor,TNF):***初发现这种物质能造成肿瘤组织坏死而得名,除具有杀伤肿瘤细胞外,还有免疫调节、参与发热和炎症的发生。 ■ 转化生长因子 -β 家族(transforminggrowthfactor-βfamily,TGF-βfamily):由多种细胞产生,主要包括 TGF-β1、TGF-β2、TGF-β3、TGFβ1β2 以及骨形成蛋白(BMP)等。 ■ 趋化因子家族(chemokine family):能够趋化细胞的迁移,吸引白细胞移行到感染部位,在炎症反应中具有重要作用。 ■其它细胞因子:如表皮生长因子(EGF)、血小板衍生的生长因子(PDGF)、成纤维细胞生长因子(FGF)、肝细胞生长因子(HGF)、白血病抑制因子(LIF)、神经生长因子(NGF)等等。 细胞因子的作用: 细胞因子研究有助于阐明分子水平的免疫调节机理,有助于疾病的预防、诊断和治疗,因此相关研究具有非常重要的理论和实用意义,应用前景广阔。 利用基因工程技术生产的重组细胞因子已用于治疗肿瘤、感染、炎症、造血功能障碍等,并收到良好的疗效。 作用类型:参与免疫应答与免疫调节、刺激造血功能、细胞因子与神经-内分泌-免疫系统网络。 作用方式:1. 自分泌作用。2. 旁分泌作用。3. 内分泌作用。 作用特点:多效性、重叠性、协同性、拮抗性。 必看:细胞因子产品选择标准 种属来源: 我们可以提供多种不同种属来源的细胞因子等重组蛋白,例如人源、小鼠源、大鼠源等等,可以根据实验需求选择合适的种属。 一般来说,不同种属之间蛋白同源性(序列一致性)在80%以上的基本上可确定为有交叉活性,可推荐使用。 古朵阐述:细胞因子的分类和选择标准 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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2022.09.28
标签:Ⅱ型胶原抗体 古朵生物 试剂盒 人Ⅱ型胶原抗体(ColⅡ Ab)试剂盒技术说明 实验原理 人Ⅱ型胶原抗体(ColⅡ Ab)试剂盒(ELISA)采用间接法酶联免疫吸附试验(ELISA)。往预先包被人Ⅱ型胶原抗体(ColⅡ Ab)捕获抗原的包被微孔中,依次加入标本、标准品、HRP标记的检测抗体,经过温育并彻底洗涤。用底物TMB显色,TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的黄色。颜色的深浅和样品中的人Ⅱ型胶原抗体(ColⅡ Ab)呈正相关。用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度(OD 值),计算样品浓度。 人Ⅱ型胶原抗体(ColⅡ Ab)试剂盒(ELISA)样本处理及要求 1. 血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 2. 血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 3. 组织匀浆:用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织,去除残留血液(匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果),称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS(一般按1:9的重量体积比,比如1g的组织样品对应9mL的PBS,具体体积可根据实验需要适当调整,并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂)加入玻璃匀浆器中,于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞,可以对匀浆液进行超声破碎,或反复冻融。后将匀浆液于5000×g离心5~10分钟,取上清检测。 4. 细胞培养物上清或其它生物标本:请1000×g离心20分钟,取上清即可检测,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。 注:标本溶血会影响后检测结果,因此溶血标本不宜进行此项检测。 需要而未提供的试剂和器材 1.酶标仪(450nm) 2.高精度加样器及枪头:0.5-10uL、2-20uL、20-200uL、200-1000uL 3.37℃恒温箱 4.蒸馏水或去离子水 人Ⅱ型胶原抗体(ColⅡ Ab)试剂盒备注: 1. 标准品浓度依次为: 64、 32、16、8、 4、2 ng/mL 2. 经过大量正常标本检验,标本的正常浓度值均在试剂盒提供的检测范围内,实验过程中直接取50μL样本上样即可。当有部分样本值超过大标准品浓度时,可用样本稀释液将标本进行适当稀释后再进行实验。 注意事项 1.严格按照规定的时间和温度进行温育以保证准确结果。所有试剂都必须在使用前达到室温20-25℃。使用后立即冷藏保存试剂。 2.洗板不正确可以导致不准确的结果。在加入底物前确保尽量吸干孔内液体。温育过程中不要让微孔干燥掉。 3.消除板底残留的液体和手指印,否则影响OD值。 4.底物显色液应呈无色或很浅的颜色,已经变蓝的底物液不能使用。 5.避免试剂和标本的交叉污染以免造成错误结果。 6.在储存和温育时避免强光直接照射。 7.平衡至室温后再打开密封袋以防水滴凝聚在冷板条上。 8.任何反应试剂不能接触漂白溶剂或漂白溶剂所散发的强烈气体。任何漂白成分都会破坏试剂盒中反应试剂的生物活性。 9.不能使用过期产品。 10.如果可能传播疾病,所有的样品都应管理好,按照规定的程序处理样品和检测装置。 人Ⅱ型胶原抗体(ColⅡ Ab)试剂盒试剂准备 人Ⅱ型胶原抗体(ColⅡ Ab)试剂盒(ELISA)从冷藏环境中取出应在室温平衡后方可使用。 20×洗涤缓冲液的稀释:蒸馏水按1:20稀释,即1份20×洗涤缓冲液加19份蒸馏水。 操作步骤 1.从室温平衡20min后的铝箔袋中取出所需板条,剩余板条用自封袋密封放回4℃。 2.设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL; 3.样本孔中加入待测样本50μL;空白孔不加。 4.除空白孔外,标准品孔和样本孔中每孔加入辣根过氧化物酶(HRP)标记的检测抗体100μL,用封板膜封住反应孔,37℃水浴锅或恒温箱温育60min。 5.弃去液体,吸水纸上拍干,每孔加满洗涤液(350μL),静置1min,甩去洗涤液,吸水纸上拍干,如此重复洗板5次(也可用洗板机洗板)。 6.每孔加入底物A、B各50μL,37℃避光孵育15min。 7.每孔加入终止液50μL,15min内,在450nm波长处测定各孔的OD值。 实验结果计算 以所测标准品的OD值为横坐标,标准品的浓度值为纵坐标,在坐标纸上或用相关软件绘制标准曲线,并得到直线回归方程,将样品的OD值代入方程,计算出样品的浓度。 人Ⅱ型胶原抗体(ColⅡ Ab)试剂盒 试剂盒性能 1.检测范围:2 ng/mL – 64 ng/mL。 2.灵敏度:低检测浓度小于0.1 ng/mL。 3.特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。 4.重复性:板内变异系数小于10% ,板间变异系数小于15% 。 人Ⅱ型胶原抗体(ColⅡ Ab)试剂盒应用 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
参数原理
2022.09.28
标签:人ELISA试剂盒 古朵生物 ELISA检测试剂盒 人ELISA试剂盒资料详解由上海古朵供应,上海古朵生物专业经营进口分装和原装标准品|对照品、国产/进口elisa试剂盒,国产/进口血清,生化试剂,培养基等科研生化试剂等。免费提供产品报价、实验原理、产品用途以及中英文说明书。我司多年为各大院校,各类医院,生物工程医药实验室以及其他行业科研消费者提供全面、周到的采购,上海古朵欢迎您的来电订购! 名称:人血管生成素ELISA试剂盒 英文名:Human Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit 供应商:上海古朵 参数规格:48T/96T 样本:血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。 产品特点:敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存,操作简便。 产品用途:用于测定血清,血浆及相关液体样本中相关含量或活性。 种属:人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。 人血管生成素ELISA试剂盒价格 操作流程: (1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl,每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔,每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔,加入纯细胞裂解液100μl。 (2)酶标板置4℃,包被过夜。 (3)洗板:吸干孔内反应液,用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后,即甩去),之后将洗涤液注满板孔,浸泡1-2分钟,间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。 (4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl,样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。 (5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 (6)洗板,同(4)。 (7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。 (8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内,孵育60min。 (9)洗板,同(4)。 (10)每孔加TMB显色液 100μl,轻轻混匀10s,置37℃暗处反应15-20min。 (11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。 (12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2,终测得的OD值为两者之差(W1-W2),以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。 (13)数据处理:在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后,计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。 人ELISA试剂盒资料详解 检测试剂注意事项: 1. 此试剂为体外检测试剂,效期内使用,试剂应视为传染物,不同总批号的试剂不能混用。 2. 使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟, 3. 浓缩洗涤液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟。 4. 浓缩样品稀释液出现结晶后,请于37℃孵育15分钟 5. 若24小时内进行实验,标本可存放于2~8℃。不需及时实验,标本-20℃保存,避免反复冻融。 6. 在反复清洗微孔板,并扣干微孔中的残余液体,否则将降低精确度,造成吸光度偏离的假像。 7. 加样完毕后,应注意轻微摇动微孔反应条,以便使孔中的液体充分混匀。 8. 试剂盒保存于2~8℃,请勿冷冻,有效期请见盒内标示。 人ELISA试剂盒资料详解 操作步骤: 1. 取出试剂盒,于室温(20-25℃)放置15-30分钟。实验过程应在室温(20-25℃)内进行。 2. 取出酶标板,按照标准品的次序分别加入50μl的标准品溶液于空白微孔中。 3. 空白微孔中加入50μl的样品,空白对照加入50μl的蒸馏水; 4. 在样品孔中加入10μl的生物素;(不含空白对照孔,切忌:生物素只加样品孔!) 5. 在各孔中加入100μl的酶标记溶液;(不含空白对照孔) 6. 将酶标板用封口胶密封后,37℃孵育反应 1小时;(在孵育箱中保持稳定的温度与湿度) 7. 充分清洗酶标板3-5次,保持各孔有充足的水压;(浓缩洗涤液以1:100的比例与蒸馏水稀释) 8. 酶标板洗涤后用吸水纸彻底拍干; 9. 各孔加入显色剂A、B液各50μl;(不含空白对照孔) 10. 20-25℃下避光反应15分钟; 11.各孔加入50μl终止液,终止反应; 人ELISA试剂盒资料详解 上海古朵生物科技有限公司,由具有资深行业背景和丰富市场经验的专业人士组成,致力于为生命科学研究领域提供产品,为广大科研工作者提供服务。既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。产品涵盖有机试剂、无机试剂和生化试剂,标准物质、天然植物提取物及中药标准品,核酸、酶、缓冲剂、显色底物,医药中间体、原料药、催化剂、高纯溶剂、特种高分子材料及实验室常用耗材。品种类超过2万种,广泛应用于细胞药理、药剂、分子生物学等科研领域。
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2022.09.27
标签:胰蛋白酶 古朵生物 琼脂糖凝胶4B 胰蛋白酶-琼脂糖凝胶4B技术资料 上海古朵生物专业经营进口分装和原装标准品|对照品、国产/进口elisa试剂盒,国产/进口血清,生化试剂,培养基等科研生化试剂等。免费提供产品报价、实验原理、产品用途以及中英文说明书。我司多年为各大院校,各类医院,生物工程医药实验室以及其他行业科研消费者提供全面、周到的采购,上海古朵欢迎您的来电订购! 中文名称:胰蛋白酶-琼脂糖凝胶4B 英文名称:Trypsin Sepharose 4B 粒径:45-165um 载量:10mg 胰蛋白酶抑制剂 应用:亲和色谱填料,纯化胰蛋白酶抑制剂、抑肽酶 包装:25毫升/瓶,100毫升/瓶 特点:1、纯化效果更专一;2、载量高,寿命长。 胰蛋白酶-琼脂糖凝胶4B使用说明书 定性强、梯度性好、超越ACS标准、低水分、低蒸发残渣、广泛应用于教学、科学研究、分析测试中,是进行化学实验、材料分析和精细化学品合成所必须的,保证不同批次产品的质量稳定低紫外吸收背景。 胰蛋白酶-琼脂糖凝胶4B使用说明书 特点: 1.现货直销,当天下单,当天发货。 2.产品优质,到货快,免费快递。 3.售前、售中、售后服务好。 胰蛋白酶-琼脂糖凝胶4B使用说明书 保存存放与运输: 干冰是固体二氧化碳,温度为零下78℃,湿冰就是冰的温度,一般为冷冻条件的温度,如在零下20℃冷冻的冰的温度为零下20℃。对于一些酶类等蛋白产品,需要干冰运输,其他大多数生化试剂采用湿冰即可; 运输常温试剂的时候,不需要冰。对于需要冷藏的试剂,在用冰运输的时候,要把试剂同冰之间有隔离物,不能直接接触试剂包装,如试剂外面加装盒子,在盒子外面加冰,基本都采用冰块,不能直接用水结成的冰,因为冰融化后会形成水,容易污染试剂。加冰块的量没有严格限制,以试剂四周都处于冰块包围为宜。 不要小看生物试剂的量,很多抗体类试剂、酶类试剂是很贵的,可以达到上千元/mg(即每公斤几百,上千万元),其保存条件也是很严格的,否 则容易失去活性。运输的时候建议使用冰块,而非碎冰。 胰蛋白酶-琼脂糖凝胶4B 注意事项: 一般都用药匙取用。药匙的两端为大小两个匙,分别取用大量固体和少量固体。 试剂一旦取出,就不能再倒回瓶内,镍NTA琼脂糖凝胶6FF可将多余的试剂放入容器。 称量镍-琼脂糖凝胶6FF试剂的天平应保持清洁、干燥,避免潮湿及腐蚀性气体的侵蚀。在进行称量操作时,被称取的试剂应置于称量纸上或其它器皿内,不可在盘中直接称量。 胰蛋白酶-琼脂糖凝胶4B技术资料 上海古朵生物科技有限公司,由具有资深行业背景和丰富市场经验的专业人士组成,致力于为生命科学研究领域提供产品,为广大科研工作者提供服务。既能满足研发类客户对产品种类、包装、纯度的特殊要求,也能满足生产型企业从小试、中试到规模化生产各个阶段的综合需求。产品涵盖有机试剂、无机试剂和生化试剂,标准物质、天然植物提取物及中药标准品,核酸、酶、缓冲剂、显色底物,医药中间体、原料药、催化剂、高纯溶剂、特种高分子材料及实验室常用耗材。品种类超过2万种,广泛应用于细胞药理、药剂、分子生物学等科研领域。
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2022.09.27
标签:RIPA裂解液 古朵生物 溶液 上海古朵解析:RIPA裂解液的配制方法 RIPA裂解液(RIPALysisBuffer)是一种传统的细胞组织快速裂解液,主要是从动物组织和动物细胞中抽取的可溶性蛋白。可分为强效RIPA裂解液和普通RIPA裂解液,其RIPA裂解液的配制方法也有所不同。RIPA裂解液裂解得到的蛋白样品可以用于常规的Western、IP等。 RIPA裂解液的配制方法 NP-40orTriton-1001% TrisHCl(pH8.0)50mmol/L NaCl150mmol/L PMSF 0.1mmol/L(100μg/ml) Pepstatin(胃蛋白酶抑制剂)1μmol/L(0.7μg/ml) Leupeptin(亮抑制肽)0.5mg/ml Aprotinin(抑蛋白酶肽)0.3μmol/L(1μg/ml) (注:PMSF贮存液:100mmol/L即17.4mg/ml于异丙醇中; Aprotinin贮存液:10mg/ml溶于0.01mol/LHEPES(pH8.0); Leupeptin贮存液:10mg/ml溶于水中; Pepstatin贮存液10mg/ml于甲醇液中.均于-20℃保存) RIPA裂解液的成分: RIPA裂解液(强)的主要成分为50mMTris(pH7.4),150mMNaCl,1%TritonX-100,1%sodiumdeoxycholate,0.1%SDS,以及2mMsodiumpyrophosphate,25mMβ-glycerophosphate,1mMEDTA,1mMNa3VO4,0.5ug/mlleupeptin等多种抑制剂。可以有效抑制蛋白降解。 RIPA裂解液(中)的主要成分为50mMTris(pH7.4),150mMNaCl,1%NP-40,0.5%sodiumdeoxycholate。 RIPA裂解液的配制方法有很多种,根据其裂解液的强度大致可以分为强、中、弱三类。关于不同的RIPA裂解液以及我们生产的其它裂解液的主要特点和差异。 上海古朵解析:RIPA裂解液的配制方法 上海古朵生物有限公司专业供应各种生物试剂、生化试剂,单抗多抗抗体,各种二抗,标 记抗体,抗体抗原,蛋白多肽产品,Elisa酶联免疫试剂盒,各种细胞株、细胞系,各种 动物血清,金标试剂盒,放免试剂盒,培养基,毒素 的产品, 实时价格和产品详细说明
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2022.09.23
标签:红细胞裂解液 古朵生物 溶液 对于ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)您了解吗? 产品简介: 在生物科研领域,经常需要去除红细胞。 。去除红细胞的方法有多种,如 ACK Lysis Buffer、 Tris-氯化铵红细胞裂解液、 Gey's Lysis Buffer。 ACK 红细胞裂解液(Red Blood Cell Lysis Buffer)也称 ACK Lysis Buffer,是一种从人、鼠或其他哺乳动物等体内的组织样品或 血液中裂解并去除无核红细胞的溶液,其主要有效成分为 NH4Cl。 ACK Lysis Buffer 经过优化配方,在裂解无核红细胞的同时几乎不损伤淋巴细胞(Lymphocyte)或其它有细胞核的细胞。对于裂解、去除有细胞核红细胞,例如鸟或禽类的红细胞, 效果不佳, 裂解类似细胞时, 不建议采用。 本裂解液经过滤除菌, 经过 ACK Lysis Buffer 处理过的血液或组织细胞样品可以用于后续的细胞培养、细胞融合以及核酸或蛋白提取及各种常规的分析和检测。 红细胞裂解液产品组成: 名称 编号 CS0001 CS0001 Storage ACK Lysis Buffer 100ml 500ml 4℃ 使用说明书 1 份 对于ACK 红细胞裂解液(ACK Lysis Buffer)您了解吗?上海古朵生物有限公司专业供应各种生物试剂、生化试剂,单抗多抗抗体,各种二抗,标 记抗体,抗体抗原,蛋白多肽产品,Elisa酶联免疫试剂盒,各种细胞株、细胞系,各种 动物血清,金标试剂盒,放免试剂盒,培养基,毒素 的产品, 实时价格和产品详细说明 ,敬请来电咨询!
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2022.09.22
标签:RT-PCR试剂盒 古朵生物 ELISA试剂盒 古朵生物| 一步法RT-PCR试剂盒 产品名称:一步法RT-PCR试剂盒 英文名称:RT-PCR EasyTM I(One Step) 产品规格:100 rxns 500 rxns 产品货号:RT-02011 保存说明:短期室温,长期2-8℃ 产品描述:一步法RT-PCR RNA模板浓度:RT-PCR EasyTM I (One Step):0.1pg-1μg。 一步法RT-PCR试剂盒 产品介绍 Foregene One-Step RT-PCR Easy系列产品实现了从 RNA 到双链 DNA 的一体化反应,即逆转录和PCR扩增在同一个反应离心管、 同一个反应体系中完成, 简化了实验步骤、提高了实验效率、优化了实验方案。 RT-PCR EasyTM I (One Step) 是 Foregene 公司特别研制的一步法 RT-PCR 试剂盒,实现了从 RT 到 PCR 的同一管中连续进行,操作简单、快捷,能有效的减少实验过程中的污染。2× RT-PCR Easy TM Mix 具有很强的耐受性、热稳定性、特异性扩增。 一步法RT-PCR试剂盒 试剂盒应用 ♦ 高拷贝、低拷贝基因的快速检测。 ♦ 高GC含量或具有复杂二级结构的RNA模板。 一步法RT-PCR试剂盒 注意事项: ♦ 一步法试剂盒使逆转录和 PCR 两种反应在同一管中进行,只需要加入模板 RNA、特异性 PCR 引物和RNase-Free ddH2O 即可。 ♦ 可以快速准确的对 RNA 进行实时定量分析。RT-qPCR EasyTM (One Step)试剂盒可以快速、的对病毒 RNA 或微量 RNA 进行定量分析。 ♦ 试剂盒使用独特的 Foregene 反转录试剂和 Foregene HotStar Taq DNAPolymerase 相结合, 并配合独特的反应体系, 有效提高反应的扩增效率和特异性。 ♦ 优化的反应体系使得反应具有更高的检测灵敏性, 更强的热稳定性, 更好的耐受性。 试剂盒内容 Store at -20°C ♦ 2× RT-PCR EasyTM Mix:Foregene Reverse Transcriptase、RNase Inhibitor、Foregene HotStar Taq DNA Polymerase、dNTPs、Mg 2+ 、反应缓冲液、优化剂、稳定剂。 ♦ RNase-Free ddH2O:超纯水,用于RT-PCR反应。 Foregene Reverse Transcriptase Foregene 逆转录酶能够提供、特异性强的逆转录反应。逆转录酶表现出很高的亲和力,并在 50°C 反应温度甚至 65°C 条件下仍然保持良好的逆转录活性,能够很好的逆转录其他逆转录酶不能处理的二级结构复杂的RNA。Foregene ReverseTranscriptase 灵敏度高,使用的RNA 量范围广泛(0.1pg≤RNA≤1μg) 。 Foregene HotStar Taq DNA Polymerase 提供了 PCR 的高度特异性扩增。反转录进行时,DNA 聚合酶是完全无效的,不妨碍反转录反应。后通过 PCR 反应程序,加热到 94°C,激活 DNA 聚合酶同时,失活逆转录酶。热启动过程消除了个循环时非特异性退火的引物和引物二聚体的形成,保证 PCR 扩增的高度特异性和可靠性。 一步法RT-PCR试剂盒您了解多少?上海古朵生物有限公司专业供应各种生物试剂、生化试剂,单抗多抗抗体,各种二抗,标 记抗体,抗体抗原,蛋白多肽产品,Elisa酶联免疫试剂盒,各种细胞株、细胞系,各种 动物血清,金标试剂盒,放免试剂盒,培养基,毒素 的产品, 实时价格和产品详细说明 ,敬请来电咨询!
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2022.09.22
标签:中和抗体 抗原抗体 古朵生物 古朵带您了解什么是中和抗体? “中和”"抗体”(Nautralizing Antibody)应该分两部分理解。首先是抗体,在这个层面上和普通抗体的概念重合,是机体免疫细胞被抗原激活后,由B淋巴细胞分化的浆细胞分泌的,能与相应抗原特异性结合的免疫球蛋白。除此之外,中和抗体显然还应该有专门针对“中和”的更进一层的含义,这里的中和是指该抗体能和病毒结合,进而阻断病毒感染。 “中和抗体”如何阻断病毒感染 主要通过三种方式来实现: 阻断病毒与细胞表面受体的结合; 阻断病毒侵入细胞; 阻断病毒在细胞内脱衣壳。 目前对于这种阻断的机制还不明确,但主流观点认为是中和抗体与病毒结合导致的空间位阻效应阻断了感染。 “中和抗体滴度”是衡量抗体有效性的一个重要指标 我们知道抗体通常会使用ELISA试剂盒来进行效价评估,那中和抗体也是通过ELISA来检测么? 通常中和抗体是使用中和试验来评估其中和病毒的效力的。 “中和抗体滴度”评估方法 中和试验是指在体外适当的条件下,将病毒和中和抗体进行混合孵育,使他们发生反应,然后将二者的混合物接种到敏感的宿主体内(包括动物、鸡胚、细胞等),测定残存的病毒的感染力的方法。 古朵带您了解什么是中和抗体? 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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2022.09.21
标签:流式细胞技术 细胞培养 古朵生物 古朵实验| 流式细胞技术检测法 包绕着鞘液的单细胞或微粒经过流式细胞仪检测区域时被激发光激发出荧光信号,形成的不同波长荧光信号被光电倍增管接收后转换为电信号并进一步转换成计算机可识别的数字信号。其应用范围广泛,常用于细胞生物学、细胞遗传学、免疫学、肿瘤学、血液学等领域。 流式细胞技术应用: 1)了解细胞大小及颗粒度 2)细胞状态:pH 值、氧化还原、氧自由基、Ca2+ 3)细胞表面蛋白:CD 系列等 4)细胞内蛋白:胞内因子、P53等 5)细胞功能检测:细胞周期、凋亡 、分化、细胞增殖活力、吞噬功能、药物泵的功能 7)免疫表型分析 流程: 1)根据实验需要预处理待检测细胞 2)上机检测相关参数 3)对所得结果进行数据分析 4)细胞分选流程(略) 流式细胞技术基础背景: l 提供背景资料,包括蛋白的表达位置,如是否膜蛋白或胞浆蛋白等 l 需要检测的细胞,每种样本提供的细胞数量要大于5×105 l 连接有或可连接荧光染料的一抗,并表明来源和应用浓度 我们提供:详细的实验结果原始图及数据分析报告;所分选的细胞 古朵实验| 流式细胞技术检测法 上海古朵生物科技有限公司成立于上海浦东新区。是一家专门从事生物技术相关产品,励志研发和销售的综合性生物公司,产品远销多个国家和地区,我们将一如既往地秉承“一切为了满足客户的需求”的经营宗旨;牢固树立“以客户需求为准则、以市场需求为导向,不断开发高质量的新产品,提供客户满意的综合服务质量”的方针。
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2022.09.21