人ELISA试剂盒资料

　　标签：人ELISA试剂盒 古朵生物 ELISA检测试剂盒

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　　名称：人血管生成素ELISA试剂盒

　　英文名：Human Angiopoietin 2,ANG-2 ELISA Kit

　　供应商：上海古朵

　　参数规格：48T/96T

　　样本：血清、血浆、细胞上清液、尿液、体液、灌洗液、脑脊髓、心房水、胸房水、组织等。

　　产品特点：敏感性高、特异性强、重复性好、试剂稳定、易保存，操作简便。

　　产品用途：用于测定血清，血浆及相关液体样本中相关含量或活性。

　　种属：人、大鼠、小鼠、兔子、猪、犬、猴、马、牛、羊、鸡、鸭、鱼等。

　　人血管生成素ELISA试剂盒价格 操作流程：

　　(1)待测样品孔中每孔加入待测样品100μl，每种样品设3个平行孔;设两个阴性对照孔，每孔加未处理组的细胞裂解液100μl;另设一个空白对照孔，加入纯细胞裂解液100μl。

　　(2)酶标板置4℃，包被过夜。

　　(3)洗板：吸干孔内反应液，用洗涤液过洗一遍(将洗涤液注满板孔后，即甩去)，之后将洗涤液注满板孔，浸泡1-2分钟，间歇摇动。甩去孔内液体后在吸水纸上拍干。重复洗涤3-4次。

　　(4)阴性对照孔每孔加入PBS 50μl，样品孔及空白孔每孔加入1:500稀释的兔抗人AIF抗体工作液50μl。

　　(5)酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。

　　(6)洗板，同(4)。

　　(7)每孔加1:5000稀释的HRP-标记的山羊抗兔抗体工作液 100μl。

　　(8)酶标板置37℃培养箱的湿盒内，孵育60min。

　　(9)洗板，同(4)。

　　(10)每孔加TMB显色液 100μl，轻轻混匀10s，置37℃暗处反应15-20min。

　　(11)每孔加100μl 2mol/L H2SO4终止反应。

　　(12)分别测450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，终测得的OD值为两者之差(W1-W2)，以减少由容器上的划痕或指印等造成的光干扰。

　　(13)数据处理：在得出标本(S)和阴性对照(N)的 OD值后，计算S/N值。S/N≥2.1为阳性判定标准。

　　人ELISA试剂盒资料详解　检测试剂注意事项：

　　1. 此试剂为体外检测试剂，效期内使用，试剂应视为传染物，不同总批号的试剂不能混用。

　　2. 使用前应将盒内各试剂取出。室温放置至少30分钟，

　　3. 浓缩洗涤液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟。

　　4. 浓缩样品稀释液出现结晶后，请于37℃孵育15分钟

　　5. 若24小时内进行实验，标本可存放于2～8℃。不需及时实验，标本-20℃保存，避免反复冻融。

　　6. 在反复清洗微孔板，并扣干微孔中的残余液体，否则将降低精确度，造成吸光度偏离的假像。

　　7. 加样完毕后，应注意轻微摇动微孔反应条，以便使孔中的液体充分混匀。

　　8. 试剂盒保存于2～8℃，请勿冷冻，有效期请见盒内标示。

　　人ELISA试剂盒资料详解 操作步骤：

　　1. 取出试剂盒，于室温(20-25℃)放置15-30分钟。实验过程应在室温(20-25℃)内进行。

　　2. 取出酶标板，按照标准品的次序分别加入50μl的标准品溶液于空白微孔中。

　　3. 空白微孔中加入50μl的样品，空白对照加入50μl的蒸馏水;

　　4. 在样品孔中加入10μl的生物素;(不含空白对照孔,切忌：生物素只加样品孔!)

　　5. 在各孔中加入100μl的酶标记溶液;(不含空白对照孔)

　　6. 将酶标板用封口胶密封后，37℃孵育反应 1小时;(在孵育箱中保持稳定的温度与湿度)

　　7. 充分清洗酶标板3-5次，保持各孔有充足的水压;(浓缩洗涤液以1：100的比例与蒸馏水稀释)

　　8. 酶标板洗涤后用吸水纸彻底拍干;

　　9. 各孔加入显色剂A、B液各50μl;(不含空白对照孔)

　　10. 20-25℃下避光反应15分钟;

　　11.各孔加入50μl终止液，终止反应;

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