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解决方案

DNA 分子熔点的测定- 分光光度法

应用领域

生物产业

检测样品

其他

检测项目

表征
DNA 熔点测定实验可以测得 DNA 的熔点,该实验过程以以温度为 横坐标,以 260nm 处的吸光度值为纵坐标作图得到的曲线称为热 变性曲线,当到达熔点温度 Tm 时,有 50%DNA 由双链改变为单链。

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赛默飞 Thermo Fisher Evolution 201/220 紫外可见分光光度计

Evolution 201/220

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不同分光光度计间细菌光密度测定的差异分析

应用领域

生物产业

检测样品

生物发酵

检测项目

表征
背景 细菌培养基的光密度( OD) 测定是微生物学中使用的 一种常见技术。 研究人员主要依靠分光光度计来进行 这些测定, 然而实际上这个测定是基于培养基的光散 射量而不是光吸收量。 在其标准配置中, 分光光度计 并未对光散射测定进行优化, 这通常会导致仪器间所 测得吸光度上的差异。 方法 该研究调查了不同的分光光度计光学配置对在分批培 养基中生长的大肠杆菌JM109光密度测定的影响。 分光光度计检测包括了使用阵列检测的反向光学系 统、 基于单色器的传统系统以及一种配备积分球配件 ( ISA) 的单色器系统。 在每个仪器上测定OD600生 长曲线, 同时, 对McFarland进行CFU/mL计数来进一 步对每个光学系统进行鉴定。 结果 来自相同光学配置类别的分光光度计其OD数据是相当 的。 用反向光学系统测定较高OD时数据变化更大, 这是由较低杂散光所导致。 基于单色器的系统测试较 高OD时准确度较高, 主要是因为与来自反向光学系统 的多色光相比, 单色光具有更好的杂散光去除能力。 然而, 反向光学系统测定OD时却有具有良好的动态 范围。 使用ISA产生出的数据与用其它系统产生出的 数据不同, 这是因为其具有捕捉几乎所有前向散射光 的能力。 而对McFarland标准品的测定确认了这些现 象。 结论 分光光度计进行可靠的光散射测定的能力在很大程度 上取决于其光学配置; 因此, 具有不同光学配置的分 光光度计会呈现出不同的OD测定值。 理想状态下, 高 度散射样品( 如细胞培养基) 的吸光度是使用ISA进 行测定的, 目的是为了捕捉几乎所有的散射光。 培养 基生长可使用OD600测定, 然而每当改变分光光度计 时, 就应该计算和应用一个换算因数。

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赛默飞紫外可见分光光度计Evolution 260

Evolution 260

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