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上海丰寿实业有限公司

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公司动态

ELISA试剂盒实验背景问题

    因为如果未结合的材料(如非特异结合的抗体或检测试剂)残留在微孔板中,ELISA试剂盒那么它会增加背景噪音。如有必要,可增加洗涤液中的盐浓度,这会阻止非特异结合反应。如果背景过高,而您怀疑洗涤不够时,可以尝试增加洗涤次数。    如果您一直被所困扰,那么也许您该花些时间来优化封闭液。这可能需要时间,但也是值得的。目前主要有两种类型的封闭液:蛋白和非离子型去污剂。您使用的类型须取决于多个因素,包括微孔板的表面ELISA试剂盒、吸附的抗原、您的抗体和检测试剂。好的封闭液应降低非特异性结合,但它不应当与抗原、抗体或检测试剂发生相互作用。    最常用的非离子型去污剂是Tween-20。这种封闭液便宜、稳定,在去除洗涤过程中的一些非特异结合上很有用。但它们只在存在时起作用,因为很容易被洗掉。因此所有洗涤液中也必须添加封闭液。请勿使用高浓度(正常浓度为0.01-0.1%),ELISA试剂盒它会降低特异结合,产生假阴性。另一个选择是使用型去污剂这两种封闭液,后者可协助洗涤过程中的封闭。四、注意事项:1. 待检标本如为血清,应采用一次性容器,血液采集后尽快(6小时以内)分离血清。2. 封闭液或抗体稀释液应新鲜配制或冻存。

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2015.08.11

动物细胞的培养

    动物细胞培养液的成分:体外细胞培养所需营养物质与体内基本相同,例如,需要糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等。将细胞所需的上述物质按其种类和所需数量严格配制而成的培养基,称为合成培养基。由于动物细胞生活的内环境还有一些成分尚未研究清楚,所以需要加入动物血清以提供一个类似生物体内的环境,因此在使用合成培养基时,通常需加入血清、血浆等一些天然成分。1.动物细胞培养液的特点:液体培养基、通常含动物血清。2.动物细胞培养的条件:①无菌、无毒的环境:对培养液和所有培养用具进行无菌处理,通常还要在培养液中加入一定量的的抗生素,以防被污染。此外应定期更换培养液,以便清除代谢产物防止细胞代谢产物累积对细胞自身产生危害。②营养物质:无机物(无机盐、微量元素等),有机物(糖、氨基酸、促生长因子等) 。③血清和血浆 (提供细胞生长必须的营养成份) 。④温度和pH(36.5±0.5℃,7.2~7.4) 。⑤气体环境(95%的空气+5%CO 2的混合气体) 。其中5%CO2气体是为保持培养液的pH稳定 。

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2015.08.05

进口ELISA试剂盒的反应步骤

    在建立进口ELISA试剂盒方法作反应动力学研究时,实验表明,两次抗原 抗体反应一般在37℃经1-2 小时,产物的生成可达顶峰。为避免蒸发,板上应加盖,也可用塑料贴封纸或保鲜膜覆盖板孔,反应板不宜叠放,以保证各板的温度都能迅速平衡。应注意温育的温度和时间应按规定力求准确。由于公司的 试剂盒温育是在空气浴中完成,采用水浴会造成值偏高或花板。另外温育中还有边缘效应,边上的值会偏高,建议为了客观的判断结果,将质控放在非边缘位置。96孔酶标板结构特别;易产生边缘效应,抗原抗体结合及酶促反应对温度有严格要求,酶标板周围与内部孔升降温速率不同,造成周边与内部孔结果差异;干浴与水浴存在明显的差异,尽可能使用水浴,并要求固相板放入水中,减少受热不均,贴密封膜,防止污物浸入。        洗涤在ELISA试剂盒过程中虽不是一个,但却决定着实验的成败。ELSIA试剂盒就是靠洗涤来达到分离游离的和结合的酶标记物的目的。通过洗涤以清除残留在板孔中没能与固相抗原或抗体结合的物质,以及在反应过程中非特异性地吸附于固相载体的干扰物质。聚苯乙烯等塑料对蛋白质的吸附是普遍性的,而在洗涤时应把这种非特异性吸附的干扰物质洗涤下来。可以说在ELISA 操作中,洗涤是最主要的关键技术,应引起操作者的高度重视,操作者应严格按要求洗涤,不得马虎。⑴ 严格按照试剂说明书进行操作。操作前将试剂在室温下平衡30~60min。 ⑵ 加样后及时放人孵箱。标本较多时,要分批操作。按说明步骤严格控制操作时间,防止孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗彻底。 (3)封板温育时,各孔一定要封严,防止阳性标本的液体蒸发,产生周边现象从而导致“花板”的出现。 (4)用洗板机洗板时,保证洗液注满各孔,洗板针畅通,洗完板后最好在吸水纸(选择干净、无或少尘的吸水材料)上轻轻拍干:还要防止针口有纤维蛋白或异物,进口ELISA试剂盒这些异物在洗板的过程中易产生拖带现象而导致“花板”的出现。 (5)合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。 (6)加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。 (7)显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用。 (8)加样时保持显色剂不外流;A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。 (9)应保证酶标板清洁,整个操作过程中保证酶标板不接触次氯酸。进口ELISA试剂盒以上的措施可以使“花板”降至最低限度。从而提高检测的特异性。并得到更准确、可靠的实验结果。

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2015.07.28

ELISA试剂盒的反应

    在反应产物中有与Ag结合的Ab※和游离和Ab※ ,如不将两者分离而测定标记物,测得的结果将为两者之和。因此,游离标记物与结合标记物的分离是标记免疫测定中的重要步骤。可采用多种手段,固相载体是其中之一。如将抗原或抗体包被在固相载体上,然后再与标记的抗原或抗体直接反应,结合的标记物被固定在载体上,ELISA试剂盒而游离的标记物留于溶液中。这样可以通过洗涤将游离的Ab※除去,结合标记物的测定可在固相上进行。在均相EIA中可不需进行游离的和结合的标记物的分离而直接测定标记物。例如在某种条件下,抗原抗体反应后形成的酶标记抗原抗体复合物中的酶失去其对底物作用的活力,因而测出的酶活力直接反映游离的酶标记物。均相EIA在临床检验中较少应用。非均相EIA需先进行游离的和结合的标记物的分离。如前所述,固相载体可用作一种分离手段。这种固相酶免疫测定方法在1971年最初建立时称为酶联免疫吸附剂测定(enzymelinked immunosorbent assay),简称ELISA,在国内有译作酶联免疫吸附试验的,虽然含义不完全确切,但已习用。    抗原抗体的结合实质上只发生在抗原的抗原决定簇与抗体的抗原结合位点之间。由于两者在化学结构和空间构型上呈互补关系,所以抗原抗体反应具有高度的特异性。例如乙肝病毒中的表面抗原( HBsAg)、e抗原(HBeAg)和核心抗体(HBcAg),随来源于同一病毒,但仅与其相应的抗体结合,而不与另外两种抗体反应。抗原抗体反应的这种特异性使免疫测定能在一非常复杂的蛋白质化合物(例如血清)中测定某一特定的物质,而不需先分离待检物。  但是这种特异性也不是绝对的。假使两种化合物有着部分相同的结构,在抗原抗体反应中可出现交叉反应。例如:绒毛膜促性腺激素(hCG)和黄体生成激素(LH)均由α和β两个亚单位组成,其结构的不同处在β亚单位,而两者的α亚单位是同类的。ELISA试剂盒用hCG免疫动物所得的抗血清中含有抗α-hCG和抗β-hCG两种抗体,抗α-hCG抗体将与LH中的  α酶位发生交叉反应。在临床检验中,如用抗hCG抗血清作为妊娠诊断试剂检定尿液中hCG,只能用于hCG浓度较高的试验,否则妇女生理性排泄入尿液中的微量LH将与之发生交叉反应。因此在作为早孕诊断(敏感度应达到50mIu/mlhCG)的实际中必须应用只对hCG特异的抗β-hCG,以避免与其它激素的交叉。  1.3.4 敏感性  在测定血清中某一物质的含量时,化学比色法的敏感度为mg/ml水平,酶反应测定法的敏感度约为5~10μg/ml,免疫测定中凝胶扩散法和浊度法的敏感度与酶反应法相仿。标记的免疫测定的敏感度可提高数千倍,达ng/ml水平。例如,用放射免疫测定法或酶免疫测定法测定HBsAg,其敏感度可达0.1ng /ml。  1.4 免疫测定在临床检验中的应用  由于各种抗原成份,包括小分子的半抗原,均可用以制备特异性的抗血清或单克隆抗体,利用此抗体作为试剂就可检测标本中相应的抗原,ELISA试剂盒因此免疫测定的应用范围极广,在临床检验中可用于测定:  1) 体液中的各种蛋白质,包括含量极少的蛋白质如甲胎蛋白等。  2) 激素,包括小分子量的甾体激素等。  3) 抗生素和药物。  4) 病原体抗原,HBsAg、HBeAg等。  5) 另外,也可利用纯化的抗原检测标本中的抗体,例如抗-HBs等。  5.标记的免疫测定

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2015.07.16

ELISA试剂盒结核杆菌噬菌体的抗结核功能

ELISA试剂盒噬菌体作为一种真细菌的病毒,可以有效地与宿主细菌相互作用。中国科学院昆明动物研究所赖仞研究员领导的课题组推测结核杆菌噬菌体可产生相关的功能物质与结核杆菌相互作用、甚至直接抑制或者杀灭结核杆菌。他们从结核杆菌噬菌体从识别了一小分子多肽PK34,其可以专一地结合于结核杆菌表面最丰富的糖酯。TDM被称作结核杆菌的核心因子,给小鼠尾静脉注射TDM,可以全方位模拟结核杆菌感染后肺部发生的一系列的免疫病理反应,因此TDM是研发抗结核杆菌药物的一个重要靶标。PK34同时具有杀灭结核杆菌和抗发炎能力。体内抗结核动物模型试验表明PK34具有与利福平相当的体内清除结核杆菌的能力。ELISA试剂盒PK34通过抑制丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)和蛋白激酶B(protein kinase B,PKB)的活化,而抑制发炎因子的大量分泌,但同时维持一定炎症细胞因子水平以保持实验动物正常的免疫能力。    

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2015.07.02

ELISA试剂盒实验室诊断与结果分析

ELISA试剂盒实验室诊断特异性检查血清学试验:血凝抑制试验、中和试验、补体结合试验、荧光抗体法检测病毒抗体。用免疫荧光法检测尿沉渣细胞中圣路易病毒抗原或尿液中病毒颗粒。RT-PCR检测病毒RNA。病毒分离。非特异性检查  血常规、脑脊液常规及生化检查。ELISA试剂盒结果分析与判断血清学试验  用ELISA法测定血清及脑脊液中特异性IgM抗体,可作为本病早期的快速诊断。此外,采用血凝抑制试验、补体结合试验、中和试验、免疫荧光或ELISA法检测早期与恢复期双份血清特异性抗体,如有4倍以上的增长即有诊断价值。ELISA试剂盒非特异性检查  外周血白细胞中度升高,伴核左移。有泌尿道症状者可有镜下血尿、脓尿、蛋白尿。血清ALT、肌酸磷酸激酶(CPK)及醛缩酶常有升高。脑脊液外观清亮,压力升高,蛋白轻度升高,糖及氯化物正常,细胞总数在0.5×109/L以下,早期以中性粒细胞为主,数日后以淋巴细胞为主。

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2015.06.30

融合蛋白的原核表达及鉴定

从PUBMED中查找人心脏cTnI和cTnC的cDNA序列,在两者之间加上15个中性氨基酸残基(G4S)3的linker编码序列,并分别构建原核表达质粒pET32a-cTnI-linker-TnC和pET28a-cTnI-linker-TnC,转化入大肠杆菌表达菌株BL21(DE3)中,用异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导其表达。通过SDS-PAGE电泳和间接ELISA对目的蛋白进行初步鉴定,并优化表达条件以实现目的蛋白的可溶性高表达。用标准抗cTnI单克隆抗体和标准抗cTnC单克隆抗体对目的蛋白进行Western blot 鉴定和双抗体夹心ELISA鉴定,同时用八位心肌梗塞患者血清做间接ELISA鉴定。结果表明,cTnI-linker-TnC融合蛋白在表达载体pET32a中实现了可溶性高表达,最佳表达条件为28℃、0.4mmol/L IPTG、诱导表达5h;且融合蛋白具有较好的免疫原性,保存了cTnI和cTnC单体的天然结构,有望成为天然cTnI-TnC复合物的替代物,为下一步制备高特异性的抗cTnI-TnC复合物的单克隆抗体奠定了基础。 

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2015.06.24

培养基的实验步骤

准备好物品,超净台消毒好。培养基等到位。小鼠颈椎脱臼处死,放入酒精浸泡5min。倒掉酒精,超净台中无菌取小鼠股骨和胫骨,置入成有1640培养基的培养皿 中。注意不要沾到小鼠毛发而污染。骨头上肉不需要剔得太干净,两端骨骺端尽量减掉,方便针头插入。在一只培养 皿中浸泡一遍,转入第二只培养基。除去可能的污染毛发。在第二只培养基中用1ml针头反复冲洗骨髓腔,直至骨头变白。将获得的骨髓细胞收集于离心管,1000转,5min,离心。弃上清。加入2ml Tris NH4CL裂红,震荡混匀,静置1min。加入15ml 1640终止反应,离心,弃上清。离心时配置培养基:50ml离心管,45ml 1640,5ml 胎牛血清,GM-CSF终浓度10ng/ml, IL-4终浓度1ng/ml。在弃上清后的离心管中加入25ml配置的培养基,混匀,接种于6孔板,4ml/孔,于37℃,5%CO2培养。3d后可见板底贴壁集落,培养基变黄。更换培养基。5d后可以用LPS进行刺激,d6测表型。d7测细胞因子。流式细胞仪计数,可培养10e7细胞数。

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2015.06.18

用微机生物信号采集系统记录变化曲线。

在生理情况下,人和其它哺乳动物的血压相对稳定,这种相对稳定是通过神经和体液因素的调节而实现的,其中颈动脉窦—主动脉弓压力感受性反射起着重要作用。此反射既可在血压升高时降压,又可在血压降低时升压,反射的传入神经为主动脉神经与窦神经。家兔的主动脉神经为独立的一条神经,又称减压神经,易于分离和观察其作用。在人、犬等动物,主动脉神经与迷走神经混为一条,不能分离。反射的传出神经为心交感神经、心迷走神经和交感缩血管纤维,心交感神经兴奋,其末梢释放去甲肾上腺素,去甲肾上腺素与心肌细胞膜上的b受体结合,引起心脏正性的变时变力变传导作用,心迷走神经兴奋,其末梢释放乙酰胆碱,乙酰胆碱与心肌细胞膜上的M受体结合,引起心脏负性的变时变力变传导作用,交感缩血管纤维兴奋,其末梢释放去甲肾上腺素,去甲肾上腺素与血管平滑肌细胞膜上的a受体结合,引起阻力血管的收缩。实验应用液压传递系统直接测定动脉血压。即由动脉插管、测压管道及压力换能器相互连通,其内充满抗凝液体,构成液压传递系统。将动脉套管插入动脉内,动脉内的压力及其变化,可通过密闭的液压传递系统传递压力,压力换能器将压力变化转换为电信号。

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2015.06.16

体外诊断ELISA试剂方法的建立

ELISA试剂采用改良过碘酸钠法将辣根过氧化物酶标记在抗体上,抗体的酶标记及质量鉴定标记完后取上清用Sephedex G200凝胶层析进行纯化,洗脱液为0.2mol/LpH7.4的PBS,流速为15mELISA试剂盒l/h,分步收集,每支3ml,以紫外分光光度计测A280吸光度值,以洗脱体积为横坐标,吸光值为纵坐标做图,收集第一峰即为酶标抗体峰。标记完后用紫外分光光度计在分别在280nm、及403nm处测定酶标记物的A值,计算免疫球蛋白量、摩尔比值、酶结合率以及标记率。包被用缓冲液及最适包被抗原浓度的优化包被抗原时,为了得到最佳的包被效果,我们采用了碳酸盐缓冲液(50mM ph9.6 )、磷酸盐缓冲液(50mMph7.6)、以及TRIS盐酸缓冲液(50 mM ph7.6)三种缓冲液作为包被液,抗原包被浓度为5ug/ml,及2.5ug/ml,酶标抗体工作浓度为1:400及1:300,用自动酶标仪ELISA试剂盒分析,选择最佳的包被缓冲液系统。同时为了保证缓冲液能够长期保存,我们在包被液中添加了0.01%的硫柳汞作为防腐剂。

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2015.06.11

我司一抗、二抗物种的选择

一般说来,在使用偶联二抗结合无偶联物的一抗时,一抗宿主动物的物种选择较为重要,对于免疫组化而言,尽可能选择与样本不同种系物种的一抗,从而避免二抗与样本内源性免疫球蛋白产生交叉反应,例如:检测小鼠样本蛋白,则不应选择小鼠或大鼠源的一抗,最好选兔源的一抗,则二抗则可选择偶联了检测分子(酶、荧光素、生物素等)的抗兔IgG。如果选择有偶联物的一抗则不适用上述情况,除免疫组化外的其它对不含内源性免疫球蛋白样本的检测方法,则抗体宿主物种的影响不大,如对不含IgG的细胞裂解物样本的western blotting检测,尽管如此,含有血清的组织裂解物和组织培养上清中含有免疫球蛋白,还原变性样本中含IgG,在western blot检测中则结合出现IgG分子50 and 25 kDa的重链和轻链条带。二抗应选用与使用的一抗相同的物种来源,例如:如果你的一抗是小鼠的单克隆抗体,二抗则选抗小鼠的二抗anti-mouse secondary。建议检查二抗说明书确保该抗体适用于你的检测应用, 二抗一般连接荧光素FITC或发光团。

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2015.06.10

我司细胞培养基的清洗

在组织培养过程中,离体细胞对任何毒性物质都十分敏感。毒性物质包括解体的微生物及细胞残余物以及非营养的化学物质,因此对新采用和重新使用的培养皿等培养用品都要严格清洗和消毒。清洗步骤:按浸泡→刷洗→浸酸→冲洗等四步程序进行。①浸泡:新购进的玻璃器皿常带有灰尘,呈弱碱性,或带有铅、碑等有害物质,故先用自来水浸泡过夜、水洗,然后再用2%~5%盐酸浸泡过夜或煮沸30min,水洗。要领:培养用后的玻璃器皿要立即泡入清水中,使下道刷洗工作能顺利进行。用后的玻璃器皿常带有大量的蛋白质附着,干涸后不易刷洗掉,用后要立即用清水浸泡。②刷洗:用软毛刷、优质洗涤剂,刷去器皿上的杂质,冲洗晾干。要领:浸泡后的玻璃器皿用毛刷沾洗涤剂去器皿上的杂质、刷洗次太多,会损害器皿的表面光洁度,洗涤剂有使pH上升的趋势,所以易选用软毛刷和优质洗涤剂。禁止用去污粉。因其中含有砂粒。会严重破坏玻璃器皿的光洁度。特别注意刷洗瓶角部位。酸浸之前要把洗涤剂冲干净。③浸酸:将器皿浸泡于清洁液24h,如急用也不得少于4h。清洁液由重铬酸钾、浓硫酸及蒸馏水配制而成,具有很强的氧化作用,去污能力很强。经清洁液浸泡后,玻璃器皿残留的末刷洗掉的微量杂质可被完全清除。④冲洗:先用自来水充分冲洗,吸管等冲流10min,瓶皿需每瓶灌满、倒掉,反复10次以上。然后再经蒸馏水漂洗3次,不留死角。晾干或烘干备用。对已用过的器皿,凡污染者必先经煮沸30min或放3%盐酸中浸泡过夜,未污染者可不需灭菌处理,但仍要刷洗、清洁液浸酸过夜,冲洗等。

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2015.06.04

为您讲解如何保存实验图片

图片保存的大小首先要明白通栏和半栏的概念。一般杂志为 A4 纸大小左右,通栏为 15 厘米宽,半栏为 7.5 厘米宽(不同杂志可能稍有不同)。因此在保存图片的时候自己就要判断该图片是准备为通栏还是半栏发表。当然我们大部分图片是半栏(实际上杂志社也鼓励为半栏)发表,因此图片大小就在宽度设定的时候设置为 7.5 厘米。如果你保存的分辨率越高,图片大小还可以更小。例如图片为半栏,分辨率为 600 dpi,那么宽度就可以设为 4 厘米。因为某图片分辩率为 600 dpi,它现在的尺寸就可放大至一倍以上使用也没有问题。图片保存小结保存的时候最好按照高标准,宽尺度的要求进行(当然也不是越大越好,越高越好)。因为从大往小改容易,从小往大改难。例如 TIFF 变为 JPG 容易,JPG 变为 TIFF 难;600 dpi 变为 300 dpi 容易,300 dpi 变为 600 dpi 难。RGB 变为 CMYK 容易,CMYK 变为 RGB 难。这里的难和易是对图片质量来说的,而不是指操作上。认为必要就可以高低两种模式都报存,但是绝对不能仅仅保存低模式,比如图片为 JPG,CMYK,300 dpi(因为这样灵活性差,不适合杂志的普遍要求)。

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2015.06.01

我司试剂盒测定维生素C含量

维生素C(vitaminC)又称为抗坏血酸,试剂盒测定维生素C含量一般水果、蔬菜中维生素C的含量均较高,不同的水果、蔬菜品种,以及同一品种在不同栽培条件、不同成熟度等情况下,其维生素C的含量都有所不同。测定维生素C含量,可以作为果蔬品质指标之一。抗坏血酸分子中存在烯醇式结构(—C═C—),因而具有很强的还原性,氧化失去两个氢原子而转变成脱氢抗坏血酸。其余2,6—二氯酚靛酚钠盐(C12H6O2NCl2Na)染料氧化抗坏血酸而其本身被还原为无色的衍生物,可作为维生素C含量测定的滴定剂和指示剂。在酸性溶液中氧化型2,6—二氯酚靛酚呈红色,在中性或碱性溶液中呈蓝色。因此,当用2,6—二氯酚靛酚滴定含有抗坏血酸的酸性溶液时,在抗坏血酸尚未全部被氧化时,滴下的2,6—二氯酚靛酚立即被还原为无色,抗坏血酸全部被氧化时,则滴下的2,6—二氯酚靛酚溶液呈红色。所以,在测定过程中当溶液从无色转变成微红色时,表示抗坏血酸全部被氧化,此时即为滴定终点。根据滴定消耗染料标准溶液的体积,可以计算出被测定样品中抗坏血酸的含量。试剂盒测定维生素C含量所需材料、仪器材料:水果或蔬菜(如,苦瓜)。仪器:三角瓶(50ml)、研钵、移液管(10ml)、漏斗、滤纸、容量瓶(50ml)、微量滴定管(5ml)、分析天平、离心机。

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2015.05.28

ELISA试剂盒观察蛋白质荧光的作用

每个蛋白质由于其直线氨基酸链发出交迭而呈现三维结构。通常每种蛋白质只有一种具有工作能力的形状,蛋白质这种特殊形状的产生取决于其氨基酸和细胞中的其它过程。研究人员表示,经过对所研究的蛋白质和其氨基酸链经过处理,当蛋白质交迭正确并出现特定的氨基酸标识序列后,ELISA试剂盒对荧光小分子具有强烈的亲合力,能够吸引并“捆绑”上较多的荧光小分子,发出明亮的荧光;如果蛋白质交迭错误,那么其吸引和“捆绑”染色小分子的能力较差,所发荧光十分暗淡。虽然这些能够“捆绑”单个蛋白质的荧光小分子化合物已被使用了10年,但是这是研究人员首次将其用于识别蛋白质间的相互作用。谢葩紫表示,新的标识方法为了解细胞中蛋白质如何选择其伙伴提供了重要的观察手段,这与人们在试管中所观察到的也许具有相当大的差别。从理论上讲,新标识技术有望作为疗法有选择性地阻止细胞中某些特殊蛋白质的活动,或者作为诊断方法,为人们提供细胞内蛋白质的高清晰可视结构图。新技术可能应用于识别神经退化疾病患者细胞中蛋白质发生的交迭错误。ELISA试剂盒发出一种利用微小荧光分子快速发现和识别活细胞中蛋白质相互作用的新技术。该技术避免了旧方法中可能产生生物破坏的缺陷,通常利用不同的绿荧光蛋白质(GFP)来为其它蛋白质做标识。但是绿荧光蛋白质不仅大,而且对许多活细胞具有毒性,因此难以用于研究活细胞。此外,绿荧光蛋白质还往往会自动聚集。       

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2015.05.25

ELISA试剂盒的内源性物质详细说明

ELISA试剂盒有时能与靶抗原结合形成复合物,在ELISA方法中均可干扰抗原抗体测定结果。为避免以上情况出现,解决的办法是测定前需用理化方法将其解离后再测定。类地高辛、类AFP样物质等,是与靶抗原有交叉反应的物质。在用多抗测定抗原时对测定结果影响不大,但在用单克隆抗体测定抗原时,如果交叉抗原决定簇正好是所用单克隆抗体相对应的靶决定簇时,也会出现假阳性结果。ELISA试剂盒标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致,普遍认为大约40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质,可以不同程度影响检测结果。常见的干扰物质有:类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig抗体、交叉反应物质和其它物质等。ELISA系统中固相一抗和标记二抗过程中,抗体分子发生变构,其FC段的补体C1q分子结合位点被暴露出来,可以将二者连接起来,从而造成假阳性。人类血清中含有能与啮齿类动物如鼠等结合的天然嗜异性抗体,可将ELISA系统中一抗和二抗连接起来,也能造成假阳性。解决的办法是:可在标本稀释液中加入过量的动物,加入量不足或亚类不同时无效。抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素等嗜靶抗原的自身抗体。

标准

2015.05.21

我司长期为您提供优质血清

我司提供的血清为无菌,无需再过滤除菌.如发现血清有悬浮物,则可将血清加入培养液内一起过滤,切勿直接过滤血清.需要长期保存的血清必须储存于-20℃ - 70℃ 低温冰箱中.4℃冰箱中保存时间切勿超过1个月.由于血清结冰时体积会增加约10%,因此,血清在冻入低温冰箱前,必须预留一定体积空间,否则易发生污染或玻璃瓶冻裂。热灭活是指56℃, 30分钟加热已完全解冻的血清.加热过程中须规则摇晃均匀.此热处理的目的是使血清中的补体成分(complement)灭活.除非必须,一般不建议作此热处理,因为热处理会造成血清沉淀物显著增多,而且还会影响血清的质量.补体参与反应有:细胞毒作用, 平滑肌细胞收缩, 肥大细胞和血小板释放组胺, 增强吞噬作用, 促进淋巴细胞和巨噬细胞发生化学趋化和活化。瓶装血清解冻需采用逐步解冻法:-20℃ 至 -70℃ 温冰箱中的血清放入4℃冰箱中溶解1天.然后移入室温,待全部溶解后再分装.在溶解过程中需不断轻轻摇晃均匀(小心勿造成气泡),使温度与成分均一,减少沉淀的发生.切勿直接将血清从-20℃进入37℃解冻,这样因温度改变太大,容易造成蛋白质凝集而出现沉淀。

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2015.05.18

试剂盒分析苹果基因生物信息学

苹果基因是一类重要的跨膜转运蛋白,在植物体内阳离子转运上起着非常重要的作用。对苹果MdCAXs基因进行了生物信息学和组织特异性表达分析,以期为该类基因的功能研究奠定基础。利用生物信息学的方法对苹果MdCAXs基因家族染色体定位、蛋白质等电点、亲疏水性、跨膜区域、亚细胞定位及保守结构域进行了预测和分析,同时还分析了MdCAXs基因与其他物种CAXs基因的进化关系。采用实时荧光定量PCR法对苹果MdCAXs基因在不同盐处理下根、茎、叶中的表达变化进行分析。苹果MdCAXs家族包含8个成员,分别属于CAXsⅠ型中的A亚型和B亚型,编码436~817个氨基酸,等电点4.97~7.12,且都为疏水性蛋白;所有MdCAXs基因编码的氨基酸都有11个及以上的跨膜区域,含有CAXs基因5个典型的功能域:N-端自抑制区域(NRR)、C-端功能区域、Ca2+功能域(CaD)、C功能域和D功能域。亚细胞定位预测MdCAXs主要是定位在质膜和内质网上。苹果MdCAXs基因具有组织特异性表达特点,不同种类盐处理根、茎、叶中表达发生不同程度的变化,反映了MdCAXs存在功能上的差异,对不同阳离子有特异性的应答反应。苹果MdCAXs是一类跨膜转运蛋白,具有植物CAXs基因典型的结构特征,根、茎、叶对不同的盐离子具有不同的表达响应。

标准

2015.05.13

培养细胞,时间一定要准确

在生物化学上,多数细胞凋亡的过程中,内源性核酸内切酶活化,活性增加。核DNA随机地在核小体的连接部位被酶切断,降解为180-200bp或它的整倍数的各种片断。如果对核DNA进行琼脂糖电泳,可显示以180-200bp为基数的DNA ladder(梯状带纹)的特征。细胞死亡根据其性质、起源及生物学意义区分为凋亡和坏死两种不同类型。凋亡普遍存在于生命界,在生物个体和生存中起着非常重要的作用。它是细胞在一定生理条件下一系列顺序发生事件的组合,是细胞遵循一定规律自己结束生命的自主控制过程。细胞凋亡具有可鉴别的形态学和生物化学特征。在形态上可见凋亡细胞与周围细胞脱离接触,细胞变园,细胞膜向内皱缩、胞浆浓缩、内质网扩张、细胞核固缩破裂呈团块状或新月状分布、内质网和细胞膜进一步融合将细胞分成多个完整包裹的凋亡小体,凋亡小体最后被吞噬细胞吞噬消化。在凋亡过程中细胞内容物并不释放到细胞外,不会影响其它细胞,因而不引起炎症反应。

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2015.05.11

看新的elisa试剂盒神经元

一项新的elisa试剂盒技术将会使得神经元在相互作用时的三维图像。这种技术通过联合一种快速移动的激光束和一种特殊的显微镜来观察不同光学面的组织。大多数显微镜都只能研究二维细胞功能。ELISA试剂盒为了分析不同的面,需要移动制备的样品或物镜。这样做既花费时间,并且无法看到瞬间发生的事件。为了解决这个问题一种“把戏”在三维情况下快速移动一束激光,然后让激光进入到多光子显微镜中。这使得他们能够“看到”三维的神经元功能,从而使他们对神经元活动有了更多的了解。多光子显微镜与普通的垂直显微镜有很多相似之处,但经过一定的改造使它能够分段观察组织。而普通的多光泽现为主进行这种观察时会非常缓慢,ELISA试剂盒表示有了这种技术,能够快速进行这种片段观察。目前正在实验室观察一个单独的神经元行为。目前正在用这项技术研究大脑切片中单个神经元的通信过程。使用这项技术进行其它方面的研究打算利用这项技术来监控实验动物大脑中的神经活动,从而研究神经元群体在视觉刺激过程中如何交流。    

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2015.05.06

检测人P选择素ELISA试剂盒实验原理

人PELISA试剂盒实验原理试剂仅供研究使用标本:血清或血浆试验原理人P试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验(ELISA).已知P-selectin浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将P-selectin和生物素标记的抗体同时温育。洗涤后,加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤,去除未结合的酶结合物,然后加入底物A、B,和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中P-selectin的浓度呈比例关系。 安全性 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体,请尽快用水冲洗。 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。 操作注意事项 试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用即可。 

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2015.05.04

培养基实验设计的基本步骤包括这三点

    本月马上就要结束了,我公司技术部针对主营产品培养基做出调查,并与技术员分析相关实验设计。根据质控应用情况的调查发现,许多朋友都没有按NC CLS QA的建议往做。而且建议使用的ATCC菌株只有一半的实验室使用。批失败率在0.10%-9.87%之间。失败的原因有不生长、不抑制、非无菌,溶血和表面破坏。  另外一项调查发现批失败率较小。Krisher等指出109个被调查的实验室中有41个使用50%或更少NCCLS M22-A2提供的信息。在最近的NCCLS M22-A3文件中按质控失败率进行分类。失败率大于0.5%的产品需要使用者做全部的质控。失败率小于或即是0.5%是免除,建议只做最低限度的质控。可以节省本钱避免不必要的重复质控。  而培养基实验设计的基本步骤包括这三点  1.根据前人的经验和成分确定时一些必须考虑的问题,初步确定可能的成分。  2.通过单因子实验最终确定出最为适宜的成分。  3.当成分确定后,剩下的问题就是各成分最适的浓度,由于成分很多,为减少实验次数常采用一些合理的实验设计方法。这些实验往往基于多因子实验,包含均匀设计、正交实验设计、响应面分析等。

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2015.04.30

ELISA试剂盒标准品的稀释与加样

1.在酶标包被板上设标准品孔10孔,在第一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在第一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从第一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,ELISA试剂盒混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为30ng/L,20ng/L ,10ng/L,5ng/L, 2.5ng/L)。2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,ELISA试剂盒然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。4. 配液:将20倍浓缩洗涤液用蒸馏水20倍稀释后备用。5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。7. 温育:操作同3。8. 洗涤:操作同5。9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。11. ELISA试剂盒测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟以内进行。

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2015.04.28

四月讲堂 新一代ELISA试剂盒的技术重点

    ELISA实验步骤中的重点及需要特别注意的问题有很多,多加学习与了解会使实验事半功倍。今天我公司为大家整理出了四月讲堂,新一代ELISA试剂盒的技术重点,供大家学习参考。    一、灵敏度的问题  通常来说,如果待测样本中目标蛋白的浓度比较高,则对灵敏度要求相对小一些。如果待测样本中目标蛋白的浓度比较低,则必须考虑灵敏度的问题。试剂盒曲线上的最小浓度是比较准确的,低于这个值因为与曲线是个“S"型结构有关,所以结果是有偏差的,是一种估算。再加上实验误差,所以达不到理想的效果。建议选择试剂盒时,应该看曲线上最小的浓度值,而不是试剂盒上写的灵敏度。        二、检测范围    1.如果样本中目标蛋白太低,需找相应灵敏度更高的试剂盒来检测或浓缩样本;    2.如果样本中目标蛋白太高,则需要进一步稀释后进行检测;    3.不同厂家的试剂盒的检测范围并不相同,一般说来,诊断试剂的检测范围以ng/ml计。而常见的科研试剂盒中的样本中的目标蛋白,范围可随样本的类型而变化。所以实验前应通过文献和预实验的方法确定样本是否在所购试剂盒的范围内,如果不在检测范围内,分两种情况对待。        三、操作注意    1.合理安排检测量,以免反应板过多造成洗板等待时间长。    2.加样时保持显色剂不外流;A、B液应避免接触金属器械。加终止液时应避免产生气泡。    3.加酶试剂后用吸水纸在酶标板表面轻拭吸干。

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2015.04.23

知道吗?实验室用水有讲究哦

    大家都听说过“水是生命之源”,而在我们的生活中是离不开水的,您可知道,它在实验室内一个常常被忽视但至关重要的试剂。实验室用水有讲究哦!今天公司来为您说说它的种类与作用。△ 超纯水    其标准是水电阻率为18.2MΩ-cm。但超纯水在TOC、细菌、内毒素等指标方面并不相同,要根据实验的要求来确定,如细胞培养则对细菌和内毒素有要求,而HPLC则要求TOC低。△ 蒸馏水   实验室最常用的一种纯水,虽设备便宜,但极其耗能和费水且速度慢,应用会逐渐减少。蒸馏水能去除自来水内大部分的污染物,但挥发性的杂质无法去除。新鲜的蒸馏水是无菌的,但储存后细菌易繁殖;此外,储存的容器也很讲究,若是非惰性的物质,离子和容器的塑形物质会析出造成二次污染。△ 去离子水   应用离子交换树脂去除水中的阴离子和阳离子,但水中仍然存在可溶性的有机物,可以污染离子交换柱从而降低其功效,去离子水存放后也容易引起细菌的繁殖。△ 反渗水  其生成的原理是水分子在压力的作用下,通过反渗透膜成为纯水,水中的杂质被反渗透膜截留排出。反渗水克服了蒸馏水和去离子水的许多缺点,利用反渗透技术可以有效的去除水中的溶解盐、胶体,细菌、病毒、细菌内毒素和大部分有机物等杂质,但不同厂家生产的反渗透膜对反渗水的质量影响很大。附(上海恒远解说水质评价指标):1、电阻率:衡量实验室用水导电性能的指标,单位为MΩ-cm,随着水内无机离子的减少电阻加大则数值逐渐变大,实验室超纯水的标准:电阻率为18.2MΩ-cm。2、总有机碳:水中碳的的浓度,反映水中氧化的有机化合物的含量,单位为ppm或ppb。3、内毒素:革兰氏阴性细菌的脂多糖细胞壁碎片,又称之为“热原”,单位cuf/ml    我公司胎牛血清7月经典精品已经上市!现在购买还可享受体验价7折优惠。

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2015.04.21

标准品与对照品的区别有哪些?

    很多刚开始做实验的同学不了解标准品与对照品的区别,如果混淆两者将对实验产生很大的影响,下面就让上海恒远与您一起区分标准品与对照品的区别吧。    标准样品是按一定步骤,由被授权单位制造,作为标准的产品。对照品是用于对照的产品,作为对照品,其材质、含量都不是重要的,是其他东西与它相比。标准物质是作为标准的物质,不一定是实物。    对照品和标准品一样是指国家药品标准中用于鉴别、检查、含量测定、杂质和有关物质检查等标准物质,它是国家药品标准不可分割的组成部分。国家药品标准物质是国家药品标准的物质基础,它是用来检查药品质量的一种特殊的专用量具;是测量药品质量的基准;也是作为校正测试仪器与方法的物质标准。在药品检验中,它是确定药品真伪优劣的对照,是控制药品质量必不可少的工具。   对照品或标准品混用,即将对照品或标准品用于不是其标定方法的含量测定,是药品检验中经常出现但未引起重视的一个问题[3]。尽管同一批对照品不同标定方法的含量有很好的相关性,但并不完全相同,有时差别会很大。如英国Glaxo公司提供的头孢呋肟酯对照品,HPLC标定为96.9%,供含量测定用;UV为98.8%,供溶出度测定。虽然中国药典凡例明确规定卫生部所发对照品仅用于正文中所规定的分析方法。但由于:(1)卫生部提供的对照品使用说明书不够详尽,大多无对照品质量要求及标定方法;(2)对对照品或标准品的正确使用缺乏认识;(3)日常科研中极难找到相应的对照品;(4)中国药典正文中也常存在对照品混用的问题,如常将含量测定用的标准品或对照品用于溶出度检查,而含量测定方法与溶出度分析方法又不同,故极易引起混用。   我公司现货供应大量标准品和对照品,如果您对我们的产品感兴趣,可以在本网站留言,我们看到后会在第一时间联系您。

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2015.04.16

春季为您推荐世界十佳旅游胜地

春天,美丽而短暂的一段时间,接踵而来的就是酷热的夏季和各地旅游消费的激增,在这春意盎然的日子,何不暂时抛开身边的繁琐,出去游玩一番?或是在法国南部租一别墅享受生活,或是到维也纳参观新开放的博物馆,或是飞到亚洲最迷人的岛屿放松身心……北美著名旅游杂志《Condé Nast Traveler》近日选出春季出游的世界十佳旅游目的地,这个季节,还等待什么?夏威夷(美国)晴朗的天气、温和的阳光、静谧而美好,这就是五月的夏威夷。除了最佳的天气,还有廉价的机票和度假酒店的优惠折扣。曼内雷湾的拉奈岛四季酒店、夏威夷大岛的费尔蒙特兰花酒店以及毛伊岛凯拉尼费尔蒙特酒店都为游客提供优惠折扣。而从肯尼迪机场直达火奴鲁鲁的夏威夷航空新航线以及阿拉斯加航空新加入航班所提供的优惠,也为游客以更实惠的价格出游提供了方便。安达卢西亚(西班牙)在美国加利福尼亚,游客能够在一天内同时体验滑雪和游泳,这令人神往,而这个春天,游客同样能够在西班牙南部的安达卢西亚获得如此体验。在和煦阳光照耀下,白色村庄的美景映衬下,可以看到整个四月份都能使游客滑雪的内华达山脉斜坡以及遍布野花的乡村,这让人沉醉。在这个季节,同样的出游优势就是价格实惠,多个度假景点的住宿费用都提供着优惠折扣。中欧随着六月份美国前总统肯尼迪“我是柏林人”演讲50周年庆典活动开幕,柏林的魅力势不可挡,吸引着全球大批游客和创作者前往。布拉格和华沙也毫不逊色,尽管欧元币值存在着不确定性,但布拉格和华沙依然继续保持欧元币值的稳定,一些四星级、五星级的酒店仍然在装修升级。维也纳也是春季出游的不二选择。哈布斯堡家族藏室经过历时十年的修复后终于对外界开放,超过2000件抑或精美、抑或怪异的展品,让你大饱眼福。另外,春季出游可以不用忍受观光车的拥挤和七、 八月份的燥热天气。普罗旺斯(法国)塞浦路斯的经济问题使得欧元大幅度贬值,然而也意味着出游普罗旺斯更实惠。在法国这一地方旅游,别墅租赁显得尤为重要。例如:一个四居室可供六个人居住的房屋夏季正常租金为一周8775美元,而在5月25日前后的一周租金仅为5500美元,在6月29日前后则升至7250美元 。可见,这个春季,出游是非常实惠的。希腊欧洲金融危机也给希腊的旅游带来了一丝活力。对于希腊人来说,国内经济危机让人担忧,但较低的消费价格为游客提供了一些打折优惠的宾馆,同时游客也可以尽情玩乐。蓝宫伊罗达度假胜地提供30%的折扣,其它一些度假宾馆也提供着折扣优惠。并且,这个时期出游会赶上5月5日的希腊东正教复活节庆祝活动。伊斯坦布尔(土耳其)在今年四月份的郁金香节上,游客可以在伊斯坦布尔欣赏1100多万种鲜花的绚烂多姿,此外一个新的香格里拉酒店会在五月首次投入运营。整个春季,游客们还可以漫步画廊,欣赏各种极具特色的文艺作品。这个季节正是踏上伊斯坦布尔之旅的绝佳时刻。不列颠哥伦比亚省和西北太平洋不列颠哥伦比亚省的岛屿正是漫长夏日里吸引众多游客的胜地。但是如果前往温哥华岛屿上的多芬诺,游客会有非同寻常的感受,而这种体验是无法在炎炎夏日中找到的。这一地区的其它景点,比如华盛顿州的圣胡安群岛,参观由美国总统奥巴马不久前命名的一座国家纪念碑也是别样的体验,它享有特殊的地域环境保护。在这里游玩,游客不必为出行和住宿所困扰,因为各种度假酒店、套房会在这样的旅游旺季满足游客的需求。约塞米蒂(美国)四月、五月和六月是游客参观约塞米蒂的理想季节,温和舒适的气候和宏伟壮丽的景色给人们的旅程增添了更精彩的体验。在那期间,约塞米蒂瀑布会呈现出一番激流澎湃的场景,水流之迅速,气势之宏伟,相比之下,人群会显得如此渺小。为了避免在拥挤的人群中观赏瀑布,人们可以独自攀岩至每个小瀑布附近的岩石上将瀑布的气势饱览无余。约塞米蒂公园附近的酒店同样深受欢迎,虽然不及夏季的价格便宜,但在旅游高峰期到来时,游客们还是乐于接受那样的价格。百慕大群岛(北美洲)这里不是加勒比海地区,而是百慕大群岛。乘坐飞机从东部海岸城市到达此处仅需几个小时。在这座岛屿上,全年都会有丰富多彩的活动,参观历史古迹、打高尔夫球、玩滑板车,以及享受一流的商场和餐饮场所。到这里参观的游客可以尽情享受这次美妙之旅,比如参观珊瑚礁,到剑桥泳滩上游泳等各种活动,而且剑桥海滩还会在阵亡将士纪念日那天给予游客25%的优惠。马尔代夫(亚洲岛国)一些印度洋的群岛可能在世界的另一端,但是新的航空服务会带领游客踏上充满神秘色彩的马尔代夫之旅。最近几个月,几家航空公司开始增加航班,满足旅游旺季带来的出行需求。尽管通常情况下,岛屿上的气候给人的感觉不是那么舒适,但是马尔代夫的气候宜人,风景独特,这个季节的它,充满了神秘色彩,给人无限遐想,令众多游客流连忘返。

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2015.04.14

研究ELISA试剂盒包被和封闭方式分析

     ELISA试剂盒抗原或抗体包被时所用的浓度较低,吸收后固相载体表面尚有未被占据的旷地空闲,封锁就是让大量不相关的蛋白质充填这些旷地空闲,从而排斥在ELISA其后的步骤中干扰物质的再吸附。    包被用抗原或抗体的浓度,包被的温度和时间,包被液的pH等应根据试验的特点和材料的性质而选定。通常在ELISA板孔中加入包被液后,在4-8℃冰箱中放置过夜,37℃中保温2小时被以为具有平等的包被效果。特别是用单抗腹水直接包被时,因其中大量非抗体蛋白在包被时同样也吸附在固相表面,业已起到了类似封锁剂的作用。并非所有的ELISA固相均需封锁,封锁不当反而会使阴性本底增高。ELISA试剂盒脱脂奶粉也是一种良好的封锁剂,其最大的特点是价廉,可以高浓度使用(5%)。抗体和蛋白质抗原一般采用pH9.6的碳酸盐缓冲液作为稀释液,也有用pH7.2的磷酸盐缓冲液及pH7~8的Tris-HCL缓冲液作为稀释液的。  高质量的速溶食用低脂奶粉即可直接当作封锁剂使用,但因为奶粉的成份复杂,而且封锁后的载体不易长期保留,因此在试剂盒的制备中较少应用。ELISA试剂盒封锁的手续与包被相类似。一般说来,双抗体夹心法,只要酶标记物是高活性的,操纵时洗涤彻底,不经封锁也可得到满足的结果。封锁是否必要,取决于ELISA的模式及详细的实验前提。    封锁(blocking)是继包被之后用高浓度的无关蛋白质溶液再包被的过程。包被好的ELISA板干燥后放入密封袋或锡袋中,在低温可保留数月。ELISA试剂盒包被的最适当浓度随载体和包被物的性质可有很大的变化,每批材料需通过实验与酶结合物的浓度协调选定。但在间接法测定中,封锁一般是不可少的。    最常用的封锁剂是0.05%-0.5%的牛血清白蛋白,也有用10%的小牛血清或1%明胶作为封锁剂的。一般蛋白质的包被浓度为100ng/ml-20ug/ml。

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2015.04.09

ELISA试剂盒检测方法灵敏度高

    ELISA试剂盒试验以灵敏度较高、特异性较好的特点在临床上得到了广泛的应用,但操作中的各个环节对试验的检测效果影响较大,如不注意,有可能导致显色不全、花板等结果。我将操作中各个环节常出现问题的原因及解决办法总结于下,以期给同行带来一些启发,提高试验质量。 1.采用手工洗板,孔与孔之间液体交叉。 2.采用半自动洗板机洗板时,洗液量不足,ELISA试剂盒导致洗板不彻底;洗板针堵塞,抽吸不完全;洗板不畅,导致洗板效果差。 3.反应板过多造成洗板等待时间长。 1. 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂; 2. 加显色剂时溅出孔外造成液体回流。   1. 显色剂尽量在临用前配制,坚持不用过期显色剂,ELISA试剂盒肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用; 2. 加样时保持显色剂不外流; 3.A、B液应避免接触金属器械。

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2015.04.07

“质量门”成ELISA试剂盒实验梦魇 产品乱象如何规避?

对于整个动物血清营销圈来说,ELISA试剂盒产品质检都成为困扰经销商公司发展的主要因素。是质检标准太过严苛?还是某些供应商偷梁换柱呢!如何走出“质量门"的产品乱象,都成为当前实验试剂行业亟待重视的问题。公司自律当自强,品牌责任感不可抛   生物销售公司的一言一行都会影响到其受众群体,所以,每个供应公司应当做好本职工作,承担起自己应有的社会责任。我司作为已经发展了6年的实验试剂供应公司来说作为这个领域中的一员,每个企业都应该极力去帮助行业发展,恪守自律,做有利于行业、有利于消费者的事,而不是背道而驰,最终令企业的品牌形象“毁于一旦"我国作为还在不断发展的动物血清产业,需要有一个健康的发展环境,而这需要每个生产公司与供应公司的共同努力,充分展现出自身企业责任感。"虚假宣传当杜绝,行业管理力度必须硬   对于虚假宣传,我司认为诚信才是公司的立足之本,一个诚信的公司会坦然的面对消费者、面对社会,而不是使用虚构信息来欺骗消费者,诱导其购买公司产品。无论该公司的产品是否存在质量问题,这种行为已经属于商业欺诈,是违背法律的行为。   我司认为公司不能只为眼前利益而忽略长久发展,只有坚持诚信经营,才能为自己的ELISA试剂盒品牌积累养好的口碑,这样才是我司长久发展的良策。

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2015.03.23

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