ELISA试剂盒的内源性物质详细说明

ELISA试剂盒有时能与靶抗原结合形成复合物，在ELISA方法中均可干扰抗原抗体测定结果。为避免以上情况出现，解决的办法是测定前需用理化方法将其解离后再测定。类地高辛、类AFP样物质等，是与靶抗原有交叉反应的物质。在用多抗测定抗原时对测定结果影响不大，但在用单克隆抗体测定抗原时，如果交叉抗原决定簇正好是所用单克隆抗体相对应的靶决定簇时，也会出现假阳性结果。

ELISA试剂盒标本引起的假阳性和假阴性结果主要是干扰性物质所致，普遍认为大约40%的人血清标本中含有非特异性干扰物质，可以不同程度影响检测结果。常见的干扰物质有：类风湿因子、补体、嗜异性抗体、嗜靶抗原自身抗体、医源性诱导的抗鼠Ig抗体、交叉反应物质和其它物质等。ELISA系统中固相一抗和标记二抗过程中，抗体分子发生变构，其FC段的补体C1q分子结合位点被暴露出来，可以将二者连接起来，从而造成假阳性。人类血清中含有能与啮齿类动物如鼠等结合的天然嗜异性抗体，可将ELISA系统中一抗和二抗连接起来，也能造成假阳性。解决的办法是：可在标本稀释液中加入过量的动物，加入量不足或亚类不同时无效。抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素等嗜靶抗原的自身抗体。