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肉中单核细胞增生李斯特菌PCR快速检测方法建立

应用领域

检测样品

检测项目

建立单核细胞增生李斯特菌快速、敏感、特异的PCR诊断方法。方法:采用聚合酶链式反应技术(PCR)特异性扩增单核细胞增生李斯特菌内化素基因(ivlA),并评价该方法的特异性与敏感性。结果:在445bp处出现inlA基因的目的片断,只有单增李斯特菌的目的片段获得扩增,其他菌种扩增均呈阴性;该方法可以检测到DNA的检测限。结论:PCR方法比传统细菌检测方法更特异、快速、灵敏和简便;为肉中单增李斯特菌的快速检测提供了新的手段。

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近红外光谱技术在肉品检测中的应用和研究进展

应用领域

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 近红外光谱(NIRS)作为新型光学检测技术在食品行业中得到广泛应用。该技术能实现肉品在线、快速、无损检测, 是肉和肉制品品质分析的重要技术之一。文章综述了近红外光谱技术在肉类行业中的重要 应用以及近年来的研究进展, 主要包括蛋白质、脂肪及水分等影响肉类品质的化学组成成分分析, 肉品感官品质如嫩度、保水性、肉色及新鲜度等指标的评价以及肉品的产地、品种等方面的鉴定。同时列举了近红外光谱技术在几种常见肉制品品质检测中的应用实例, 并针对目前发展趋势展望了该技术的前景:近红外光谱技术在进一步深入研究提高肉品检测精度的基础上, 通过与机器视觉技术等新型无损检测技术的融合以实现全面评价肉类品质的目标。

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肉品新鲜度的检测方法

应用领域

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肉品新鲜度的检测方法很多,主要有感官检测,理化指标检测和微生物指标检测。但是这些传统的检测方法都存在检测精度不高或耗时长,不能及时准确地反馈新鲜度的信息等局限,快速精准的无损检测方法是肉品新鲜度检测发展的一个趋势。本文综述了几种肉品新鲜度的传统检测方法和快速无损检测新方法。

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聚合酶链式反应对食物中肉毒的检测

应用领域

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用PCR 方法鉴定肉毒食物中毒的病原菌。方法 用1 对人工合成的寡核苷酸引物护增A、B、E、F 和G 型肉毒神经毒素基因的一段264 bp 的DNA 片段, 并对2 个食物中毒样品的增菌产毒培养液及分离的菌株进行检测。结果 从食物中毒样品中检测出肉毒梭菌。结论 PCR 方法能快速、准确的鉴定肉毒食物中毒样品中的病原菌。

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青海东部地区杂种牛牛肉肉质检测报告

应用领域

检测样品

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本文对西门塔尔( ♂) × 当地黄牛( ♀) 杂种牛的肉质品质成份进行了检测分析。试验表明该杂种牛肉具有“高蛋白、低脂肪、维生素、氨基酸和脂肪酸含量丰富”的优点。

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肉制品月饼的细菌及霉菌的检测研究

应用领域

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为了调查肉制品月饼的卫生情况,本实验选用肉松月饼与火腿月饼为研究对象,进行霉菌及细菌的生长规律研究。根据国家标准方法GB4789.15 — 2003、GB4789.2 — 2003 对月饼中的微生物及水分进行测定。其中,霉菌的计数和鉴定培养是用孟加拉红琼脂培养基和马铃薯琼脂培养基(PDA)进行的,并且分离纯化霉菌菌落,观察菌落形态,用显微镜观察细胞形态进行鉴定。实验结果表明,肉制品月饼中的细菌总数及大肠菌群均未超标。霉菌种类主要有灰绿曲霉、杂色曲霉和黄曲霉三种。

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富营养预增菌液在肉制品沙门菌常规检测方法中替代效果研究

应用领域

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非选择性富营养肉汤( EB) 预增菌检测肉制品沙门菌的方法建立。方法 评估免疫磁珠分离( IMS) 作为常规流程分离食品沙门菌的内质控方法; 比较样品经乳糖肉汤( LB) 和EB 两种预增液分步增菌后常规平板分离与IMS 的分离效果; 最终实样比较以EB 为预增液的替代流程与IMS 的检测敏感性。结果 应用IMS 检测100 件用LB 和134 件EB 分 步增菌样品的阳性率没有差异( P > 01 05) ; 48 件肉制品用EB 预增的常规平板分离阳性率均高于LB, 56 件肉制品用EB 预增液作常规平板分离的检测敏感性接近IMS( P> 01 05) 。结论 以EB 为预增菌的肉制品沙门菌分步检测流程, 节省了增菌时间, 提高常规平板分离的检测敏感性。

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在线GPC_GC_MS高通量检测肉制品中的邻苯二甲酸酯类物质

应用领域

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采用在线GPC净化,以氦气为载气,Rtx-5 MS色谱柱分离,质谱检测器检测邻苯二甲酸酯类物质,建立一种在线GPC/GC/MS高通量检测肉制品中20种邻苯二甲酸酯类物质的方法。结果表明:方法检出限为0.5mg/kg,平均加标回收率为95.68%~99.29%,相对标准偏差为1.31%~3.32%。该方法重现性好、灵敏度高,是肉制品中邻苯二甲酸酯类物质检测的有效方法。

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肉毒毒素的中毒和检测方法

应用领域

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肉毒毒素是自然界中的一类强毒素.能引起人和动物的中毒甚至死亡。国内外均有肉毒毒素中毒及其相关检测方法的报道。本文简要论述了肉毒毒素的中毒情况和检测方法, 并介绍了近年来检测技术的新进展。

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浅述肉类新鲜度的检测方法

应用领域

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动物被宰杀后在运输和储存过程中由于自身因素及周围环境的影响, 肉的新鲜度会逐渐降低, 甚至腐败变质。

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应用多聚酶链反应检测生鸡肉中沙门氏菌的研究

应用领域

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建立快速、特异、灵敏的PCR方法以检测生鸡肉中的肠炎沙门氏菌。方法:以肠炎沙门氏菌的sefA基因作为靶序列设计一对引物,将样品增菌后用煮沸法提取细菌基因组DNA进行检测。结果:每克生鸡肉污染3.0×10° CFU肠炎沙门氏菌,经16 h增菌培养后可扩增出500 bp特异性性DNA带,对28份屠宰场样品的检测结果与传统方法相符合。结论:PCR法适于生鸡肉中肠炎沙门氏菌的快速、准确检测。

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深圳市熟肉制品致病菌监测结果分析

应用领域

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了解深圳市熟肉制品受致病菌污染的状况,为食源性疾病的预防和控制提供科学依据。方法: 对酒店、超市和市场禽类熟肉制品随机采集360 份样品,依据国标方法、荧光PCR 方法及全自动微生物分析仪,对上述样品进行致病菌检测。结果: 360 份样品共检出致病菌38株,检出率10. 56%,其中沙门菌4株、金黄色葡萄球菌32 株、单增李斯特菌2 株。酱卤类、烧烤类、白切类熟肉制品检出率分别为11. 66%、3. 33%、16. 67%。结论: 深圳市熟肉制品受致病菌污染严重,以金黄色葡萄球菌、沙门菌和单核李斯特菌污染为主; 白切类熟肉制品受致病菌污染最为严重为16. 67%; 其次是酱卤类为11.66%; 最后是烧烤类为3. 33%。说明酒店、超市熟肉制品存在很大问题,应加大对熟肉制品监管力度,保证食品质量,确保消费者健康。

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非衍生化串联质谱法检测酰基肉碱方法的应用

应用领域

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建立非衍生化串联质谱检测酰基肉碱的方法,以便用于有机酸和脂肪酸代谢病的检测和筛查。方法使用含13 种稳定同位素标记的酰基肉碱内标准品的溶剂萃取滤纸干血片中的游离肉碱和酰基肉碱,串联质谱仪直接进样,检测游离肉碱( C0) 、乙酰基肉碱( C2) 、丙酰基肉碱( C3) 、丁酰基肉碱( C4) 、异戊酰基肉碱( C5) 、戊二酰基肉碱( C5DC) 、己酰基肉碱( C6) 、辛酰基肉碱( C8) 、葵酰基肉碱( C10) 、十二烷酰基肉碱( C12) 、十四烷酰基肉碱( C14) 、十六烷酰基肉碱( C16) 和十八烷酰基肉碱( C18) 的浓度。分析该方法的精确性、准确性及稀释回收率。结果低浓度酰基肉碱的批内变异系数( CV) 为6. 61% ~ 10. 97% 之间,批间CV 为13. 31% ~18. 98%; 高浓度酰基肉碱的批内CV 为5. 74% ~ 12. 13%,批间CV 为12. 70% ~ 18. 88%。除C5DC 外,其余酰基肉碱的偏倚为- 15% ~ 20%; 酰基肉碱不同稀释浓度的回收率在90% ~ 115%之间,实测值与预测值的相关系数( r) 为0. 97 ~ 0. 99。结论非衍生化串联质谱检测酰基肉碱有较高的精确性和准确度,有临床应用价值。此技术可以作为新生儿遗传代谢病筛查的常规技术。

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增菌_PCR法与传统方法检测禽肉中沙门菌的比较研究

应用领域

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比较增菌-PCR 法与传统方法检测禽肉中沙门菌的敏感性、特异性和时效性。方法以沙门菌invA 基因为基础,选择特异性引物,采用30 株沙门氏菌和18 株非沙门菌建立并验证PCR 法的特异性。选用肠炎沙门菌CMCC50041,参照GB4789. 4—2010 进行人工染菌实验,染菌量分别为每25g 样本1、10、102、103、104、105 和106 CFU。分别在增菌0、4、8、12 和18h 取1ml 培养液,提取DNA 进行PCR 检测,并同时划线接种选择性平板,用传统方法进行分离鉴定,比较两种方法检测的敏感性和特异性。采集16 份市售整鸡样本,用这两种方法进行检测,进一步比较两者的阳性检出率。结果30 株沙门菌都检出阳性,而非沙门菌都检测为阴性,说明本研究建立的PCR 法特异性好。人工染菌的样本在增菌12h 后,PCR 法检出限可达每25g 禽肉样本1CFU,传统方法检出限为每25g 禽肉样本10CFU。增菌-PCR 法整个流程只需要1 天,比传统方法需时提前4 ~6 天。16 份市售样本,增菌-PCR 法的阳性率为43. 75% (7 /16),高于传统方法31. 25% (5 /16)。结论增菌-PCR 法具有快速简便、敏感特异等优点,较传统方法大大缩短了检出时限,提高了沙门菌的检出率。

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FTA滤膜用于PCR检测肉中的沙门氏菌

应用领域

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在采用浮选与溶剂萃取相结合方法的基础上,使用FTA 滤膜从鲜肉中提取沙门氏菌的DNA,消除PCR反应的抑制因子。以沙门氏菌编码吸附和侵袭上皮细胞表面蛋白的invA 基因为靶基因,经过PCR 扩增得到376bp的产物,经过DNA 测序证实该产物为目的扩增产物。使用FTA 滤膜处理样品,再通过PCR 方法检测沙门氏菌,猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉匀浆液的检出限均为7 × 101CFU/ml,可在6h 内完成对肉中沙门氏菌的检测,比目前普遍采用的先增菌再进行PCR 检测的方法缩短了12~24h。实际检测了72 份样品,同时与GB/T 4789.4 — 2003 方 法做比较,本方法的检出率为27.8%,检出时间为6h;GB/T 4789.4 — 2003 方法检出率为22.2%,检出时间为5d。 结果表明:FTA 滤膜用于PCR 检测肉中沙门氏菌检出率高、耗时短。使用FTA 滤膜法制备模板DNA,为食品中的致病菌快速检测构建了一个技术平台。

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注水肉检测方法研究进展

应用领域

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注水肉不仅是以水充肉、缺斤少两的经济问题,更是食品安全问题,关系到公共健康。综述了多种常见的检测方法,如感官判断、试纸法、快速检测仪器法、干燥法及低场核磁共振分析法等。

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微波消解_火焰原子吸收法检测肉制品中的锌元素

应用领域

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建立基于微波消解前处理的火焰原子吸收法(FAAS)检测肉制品中锌元素,以评价其替代国标中干法灰化前处理的可能性。方法 通过优化消化液配比、消解时间、温度三个关键指标, 与国标中干法灰化后测得的肉制品中的锌元素浓度相比较。结果 微波消解恒温条件最终确定为 20 min 180 ℃, 消化液为 8.0 mLHNO3及2.0 mL H2O2, 回收率99.50%~102.50%, 相对标准偏差1.26%~2.91%; 并用此法对无锡市场上有关动物蛋白制品中锌含量进行普查, 发现猪肉制品、蛋制品和鱼肉制品中锌含量分别为30.25~78.44 mg/kg,10.95~26.41 mg/kg 和14.37~33.75 mg/kg。结论 在动物蛋白制品中锌元素的检测中, 微波消解预处理可以取代干法灰化预处理, 具有操作时间短, 污染几率小, 回收率高等优点。

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肉毒梭菌的荧光定量PCR检测方法

应用领域

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根据肉毒梭菌神经毒素基因设计的引物和探针,建立了肉毒梭菌荧光定量PCR 快速检测方法。肉毒梭菌产生了典型的“S”型曲线,其他干扰菌都无扩增,说明引物特异性较好,检测灵敏度为1×103 cfu/mL。该方法能够实现肉毒梭菌的快速检测,具有灵敏度高、特异性好的特点。

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传统肉制品中多环芳烃来源和检测方法研究进展

应用领域

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详细阐述了目前传统肉制品中多环芳烃的产生途径主要是肉制品烟熏工艺、脂肪的焦化和裂解、蛋白质高温分解和糖的不完全燃烧造成的,指出多环芳烃检测中前处理过程的重要性和困难性,讨论了各种前处理过程和检测方式的优缺点,并将我国食品中多环芳烃限量标准与欧盟限量标准相比较,指出我国在多环芳烃限量保准方面与欧盟的差距,并对多环芳烃的检测和控制技术进行展望。

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FTA滤膜用于PCR检测肉中志贺氏菌的研究

应用领域

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建立直接从肉中检测志贺氏菌的快速、敏感、特异的PCR 检测方法.根据GenBank 公布的志贺氏菌属的侵袭性质粒抗原基因IpaH 的保守序列设计特异性引物,经过PCR 扩增得到393 bp 的产物.经过DNA 测序证实该产物为目的扩增产物. 使用FTA 滤膜处理样品,再通过PCR 方法检测志贺氏菌. 猪肉、牛肉、羊肉检测的检出限均为10 CFU/mL 匀浆,可在6 h 内完成对肉中志贺氏菌的检测. FTA 滤膜用于PCR 检测肉中志贺氏菌灵敏度高,耗时短,为肉中志贺氏菌的快速检测提供了新的方法.

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酒店酱卤类熟肉制品中金黄色葡萄球菌检测结果及耐药性分析

应用领域

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了解酱卤类熟肉制品中金黄色葡萄球菌污染状况及耐药情况, 为预防食源性疾病及指导临床合理用药提供科学依据。方法: 按照国家规定的标准检验方法GB /T4789. 10- 2008进行检验, 药敏试验采用K - B法, 依据NCCLS( 美国临床实验室标准委员会)规定判断结果。结果: 从115份样品中检出18株金黄色葡萄球菌, 检出率为8. 68%, 经抽 查50%的酒店酱卤类熟肉制品卫生质量不合格。17种抗生素中以青霉素、氨苄西林的耐药性最高为88. 89%, 未检出有耐甲氧西林和耐万古霉素的菌株, 对头孢唑啉、头孢吡肟、头孢噻吩、万古霉素、庆大霉素、呋喃妥因、克林霉素、头孢西丁完全敏感。结论: 酱卤类熟肉制品中金黄色葡萄球菌污染较重, 不同的加工制作方式与金黄色葡萄球菌污染存在一定关系。建议加强餐饮业卫生管理, 消除食物中毒隐患, 做好日常耐药性监测工作, 关注耐甲氧西林和耐万古霉素菌株的出现。

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环介导等温扩增技术检测肉及肉制品中的沙门氏菌

应用领域

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建立用环介导等温扩增技术检测肉及肉制品中沙门氏菌的方法。利用靶基因的6 个区段设计4 条引物,应用具有链置换活性的Bst DNA 聚合酶,能够在恒温(65℃左右)条件下特异、高效、快速地扩增待测物的DNA。针对沙门氏菌的特异基因invA 基因设计两对LAMP 引物,建立LAMP 检测沙门氏菌的新方法,并对肉及肉制品中的沙门氏菌进行检测。结果表明:建立LAMP 技术检测肉及肉制品中沙门氏菌的方法,该方法能够特异检测沙门氏菌,且灵敏性可达10-9CFU/mL,对48 份样品检测,该方法检出率为91.6%、敏感性100%、特异性70.0%、符合率为93.8%、检出时间1.5h。

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荧光定量PCR方法检测畜肉食品中猪源性成分

应用领域

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建立一种快速、特异、灵敏的猪源性成分检测方法。方法 本研究以猪线粒体12S rRNA 基因序列为靶位点设计引物和探针, 进行荧光定量PCR 扩增, 建立猪源性成分检测方法; 以常见畜禽肉包括羊肉、牛肉、鸡肉、鹅肉、鸭肉、兔肉、马肉、鹿肉等参考动物物种作特异性检测; 以50 mg/kg 羊肉DNA 作为稀释液对猪肉DNA 进行梯度稀释, 做灵敏度检测。结果 该方法能够有效对猪源性成分进行快速检测, 具有较强的特异性, 灵敏度较高(可达0.1μg/kg)并且羊肉成分的存在对猪肉灵敏度检测没有影响。结论 该方法特异性强, 灵敏度高,可以快速、准确检测畜肉食品中含有的猪源性成分。

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食品中A型肉毒梭菌PCR_DHPLC检测方法的建立

应用领域

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建立食品中A 型肉毒梭菌的快速检测方法。方法: 应用PCR 结合变性高效液相色谱( DHPLC) 技术,以A 型肉毒梭菌的A 型肉毒神经毒素基因作为靶基因设计特异性引物,PCR 扩增的产物经DHPLC 技术进行快速检测。以非A 型肉毒梭菌,产气荚膜梭菌等23 株参考菌株做特异性实验; A 型肉毒梭菌DNA 稀释成不同梯度,做灵敏度实验。结果: 与传统的检测方法相比,该方法具有很好的特异性,方法灵敏度较高,最低检出限可达到为111ng /tube。结论: 该方法可以快速、准确检测A 型肉毒梭菌,是食品中致病菌快速检测的新技术。

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海东地区羊肉肉质检测分析报告

应用领域

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本文对藏羊、小尾寒羊( ♂) × 陶赛特( ♀) 杂交羊一代的肉质品质成份进行了检测分析。结果表明: 藏羊肉质的主要营养成份,蛋白质、谷氨酸、不饱和脂肪酸的含量高于小尾寒羊( ♂) × 陶赛特( ♀) 杂交羊一代的肉质品质的主要营养成分的含量。

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气味指纹技术在肉品品质及安全检测中的应用

应用领域

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气味指纹技术是借助色谱、质谱以及传感器等技术手段,结合多元统计分析方法,对挥发性化合物进行分析用以表征样品信息的技术。近年来在食品中的应用领域越来越活跃,本文简要介绍气味指纹技术(odor fingerprinttechnique),主要包括电子鼻技术、气质联用技术及其数据处理方法,综述其在肉品品质及安全检测中的应用,具体阐述其在肉品新鲜度、风味和微生物检测中的应用。同时展望气味指纹技术在肉品品质及安全检测中的存在问题及发展前景,为更好应用该技术对肉品质量安全控制提供参考。

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冰鲜鸡肉中致病菌三重PCR检测方法的建立

应用领域

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建立在鸡肉生产一线具有较强操作性,并可同时检测沙门氏菌、单增李斯特菌、大肠杆菌O157的三重PCR 方法。【方法】利用该3 种致病菌的特异性基因invA、HlyA、rfbE 设计3 对引物,在确定方法特异性和抗干扰能力的基础上,用优化后的反应体系对反应灵敏度进行测定,模拟并检测在鸡肉中常见腐败菌和鸡肉基质对检测方法的干扰影响作用下,在前增菌程序的辅助下该方法的实际样品检测灵敏度。【结果】该方法特异性和抗干扰能力强,3 种致病菌测序结果的同源性分别达到100%、99%和99%,反应体系的最佳退火温度为51℃,灵敏 度试验中3 种致病菌同时检出的检测线达到103 CFU/mL,单重的灵敏度达到101 CFU/g,模拟实际样品检测中,经 过20 h 的前增菌后,三者同时检出的灵敏度达到101 CFU/g,单重PCR 的灵敏度达到100 CFU/g;对60 份屠宰线上的鸡胴体样品和32 份超市鸡肉样品中沙门氏菌、单增李斯特菌、大肠杆菌O157 的检出率分别为20%、3.3%、21.7%(屠宰线样品)和25%、21.9%、6.25%(超市样品)。【结论】成功建立了可同时检出鸡肉中沙门氏菌、单增李斯特菌和大肠杆菌O157 的三重PCR 方法,可为生产一线的致病菌检测提供参考。

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肉和肉制品中肠杆菌科细菌的检测和计数

应用领域

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本文对七种阴性菌株和四种阳性菌株进行研究,建立了肉和肉制品中肠杆菌科细菌检测和计数的方法,并对新鲜肉、冷冻肉、冷藏肉和肉制品进行测定。实验结果发现:冷藏、冷冻和新鲜肉的表层样品肠杆菌科细菌的检出量较高,都超过了110 MPN/g,而深层样品肠杆菌科细菌的检出量较少,大部分为<0.3 MPN/g,熟肉制品、香肠类、肉松、肉干类和腊制品中的肠杆菌科细菌的检出量都较少,预加工肉制品中有少数样品的肠杆菌科细菌超过了110 MPN/g。

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PCR技术检测肉中食源性病原菌的研究进展

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快速准确灵敏检测肉中食源性病原菌是保障肉类安全, 防止食源性疾病爆发的重要手段。PCR 技术作为一种检测微生物的方法, 因其具有高特异性、高敏感性和简便快速等特点而成为食源性病原菌检测的重要手段。简要阐述了PCR技术的检测原理, 详细介绍了PCR技术在肉中食源性病原菌检测中的应用。

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榆中县物流集散领域畜禽肉品微生物检测结果分析

应用领域

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了解榆中县物流集散领域肉品微生物污染状况,防止食源性疾病的发生,为物流集散领域肉品微生物快速检测方法建立研究提供科学依据。方法 采用测试片快速检测法,对县内屠宰场、农贸市场、超市三种肉品流通领域的猪、牛、羊、鸡肉采样进行大肠杆菌大肠菌群、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌污染情况监测。结果 检测4 类肉品共120 份,其中79 份检出指定的微生物,总检出率为65.83%。牛肉的大肠杆菌检出率为55.00%,沙门氏菌检出率为20.00%,污染较其他肉品严重;农贸市场经营肉品大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌检出率分别为52.08%、20.83%、18.75%;污染较为较严重。结论 农贸市 售肉品严重受到微生物污染,存在食物中毒的潜在危险因素。应改善农贸市场肉品存放条件,强化物流环节管理,建立微生物预警报告与致病菌污染肉品追溯体系,将肉品微生物检测纳入肉品质量检验项目,加大对物流肉品卫生安全知识的宣传。

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