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FTA滤膜用于PCR检测肉中的沙门氏菌

2014/12/19 15:44

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2014/12/19

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方案摘要：

在采用浮选与溶剂萃取相结合方法的基础上，使用FTA 滤膜从鲜肉中提取沙门氏菌的DNA，消除PCR反应的抑制因子。以沙门氏菌编码吸附和侵袭上皮细胞表面蛋白的invA 基因为靶基因，经过PCR 扩增得到376bp的产物，经过DNA 测序证实该产物为目的扩增产物。使用FTA 滤膜处理样品，再通过PCR 方法检测沙门氏菌，猪肉、牛肉、羊肉、鸡肉匀浆液的检出限均为7 × 101CFU/ml，可在6h 内完成对肉中沙门氏菌的检测，比目前普遍采用的先增菌再进行PCR 检测的方法缩短了12～24h。实际检测了72 份样品，同时与GB/T 4789.4 — 2003 方法做比较，本方法的检出率为27.8%，检出时间为6h；GB/T 4789.4 — 2003 方法检出率为22.2%，检出时间为5d。结果表明：FTA 滤膜用于PCR 检测肉中沙门氏菌检出率高、耗时短。使用FTA 滤膜法制备模板DNA，为食品中的致病菌快速检测构建了一个技术平台。

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