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增菌_PCR法与传统方法检测禽肉中沙门菌的比较研究

2014/12/19 15:45

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2014/12/19

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比较增菌-PCR 法与传统方法检测禽肉中沙门菌的敏感性、特异性和时效性。方法以沙门菌invA 基因为基础，选择特异性引物，采用30 株沙门氏菌和18 株非沙门菌建立并验证PCR 法的特异性。选用肠炎沙门菌CMCC50041，参照GB4789. 4—2010 进行人工染菌实验，染菌量分别为每25g 样本1、10、102、103、104、105 和106 CFU。分别在增菌0、4、8、12 和18h 取1ml 培养液，提取DNA 进行PCR 检测，并同时划线接种选择性平板，用传统方法进行分离鉴定，比较两种方法检测的敏感性和特异性。采集16 份市售整鸡样本，用这两种方法进行检测，进一步比较两者的阳性检出率。结果30 株沙门菌都检出阳性，而非沙门菌都检测为阴性，说明本研究建立的PCR 法特异性好。人工染菌的样本在增菌12h 后，PCR 法检出限可达每25g 禽肉样本1CFU，传统方法检出限为每25g 禽肉样本10CFU。增菌-PCR 法整个流程只需要1 天，比传统方法需时提前4 ～6 天。16 份市售样本，增菌-PCR 法的阳性率为43. 75% (7 /16)，高于传统方法31. 25% (5 /16)。结论增菌-PCR 法具有快速简便、敏感特异等优点，较传统方法大大缩短了检出时限，提高了沙门菌的检出率。

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