染色质免疫沉淀技术（Chromatin Immunoprecipitation，简称ChIP）是研究体内蛋白质与DNA相互作用的一种技术。它利用抗原抗体的特异性反应，可以真实地反映体内蛋白分子与基因组DNA结合的状况。下面我们就最基本的实验步骤，实验中的小技巧以及需要注意的问题简单介绍一下。1.  细胞固定甲醛能有效的使蛋白质-蛋白质，蛋白质-DNA，蛋白质-RNA交联，形成生物复合体，防止细胞内组分的重新分布。交联所用的甲醛终浓度为1%，交联时间通常为5分钟到1个小时。需注意的是，交联时间如果过长，细胞染色质难以用超声波破碎，影响ChIP结果，而且实验材料也容易在离心过程中丢失。交联时间如果过短，则交联不完全，产生假阴性。甲醛的交联反应可被加入的甘氨酸终止。2.  染色质片段化交联后的染色质需被超声波切成400~600 bp的片段，以便目的蛋白的暴露，利于抗体识别，其片段破碎的均匀一致性对结果影响至关重要。传统的超声波破碎是利用机械力断裂染色质，容易引起升温或产生泡沫，这都会引起蛋白质变性，进而影响ChIP的效率。而来自比利时的Bioruptor非接触式超声波破碎仪采用温和的破碎方式，保证了蛋白的活性，DNA破碎效果均一，同时外接水循环仪保证了实验的温度稳定性，成为目前ChIP实验的首选。3.  染色质免疫沉淀反应Input对照：在进行免疫沉淀前，需要取一部分断裂后的染色质做Input对照。Input需要与沉淀后的样品DNA一起经过逆转交联，DNA纯化，以及最后的检测。Input对照不仅可以验证染色质断裂的效果，还可以根据Input中的靶序列的含量以及染色质沉淀中的靶序列的含量，按照取样比例换算出ChIP的效率，所以Input对照是ChIP实验必不可少的步骤。Beads选择：接下来，利用目的蛋白质的特异抗体通过抗原-抗体特异反应形成DNA-蛋白质-抗体复合物，然后使用Agarose beads或Magnabeads沉淀此复合物，特异性地富集与目的蛋白结合的DNA片段。再经过多次洗涤，除去非特异结合的染色质后，用SDS+NaHCO3洗脱免疫沉淀复合物。抗体选择：染色质免疫沉淀所选择的目的蛋白的抗体是ChIP实验成功的关键。因为在蛋白质与染色质交联结合时，抗体的抗原表位可能因为与结合位点的距离太近，不能被抗体识别，所以不能有效地在体内形成免疫沉淀复合物，直接影响ChIP的结果。阴性对照设置：在做ChIP实验时，需设置对照，以便于对实验结果的可靠性进行评估。阳性抗体和阴性抗体对照是最基本的实验对照。阳性抗体通常选择与已知序列相结合的比较保守的蛋白的抗体，常用的包括组蛋白抗体或RNAPolymerase II抗体等。阴性抗体通常选择目的蛋白抗体宿主的IgG或血清。目的蛋白抗体的结果与阳性抗体和阴性抗体的结果相比较，才能得出正确结论。另外，还应考虑目的蛋白抗体与DNA的非特异性结合的可能，所以通常还会选择一对阴性引物，即目的蛋白肯定不会结合的DNA序列，作为该抗体的阴性对照。最佳的阴性对照引物是在靶序列上游的一段与目的蛋白肯定不能结合的序列。如果目的蛋白没有商品化的适用于染色质免疫沉淀实验的抗体，只有其他用途的抗体时，可以先做蛋白质免疫沉淀检测。如果抗体可以成功的沉淀蛋白，再进行染色质免疫沉淀实验的检测。4.  交联反应的逆转和DNA的纯化用不含DNase的RNase和Proteinase K，65℃保温6小时逆转交联，经DNA纯化柱回收DNA或用酚氯仿抽提、乙醇沉淀纯化DNA。在逆转交联时不使用Proteinase K，然后用丙酮回收有机相中的蛋白质，进行分析。5.  DNA的鉴定最常用的DNA的鉴定方法是半定量PCR和Real-time PCR。由于启动子区域序列多样性的特点，所以不同的细胞系或不同的动物品系的同一基因的启动子序列有可能不同，因此可设计多对引物来反复验证ChIP实验的结果.

“正离子和负离子检测模式可同时进行”The Isolera™ Dalton 2000系统由三部分组成： Biotage® Dalton 2000质谱检测器，Isolera™ Dalton Nanolink连接器以及Isolera™ Spektra 快速纯化制备系统，Isolera Dalton 2000 可以在样品进行纯化制备的同时，对收集馏分进行质谱在线检测，大大节省您的分析检测时间！对于制药而言，必须在药物研发领域更快更有效率，企业才更具竞争力；当前对于小分子药物的前期研发而言，主要步骤包括：合成，纯化以及活性测试。而很多新型分子的合成，都是参照的现有的类似文献的基础上进行尝试性的合成探索，很多情况下，最终的产物和之前设计生成的产物，都会有一些出入，化学家们需要在拿到产物后进行结构鉴定，或者给分析部门进行检测（质谱，核磁等），这个鉴定的过程往往会浪费大量的时间，同时还需要与另外的部门进行有效沟通，费时费力。 为提供研发效率，节约时间成本，Isolera Dalton 2000在这样的背景下应运而生！ 系统功能Dalton 2000是一款紧凑型单重四极杆质谱检测器，带有正离子和负离子检测模式，通过APCI大气压化学电离（ESI电喷雾电离，可选）将样品离子化后进行质谱检测。Dalton 2000被设计与Isolera 系统链接，可以在Flash纯化的同时，对产物结构进行鉴定。?       可完全和Flash的正相系统实时、有效、无缝链接（Nanolink）?       可支持大量产品纯化?       可进行全质谱扫描，选择目标质谱峰后，再进行分析?       用户可以选择一个质谱范围用于馏分收集?       可进行选择性离子检测?       选定的目标质谱峰达到基线时，系统会可以自动停止运行?       支持直接进样质谱分析?       质谱分析范围：m/z90-2000简化工作流程Isolera Dalton 2000 在快速纯化样品时，用Mass实时检测和收集含有目标化合物的馏分，检测结果更准确，纯化效果更好，回收率更高，最重要的是，节省了大量的检测时间。整个过程，不需要复杂的分析检测程序，这样，大大提高工作效率，节省纯化和检测时间。全新升级的Mass 检测器，使快速制备色谱达到了前所未有的扩展，我们创造的系统，使快速制备色谱技术和质谱技术第一次完美的结合。整个过程进一步减少了使用者的人为因素，使得化学家把重点放在化学和合成，而不是纯化和分析，大大提高实验室效率。智能，集成快速制备色谱和Mass 检测器的智能集成，需要非常先进的技术，以保证样品实时而准确的检测，这一切都得益于我们的Isolera™ Dalton Nanolink, 一种智能取样装置，保证了在任何时刻，都能提供给 DaltonMass 检测器精确的样品量。当使用不同类型、规格的色谱柱时，Dalton Nanolink 会自动控制流速保证样品检测的准确性。   Isolera Dalton 2000 相关实例图谱：

上周我们综述了微波化学近年来强劲的发展趋势，本周开始我们将每周推送一篇微波技术在不同领域的应用。近年来，量子点技术在发光及显示方面越来越得到关注，从LED到OLED再到QLED，换代时间越来越短，世界上最先进的显示发光企业，如韩国LG，中国的京东方等都已进入了量子点发光时代。但是其中的技术壁垒，如量子点产率低，发光效率低等都限制着QLED的发展。加拿大阿尔伯塔大学利用微波合成仪成功制备了尺寸均一，发光亮度可调的硅量子点。通过质谱、傅里叶红外光谱以及X射线光电子能谱证实了其烷基化表面以及与各种烯烃及烷烃的配位交换反应。图1 微波合成反应流程及实验条件（所用仪器为Biotage initiator微波合成仪）图2.硅量子点的TEM与HRTEM图像（晶格条纹清晰）    很多人提到微波合成，就会不由自主的与有机或药物合成联系起来，但是近年来微波技术的应用领域早已扩大到多种研究领域，因其提供了传统合成方法之外的新手段，欲了解更多产品应用，请持续关注我们的公众号。

上次分享的内容是白细胞通过其表面整合素受体Mac-1会与血小板表面 GPIbα 相互作用，促进血栓生成。这次分享的内容是血小板激活后通过分泌TGFβ抑制T细胞的功能，抗血小板药物，如阿司匹林能够增强细胞治疗的效果！ 关键数据摘录如下：激活血小板的可溶性分泌物（PR）能够抑制T细胞功能PR中起T细胞抑制作用的主要是TGFβ和Latate同时阻断TGFβ和lactate能“rescue” PR的抑制作用“KO”血小板能增强小鼠T细胞治疗模型效果，但主要影响TGFβ水平，对lactate影响很小，暗示lactate还有除血小板之外的其他来源，TGFβ是激活血小板分泌物中起T细胞抑制作用的主要成分GARP起TGFβ激活作用，“KO” GARP对小鼠细胞治疗模型的贡献大于“KO” TGFβ，暗示激活的TGFβ才能执行T细胞抑制作用体内进一步验证GARP的作用血小板激活时GARP会上调，所以抗血小板药物（AP）能够通过抑制血小板激活来下调GARP，解除对T细胞的抑制，增强细胞治疗效果！ Rachidi S, Metelli A, Riesenberg B, et al. Platelets subvert T cell immunity against cancer via GARP-TGFβ axis[J]. Science Immunology, 2017, 2. 想了解更多CNS级期刊最新内容，请关注我们的公众号，常有更新哦，也可加笔者微信交流：qianle522568！

理化产品培训上海行——增强专业知识，提升服务质量为扩大公司理化产品线，引进优秀产品，近日公司组织各分公司及办事处的理化产品经理赶赴上海厂家总部进行了为期三天的培训与考察。主要包括有机及药物合成产品线，气相色谱产品线，环境检测及分析产品线，食品药品检验检测产品线，客户涵盖了高校，科研，政府，企业，第三方监测等多个用户群体。图1.有机及药物合成产品线，涵盖合成，纯化，后处理各个实验阶段所需实验设备图2.个性化气相色谱解决方案，支持手动进样、自动进样、六通阀上样图3.环境检测及分析产品线，政府环保部门、化工企业、第三方监测机构必备神器 图4.食品药品（FD）检验检测产品线，符合多种测量规范及药典德泉始终将为客户提供优秀的产品作为己任，努力引进国外先进的技术与仪器，同时也很希望与国内追求质量与先进的厂家进行合作，促进客户、厂家以及德泉自身的共赢。

    单层细胞培养技术为细胞和分子生物学的发展奠定了基础。但是这种经典的细胞体外培养模型与细胞真实的生长环境和生长方式还是有明显的差异，3D细胞培养模型作为一种新的细胞培养方式，3D细胞培养模型能更好的模拟细胞在人体内的生长环境。三维细胞培养可作为动物模型和二维培养模型之间的桥梁，广泛应用于肿瘤模型构建、肿瘤细胞生理学研究以及肿瘤耐药机制分析等的研究。一、3D培养应用于肿瘤微环境研究    低氧是肿瘤微环境的一个重要标记。低氧诱导因子(HIFs)可通过调节下游肿瘤相关基因的表达控制肿瘤细胞的迁移、侵袭和死亡，在肿瘤细胞产生治疗抗性过程中发挥重要作用。    APE1/Ref-1上调HIF-1α。碳酸酐酶9（CA9）可增强细胞存活能力，其表达具有HIF-1依赖性。在3D条件下，单独培养的胰腺癌细胞（PDAC，包括Pa03C、10.05）分别用APE1/Ref-1抑制剂APX3330、APE1/Ref-1抑制剂APX3330+CA9抑制剂SLC-0111处理，培养后进行观察。用红色荧光标记胰腺癌细胞，发现两种抑制剂同时使用具有更好的肿瘤生长抑制效果，为肿瘤治疗提供新的思路。（图1）                                    图1二、3D培养应用于肿瘤细胞增殖研究    3D 培养系统中细胞是非单层生长，其能生存更长时间且增殖率更慢。将TC-71尤文肉瘤细胞分别培养在2D单层和3D PCL支架中，发现在3D支架中，瘤细胞生长明显减慢。该研究突出了3D培养的优点，可用于接近真实生理状态的细胞增殖研究。（图2）图2三、3D培养应用于抗肿瘤药物研究    2D药物测试体系提供的信息有限，并往往具有误导性。而动物模型饱受伦理学的争议，3D细胞培养技术有望作为二者的桥梁，在提高细胞的药物筛选和识别毒性及鉴定无效的物质成分方面具有更大的潜力。    将不同乳腺癌细胞系AU565，SKBR3，hcc1569和 BT549分别培养在传统的2D单层和lr ECM 3D基质中，并分别给予曲妥单抗、帕妥珠单抗（单克隆抗体靶向HER2），拉帕替尼（HER2和EGFR 双重抑制剂），所有3D培养的细胞株都表现出了更强的药物抵抗性，同时我们也观察到在两种培养条件下，每个细胞系对药物的应答反应各不相同。（图3）         图3        传统的2D培养技术在细胞与微环境的复杂交互作用方面存在诸多的局限性，随着3D细胞培养的提出，更接近体内真实的生长环境，在许多方面体外研究更接近动物模型。随着3D细胞培养技术的发展，其在肿瘤药物开发，深入理解肿瘤细胞生理，基因和蛋白表达及癌症研究方面具有广泛的前景和重要的价值。 参考文献：[1] Logsdon DP, Grimard M, Luo M, et al. Regulation of HIF-1α under Hypoxia by APE1/Ref-1 Impacts CA9 Expression: Dual Targeting in Patient-Derived 3D Pancreatic Cancer Models [J],2016,15(11):2722-2732.[2] Eliza Li Shan Fong, Salah-Eddine Lamhamedi-Cherradi, Emily Burdett, et al. Modeling Ewing sarcoma tumors in vitro with 3D scaffolds [J]. Proc Natl Acad Sci U S A, 2013, 110(16): 6500–6505.[3] Weigelt B, Lo AT, Park CC, et al. HER2 signaling pathway activation and response of breast cancer cells to HER2-targeting agents is dependent strongly on the 3D microenvironment[J]. Breast Cancer Res Treat, 2010, 122(1):35-43.

    血液是由高度异质的各种细胞组成的“混合物”，众所周知，白细胞主要执行免疫功能，而血小板在止血、血栓形成过程中发挥重要作用，在血液这个“混合物”中白细胞和血小板肯定是能够“遇见”彼此的，那么问题来了-它们两个相遇会擦出“火花”吗？答案是肯定的，此次分享的内容：白细胞表面整合素受体Mac-1会与血小板表面 GPIbα 相互作用，互作之后，白细胞Foxp1水平会下调，进而分泌的组织因子（TF）增多，TF对血小板存在激活作用。基于这样的分子基础，敲掉Mac-1或者干扰Mac-1与GPIbα 的互作即能够抗血栓！   这篇文章的趣味在于不再孤立的看某一种细胞，而是把目光转向不同种细胞间的相互作用，研究异质细胞间的cross talk - 流式细胞术对于此方向有着不可替代、独一无二的作用！ 关键数据摘录如下：    荧光素酶报告基因法（NIH/3T3 cells were co-transfected with the TF promoter reporter gene plasmid, pRSV-b-gal, and expression plasmids for Foxp1 or pcDNA3.1 vector control）发现FoxP1能够抑制TF的转录从而抑制TF的表达，Mac-1被激活后FoxP1会下调，暗示Mac-1对TF表达的正向作用 敲除Mac-1具有血小板激活作用的TF表达下调 基于上面的分子基础，敲除白细胞表面的Mac-1能延迟血栓生成     Mac-1的激活来源于与血小板表面蛋白的互作，因此干扰两者的互作同样能够发挥延迟血栓生成的作用！可以突变Mac-1上互作关键位点，如下图：流式检测发现：Mac-1的αMI结构域突变后与血小板的互作减弱由于Mac-1的αMI结构域突变后与血小板的互作减弱，体内血栓形成发生了延迟    小分子或抗体同样能够干扰白细胞Mac-1与血小板GPIbα的互作，从而起到延缓血栓形成的作用，如下图：抗体或小分子可以干扰白细胞Mac-1与血小板GPIbα的互作抗体或小分子干扰白细胞Mac-1与血小板GPIbα互作后可延缓血栓形成     干扰白细胞Mac-1 αMI结构域与血小板GPIbα互作以抗血栓策略的优势在于不会影响机体的免疫功能和正常的止血功能 - 毒副作用小！如下图：流式检测发现：Mac-1 αMI结构域突变后，血小板激活的关键分子P选择素、GP IIb/IIIa未受到影响Mac-1结构域突变不影响止血、白细胞功能 Wang Y, Gao H, Shi C, et al. Leukocyte integrin Mac-1 regulates thrombosis via interaction with platelet GPIbα[J]. Nature Communications, 2017, 8:15559. 想了解更多CNS级期刊最新内容，请关注我们的公众号，常有更新哦，也可加笔者微信交流：qianle522568！

    细胞凋亡普遍存在于生命界，在生物个体和生存中起着非常重要的作用。它是细胞在一定生理条件下按特定顺序发生事件的组合，是细胞遵循一定规律自己结束生命的自主控制过程。细胞凋亡检测可以用于基础医学研究，新药研制，生物制品开发等多个领域，在生物学、医学发展过程中具有举足轻重的地位。    细胞凋亡不同时期有不同变化。细胞凋亡早期，磷酯酰丝氨酸（Phosphatidylserin，PS）外翻，AnnexinⅤ在Ca2+存在情况下与PS结合，存在于细胞表面；细胞凋亡中期，线粒体膜电位破坏，包括细胞色素C在内的多种促凋亡因子在内被释放，效应Caspases被激活,产生凋亡小体;细胞凋亡晚期，染色体DNA断裂，产生180bp-200bp或其整数倍的DNA片段，这些片段带有游离3'-OH末端。由于细胞凋亡不同阶段的特定指征只能维持一段时间，所以需要在不同的时间点采样，检测多种指标，才能保证检测结果准确性。    流式细胞术是目前进行细胞凋亡检测比较常用的技术，可以实现单细胞层面AnnexinⅤ检测、线粒体功能检测、Caspases 酶活检测和DNA断裂检测。其实，我们还可以结合成像和酶标的方式，以较为直观的方式提供更多的辅助证据，使我们的文章结论更具说服力。    JC-1探针是一种电位敏感探针，正常线粒体内，JC-1聚集在线粒体基质中形成聚合物，聚合物发出强烈的红色荧光；不健康的线粒体由于膜电位的下降或丧失，JC-1只能以单体的形式存在于胞浆中，产生绿色荧光。因此颜色的变化非常直接的反映出线粒体膜电位的变化。线粒体的去极化程度也可以通过红/绿荧光强度的比例来衡量。北德克萨斯大学健康科学中心正是使用线粒体JC-1探针，在Biotek cytation 5提供的恒温常氧环境中，实现了长达8小时的凋亡细胞线粒体电位变化连续监测。（图1） 图1    美国北德克萨斯大学健康科学中心使用特殊的Caspase3/7酶活底物，借助Biotek Cytation5的气体控制功能，实现了常氧和缺氧条件下，Caspase3/7酶活检测，其主要原理就是特殊底物被Caspase3/7切割后可释放出萤火虫荧光素酶底物，该底物在萤火虫荧光素酶作用下发光，通过发光强度确定Caspase3/7酶活。最终实现了细胞凋亡中期指标的检测。（图2） 图2    美国NIH借助Biotek Cytation3，使用双染法对细胞进行凋亡检测，证明Englerin A对尤文肉瘤细胞具有凋亡诱导作用。荧光染料Hoechst 33342能少许进入正常细胞膜，使其染上低蓝色，而凋亡细胞的膜通透性增强，因此进入凋亡细胞中的Hoechst 33342比正常细胞的多，荧光强度要比正常细胞中要高。活细胞对PI染料拒染，而坏死细胞由于膜完整性在早期即已破损，可被PI染料染色。根据这些特性，用Hoechst 33342结合PI染料对凋亡细胞进行双染色，就可以将处于凋亡中晚期的细胞和已经死亡的细胞区分开来。（图3）  图3    当然，除了上述介绍，western blot、细胞形态改变、DNA ladder等多种方法也可以用来丰富细胞凋亡数据。随着生物技术的不断发展，针对细胞凋亡过程中不同阶段不同特点，我们对于细胞凋亡的认识将越来越深刻。 参考文献：Vittorio Caropreso, Emad Darvishi, Thomas J. Turbyville, et al. Englerin A Inhibits EWS-FLI1 DNA Binding in Ewing Sarcoma Cells[J]. J Biol Chem, 2016, 291(19): 10058–10066.Park YH, Broyles HV, He S, et al. Involvement of AMPA Receptor and Its Flip and Flop Isoforms in Retinal Ganglion Cell Death Following Oxygen/Glucose Deprivation[J]. Invest Ophthalmol Vis Sci, 2016, 57(2):508-26. 

2003年，NATURE以“Out of the kitchen”为题发表了一篇关于微波技术在化学上的应用文章（NATURE/VOL421/6FEBRUARY 2003），文章结尾大胆的预测了微波化学的应用前景与发展——越来越多的化学家会希望拥有一台微波合成仪。如今十几年过去了，为了验证当年的预言是否正确，笔者在全球最大的化学数据库ACS，以“microwave synthesis”为关键词进行检索并统计数据，得到了如下的曲线，可以看到，近十五年来，以微波技术发表的文章正在高速增长，这也证实了有越来越多的化学家将微波作为自己的实验手段。作为一名理化产品经理，对每一款仪器我都会下意识的进行应用领域的分类，但是从得到的数据分布来看，微波技术在无机化学，纳米材料，自组装材料，药物合成，高分子化学，生物化学等等领域都被广泛的应用。我想这是由于化学反应的两个特点造成的——接触与热能，对绝大多数化学反应，这是两个必备条件，对应的两个实验手段分别是搅拌与加热。微波合成仪，可以提供由内而外的加热方式以及每秒数度的加热速率，因此未来势必成为像加热与搅拌一样的普及仪器。我们将持续关注微波化学在不同领域的最新应用，下周将介绍Biotage微波合成仪在量子点合成方面的成功应用，请大家提前了解(J. Am. Chem. Soc., 2016, 138 (22), pp7114–7120).

好！热！啊！小G是一个特别怕热的人，除了西瓜、汽水、冰淇淋外，令我感到清凉的也就只剩下学习新的知识了！今天小G给大家带来一些关于亲和纯化的知识，抱起你手中的西瓜，我们开讲咯～做为最常用的亲和纯化标签，6xHis可以说是无人不知，无人不晓～不过到底你对它了解多少呢？今天小G就给您详细介绍一下6xHis的前生今世。6xHis标签，也称为多组氨酸标签，His6标签或六组氨酸标签，是在转染细胞中由与靶蛋白的羧基（C-）或氨基（N-）末端融合的至少6个组氨酸残基组成的氨基酸序列。该标签最常应用于生产重组蛋白，因为组氨酸残基可以在特定的缓冲条件下与几种类型的固定化离子（如镍，钴和铜）结合，可方便简单地检测和纯化His标签蛋白质。Fig.1 His-tag-primers 由于其相对较小的尺寸、很低的免疫原性、亲水性和在洗涤剂及在有许多其它添加剂存在的情况下保有的多功能性，多组氨酸标签现在被认为是用于多种蛋白质纯化的最广泛使用的亲和标签。此外，整个纯化过程均可在天然或变性条件下完成。其不使用蛋白质特异性抗体或探针就可以完成检测和纯化重组蛋白质的能力都使6xHis标签更受欢迎。蛋白质亲和纯化在大肠杆菌和其他原核系统中表达的罕有聚组氨酸标签的重组蛋白通常使用固定化金属离子亲和层析或IMAC纯化。在该方法下，用适当的螯合剂如次氮基三乙酸（NTA）或亚氨基二乙酸（IDA）将载体（通常为琼脂糖或磁珠）衍生化。这些螯合基团会固定所需的二价金属离子（例如镍，铜，钴和/或锌），达到将目标生物分子与蛋白质混合物结合和分离的目的。在选择合适的配体时，您需要考虑IMAC树脂的结合能力严重依赖于目标蛋白质和纯化过程中使用的金属离子本身特性的这一事实。镍，钴和铜通常用于纯化His标记的蛋白质，主要是由于其在水溶液中对组氨酸和半胱氨酸的亲和力。其中，镍是迄今为止最广泛使用的金属离子，对His标签蛋白具有最高的亲和性和选择性。然而，它也可以结合非特异性结合的含有组氨酸簇的内源性蛋白质杂质。钴提供与组氨酸标签更特异的结合，因此当纯度是主要关注点时，它就是最佳的二价阳离子。与镍和钴相比，铜离子与His-标签的结合力更强，但其在三者中具有最低的特异性。正式因为这个原因，仅当纯度不是主要目的时才会使用铜IMAC。纯化过程方法我们在制备样品时，一般会先收获细胞，再通过酶或使用物理机械方法进行裂解。由于Poly-His标签在生理pH和离子强度下与IMAC树脂结合地最好，所以推荐在接近中性缓冲条件下进行结合。大多数研究人员使用含有10至25mM咪唑的Tris缓冲盐水（TBS）作为结合/洗涤缓冲液，以防止内源蛋白与组氨酸簇的非特异性结合。最后，捕获的His-标签的蛋白质的洗脱和回收通常使用增加的咪唑浓度（至少200mM），低pH或过量的强螯合剂如EDTA来完成。当然，您可以在各种起始缓冲液中纯化样品，因为高浓度的盐和某些变性剂都相容的。但需要注意的是，还原剂，氧化剂和螯合剂如EDTA通常与IMAC亲和化学不相容。 His标签蛋白的其他应用除了多组氨酸标记的重组蛋白的纯化外，6xHis标签也可用于以下应用。ELISA或Western blot检测您无需使用抗体就可以使用镍螯合HRP酶来对His标记蛋白的HRP检测。或者，您也可以使用对组氨酸标签的蛋白具有高度灵敏和特异性的抗6xHis抗体来进行实验。蛋白质相互作用pull down镍琼脂糖树脂可用于纯化，鉴定和测量His标记蛋白质的相互作用物质。微孔板涂层镍或铜包被的微孔板可以将融合蛋白从粗制或半纯化样品包被以进行各种平板分析。凝胶染色有多种免疫分析方法可以利用多组氨酸标签通过抗多组氨酸标记抗体或通过SDS-PAGE检测靶蛋白。荧光标签现有开发的荧光6xHis标签，使研究人员能够更容易地调查蛋白质的迁移和转运。 再下一期的《G课堂》中，我们将为大家介绍一下常用的疏水层析。我们下期再见。Bye！品牌简介AKTA™在瑞典语里是真实或纯正的意思，是GE Healthcare 层析系统的品牌，全球超过 100,000 科学家选用该系统在蛋白分离和纯化领域取得突破和进展。这个高贵的血统正飞速进入新一代：AKTA™ avant与AKTA™ pure。自1996引入以来，AKTA™对全世界科学家意味着卓越的纯化性能。几乎可以纯化任何生物分子，使AKTA™蛋白纯化系统可以应对最简单和最艰难的挑战。AKTA™平台涵盖了从科研实验室到工艺开发再到大规模生产所有层析和切向流过滤技术。AKTA™系统由智能可扩展的UNICORN软件操作，使您更容易控制纯化工艺的每个阶段。广泛的预装层析柱、层析介质、切向流过滤、AKTA™系统和UNICORN软件一起提供完整的解决方案，获得更好的结果。北京德泉兴业商贸有限公司为GE healthcare北京及山东科学仪器独家授权。现已提供全线产品支持，欢迎来函及致电：

 真核生物的基因组DNA以染色质的形式存在。因此，研究蛋白质与DNA在染色质环境下的相互作用是阐明真核生物基因表达机制的基本途径。染色质免疫沉淀技术（chromatin immunoprecipitation assay, CHIP )是目前唯一研究体内DNA与蛋白质相互作用的方法。染色质免疫共沉淀（CHIP）的原理：   是在活细胞状态下固定蛋白质-DNA复合物，并将其随机切断为一定长度范围内的染色质小片段，然后通过免疫学方法沉淀此复合体，特异性地富集目的蛋白结合的DNA片段，通过对目的片段的纯化与检测，从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。染色质免疫共沉淀（CHIP）应用：˙检测体内反式因子与DNA的动态作用˙研究组蛋白的各种共价修饰与基因表达的关系˙CHIP与基因芯片相结合建立的CHIP-on-chip方法已广泛用于特定反式因子靶细胞的高通量筛选˙CHIP与体内足迹法相结合，用于寻找反式因子的体内结合位点˙RNA-CHIP用于研究RNA在基因表达调控中的作用。˙CHIPseq获得全基因组范围内与组蛋白、转录因子等互作的DNA区段信息 Diagenode Bioruptor非接触式超声波破碎仪以最全新的技术为CHIP的样品处理保驾护航 ˙宽广的DNA超声范围，保证处理样品的均匀一致˙持续旋转式样本处理，保证绝佳的Chromatin Shearing 结果重复性˙快速的超声波破碎速度，缩短枯燥的等待时间˙密闭式样本处理，不产生感染性飞沫，确保操作人员安全˙样本完全不产生气泡，保证了蛋白活性˙一次样品最大处理量可达12支，提高实验的速率

   今天，高内涵成像的业界领先者ge医疗集团发布了全新高内涵成像产品：In Cell Analyzer 2500 Hs和 In Cell Analyzer 6500 Hs 。使得整条细胞成像产品线变得更加丰富。那么，GE可提供的成像分析解决方案是什么呢？我们通过几个视频来了解一下。GE 细胞成像分析解决方案简介https://v.qq.com/x/page/p0511kgcdpp.html除了看家的超高分辨活细胞成像外，高内涵成像分析产品也一直深得用户的心，那么新的系统可以为您的研究取得哪些领先优势呢？我们也通过一个视频来了解一下。GE 全新高内涵产品介绍https://v.qq.com/x/page/f05116s965l.html对于高内涵仪器来说，最令人诟病的就是软件的操作和使用体验。不过作为我们In Cell Analyzer的灵魂 – In Carta软件完全经过重新设计，让任何一个新手在20分钟内即可上手操作。和一切繁琐的步骤Say Goodbye。到底我们的软件有多好用？ 让我们通过一个视频来了解以下。GE 全新In Carta软件介绍https://v.qq.com/x/page/x0511ian6e0.html全新In Cell Analyzer系列已经上市，相信一定会让您的研究如虎添翼。德泉始终在乎关于您实验的一切，坚持以解决用户需求为中心，提供完整解决方案为方法，为您提供最佳的服务。如果您有关于实验技术的需求和讲座，请联系我们的销售代表和产品经理。品牌简介    我们的Deltavision™产品提供高端显微镜成像解决方案以帮助科学家解决疾病相关的问题，摆脱传统方法的束缚，进行细胞和亚细胞分析。Deltavision™高分辨和超高分辨率成像系统，之前属于Applied Precision公司，现在是ge医疗的一部分。Deltavision™ Elite成像系统    Deltavision™ Elite 是一款整合的高分辨率荧光显微镜平台，优化用于活细胞的低光照成像以及一般荧光成像应用。Deltavision™ Elite包含光学系统的多重改进，结合先进自动化，使得整个系统在多方面适合活样本成像。系统支持各种复杂成像模式，Deltavision™ Elite是具有多种荧光成像需求的实验室的理想平台。Deltavision™ omx sr成像系统    Deltavision™ Omx sr 是代表了最新一代光学显微镜技术的高级多模超高分辨率系统。Deltavision™ Omx系统提供2d和3d结构照明（sim）技术以及单分子定位显微镜以及快速宽场采集高分辨率成像模式。创新的Blaze Sim模块实现了高速Sim成像，使活细胞超高分辨率成像成为现实。此外，Deltavision™ Omx系统支持创新的Ring-Tirf系统使得Tirf模式下也能实现的大面积均匀照明视野，用于多种应用，比如单分子追踪和单分子定位超高分辨率成像。北京德泉兴业商贸有限公司为Ge Healthcare北京及山东科学仪器独家授权。现已提供全线产品支持，欢迎来函及致电：

移植tumour-targeting cytotoxic t lymphocytes (ctls)对实体瘤的疗效一直不太明显，很大程度是由于实体瘤处于很强的免疫抑制微环境之中，今天这篇文章让cd8+ tc表达catch（一个光控钙离子通道），之后利用光刺激选择性的激活cd8+ tc，使其胞内ca2+浓度上调以抵抗treg对tc的抑制作用（treg产生tgfβ，tgfβ抑制ip3的生成，进而降低cd8+ tc胞内ca2+浓度）重新启动cd8+tc对肿瘤细胞的杀伤作用。 文章大致思路、流程如下：随肿瘤发展，treg比例上调，且表型多为activated and terminal effector tregatreg通过抑制cd8+ tc的cd107a（与颗粒外吐相关）表达（不影响perforin、gzmb）抑制cd8+ tc的杀伤作用（诱导靶细胞凋亡） cd8+ tc cd107a下调的分子机制：atreg引起cd8+ tc ip3生成减少，胞内ca2+浓度下降 文章作者尝试了用小分子药物调控cd8+ tc胞内ca2+浓度以抵抗atreg的抑制作用，但因选择性差而失败，因此转向选择性好的光遗传学手段：让细胞表达光控ca2+通道catch，从而特异性的只升高cd8+ tc胞内ca2+浓度！表达catch的细胞在光刺激后胞内ca2+浓度升高表达catch的细胞在光刺激后能抵抗atreg对细胞杀伤作用的抑制将光遗传学调控手段应用于小鼠能明显抑制肿瘤的生长  kim k d, bae s, capece t, et al. targeted calcium influx boosts cytotoxic t lymphocyte function in the tumour microenvironment[j]. nature communications, 2017, 8:15365.想了解更多cns级期刊最新内容，请关注我们的公众号，常有更新哦，也可加笔者微信交流：qianle522568！

    肿瘤免疫治疗是通过激活体内的免疫细胞，特异性地清除癌变的细胞。如上图，免疫检查点PD-1-PD-L1通路会参与调节T细胞对肿瘤细胞的杀伤作用：当T细胞识别了肿瘤细胞表达的PD-L1后，会抑制T细胞的激活，肿瘤细胞逃脱。因此抑制PD-1与PD-L1的识别是肿瘤免疫治疗的重要策略之一，目前针对PD-1的抗体药物已取得令人鼓舞的临床效果！    今天分享的这篇文章：tumour-associated macrophages(肿瘤相关巨噬细胞TAMs)都会表达PD-1 (Figure 2)，且PD-1的表达会随着肿瘤的发展而上调 (Figure 4)；PD-1的表达与巨噬细胞的吞噬作用负相关 (Figure 5)，阻断PD-1或PD-L1能够促进巨噬细胞对肿瘤的吞噬，抑制肿瘤细胞生长 (Figure 6)。Figure 1 TAMs设门策略Figure 2 TAMs高表达PD-1Figure 3 PD-1+及PD-1-  TAMs表面marker表达情况Figure 4 随肿瘤进展，TAM的PD-1表达上调Figure 5 PD-1的表达与TAMs的吞噬作用负相关Figure 6 阻断PD-1或PD-L1能够促进巨噬细胞对肿瘤的吞噬，抑制肿瘤细胞生长Sydney R. Gordon, Roy L. Maute, Ben W. Dulken, et al. PD-1 expression by tumour-associated macrophages inhibits phagocytosis and tumour immunity[J]. Nature, 2017. 想了解更多CNS级期刊最新内容，请关注我们的公众号，常有更新哦，也可加笔者微信交流：qianle522568！

【事 件1】地 点：东三环 时 间：2017年5月16号  10:00活动主题：流式细胞术技术交流会于博士流式细胞术企业讲座如期开始，关注客户应用需求，注重整体解决方案，德泉不仅有专业的产品，德泉更愿为技术与服务代言！【事件2】地 点：北五环  时 间：2017年5月16号  14:00活动主题：流式细胞术技术交流会奔袭30公里，只为确保下午的活动如期举行；于博士流式细胞术企业讲座依旧在行动，为于博士的敬业精神点赞，客户的热情是我们最大的动力！【事件3】地 点：南三环  时 间：2017年5月19号  10:00活动主题：表面等离子共振（SPR）技术在生物分子相互作用分析领域的应用讲座GE Biacore产品专家带来的高质量技术讲座，德泉始终认真做事，为客户服务；协调厂家资源，解决客户实际问题。

如上图，研究者在胶体纳米颗粒上共价连接了识别大多数乳腺癌细胞都表达的HER2蛋白抗体以及能与APC（抗原提呈细胞）表面LRP1蛋白相互识别的钙网蛋白（CRT），构建了名为mBiNE的“纳米药物”-HER2抗体用于识别乳腺癌细胞，钙网蛋白用于“召唤”APC，给予mBiNE后，流式检测发现所设计的纳米药物能把APC特异性的“召唤”到HER2高表达的细胞并吞噬（如下图）。更进一步经APC“处理”后（固有免疫），纳米药物启动了细胞免疫（获得性免疫），对T细胞产生了激活作用：a significant shift from naive to memory CD8 T cells, but not CD4 T cells, with a predominantly central memory (TCM) phenotype.（如下图）HER2high: E0771/E2 breast-carcinoma cells, HER2neg: E0771 breast-carcinoma cells H Yuan, W Jiang, CA von Roemeling, Y Qie, X Liu, et al. Multivalent bi-specific nanobioconjugate engager for targeted cancer immunotherapy[J]. Nature Nanotechnology, 2017. 想了解更多CNS级期刊最新内容，请关注我们的公众号，常有更新哦，也可加笔者微信交流：qianle522568！

    2017年5月12日，北京德泉兴业商贸有限公司市场部、产品部走进华大基因，应邀成功开展了RAININ移液器产品研讨会，就RAININ移液器的型号、特点及应用展开了交流，为双方未来的合作提供了可靠的保障。    本次RAININ移液器产品研讨会由华大基因产品部王经理主持开展，由北京德泉兴业商贸有限公司产品部付经理针对RAININ移液器产品线作了精彩的报告。双方就移液器的选型、优势、应用等展开探讨，取得了较好的反响。    参加此次研讨会的华大基因的北区产品经理、销售经理在提问环节针对RAININ移液器的技术特点及应用领域进行了认真而热烈的讨论，希望我们的分享对与会人员日后的工作有所帮助，在此也特别感谢华大基因对北京德泉兴业商贸有限公司的支持。

    为了更好的服务广大客户，德泉市场部匹配客户需求，有针对性的开展着形式多样的市场活动，Demo计划、College Show、Seminar计划，总有一款适合你！        占据化学半壁江山的有机实验室中，“过柱子”伴随着研究生的每一天，少则一个小时，多则一整天，学生们早已习惯将一半的精力和时间耗费到这项工作上面。    今天我们要为时间代言，节省时间我们是认真的。在持续两周的时间内，我们在北京工业大学环能院，中国人民大学理学院进行了Biotage Demo计划，我们利用仪器的梯度功能，选择合适的流速，达到了预期的效果——高效自动分离。    解决客户仪器问题，德泉售后部整装待命；讲解仪器使用常识，德泉销售部随时出发。一切只为能将最优质、最贴心的服务送到客户身边！解决客户问题，带去全方位的实验室解决方案。             Western Blotting是蛋白质研究的最基本手段之一，近年来，对Western blotting实验结果的定量要求越来越高，如何获得一个准确定量的Western blotting结果，不同Western blotting成像方式的选择，归一化方式对定量分析的影响，图像分析方法的选择，都对最终结果产生至关重要的影响。德泉市场部联合GE厂家高级工程师，为客户量身定制定量 Western blotting解决方案    如果您的实验室还在为仪器的使用问题而苦恼，还在为维修问题而发愁，还在因为仪器的应用而耽误您的实验进程，那么请拿起电话，拨打这个号码：010-63836980，下一站也许就是您的实验室。        北京德泉致力于为客户提供高质量、高品质的技术与服务，打造全面实验室解决方案，至臻技术，无忧服务，只为让您无忧~无虑。 北京德泉兴业商贸有限公司      市场部 

            今天，我们很高兴和GE公司一道邀请超高分辨活细胞成像领域的专家，也是GE 细胞成像亚洲区经理Peter Franklin 博士在中国农业大学进行了题为《超高分辨率活细胞显微成像技术与应用》的讲座。随着生命科学研究以及科技领域的飞速发展，研究人员对于成像技术的要求也越来越高。人们不再满足于普通光学显微镜及共聚焦带来的图片，逐渐更加关注动态的生命活动过程的动态影像，一切观察变得更加真实，让人们惊叹于生命的奇妙。Franklin 博士首先为大家介绍了几种现今已经商业化的各种成像技术，让大家对于各种成像技术的优劣有了基本的了解。随后，着重讲了当今最实用和最高清的3D-SIM技术并展示了当今成像领域最新的、令人惊叹的影像，令在现场的小G大呼过瘾。现场问答环节，各位老师和同学和Peter积极交流了自己在样品准备，和其他细胞成像技术中遇到的各种问题，Peter本人也根据自己丰富的经验对问题进行了耐心的解答。 本次讲座不仅丰富了同学们的视野，更激起了同学们对于生命科学探索的兴趣，这也让我们本次活动显得格外有意义。    下面小G就给大家展示一些图片，这些图片全部由DeltaVision™ 系列活细胞工作站为您呈现。       DeltaVision™ OMX SR 是GE成像产品的最新杰作。稳定的性能、超高分辨的影像以及易用的操作，在用户中备受好评。作为配备最新成像技术的旗舰产品，DeltaVision™ OMX SR定会让您的生命影像学研究如虎添翼。       德泉始终在乎关于您实验的一切，坚持以解决用户需求为中心，提供完整解决方案为方法，为您提供最佳的服务。如果您有关于实验技术的需求和讲座，请联系我们的销售代表和产品经理。品牌简介     我们的DeltaVision™产品提供高端显微镜成像解决方案以帮助科学家解决疾病相关的问题，摆脱传统方法的束缚，进行细胞和亚细胞分析。DeltaVision™高分辨和超高分辨率成像系统，之前属于Applied Precision公司，现在是GE医疗的一部分。DeltaVision™ Elite成像系统      DeltaVision™ Elite 是一款整合的高分辨率荧光显微镜平台，优化用于活细胞的低光照成像以及一般荧光成像应用。DeltaVision™ Elite包含光学系统的多重改进，结合先进自动化，使得整个系统在多方面适合活样本成像。系统支持各种复杂成像模式，DeltaVision™ Elite是具有多种荧光成像需求的实验室的理想平台。DeltaVision™ OMX SR成像系统       DeltaVision™ OMX SR 是代表了最新一代光学显微镜技术的高级多模超高分辨率系统。DeltaVision™ OMX系统提供2D和3D结构照明（SIM）技术以及单分子定位显微镜以及快速宽场采集高分辨率成像模式。创新的Blaze SIM模块实现了高速SIM成像，使活细胞超高分辨率成像成为现实。此外，DeltaVision™ OMX系统支持创新的Ring-TIRF系统使得TIRF模式下也能实现的大面积均匀照明视野，用于多种应用，比如单分子追踪和单分子定位超高分辨率成像。北京德泉兴业商贸有限公司为GE healthcare北京及山东科学仪器独家授权。现已提供全线产品支持，欢迎来函及致电：

讲座主题：流式细胞仪的原理及应用讲座主讲人：于博士时间：2017年5月10日地点：山西医科大学主要内容：1.流式细胞仪组成及原理                  2.流式细胞仪典型应用            （周期、凋亡、干细胞、CBA、免疫功能分析及多色流式的前沿应用）           3.流式实验中一些关键点解析感谢同仁们的大力支持和信赖,感谢贝克曼厂家的支持。德泉力求打造无忧服务及全面的解决方案。

Hi~我又来啦！    相信大多数做蛋白质纯化的同学都离不开这两个词：克隆&抗体。今天，小G就给大家讲一下单克隆抗体和多克隆抗体之间的你长我短。    众所周知，单克隆抗体和多克隆抗体可以用于包括蛋白质印迹，酶联免疫吸附测定（ELISA），免疫沉淀（IP），免疫荧光，免疫细胞化学，生物芯片技术和疾病诊断在内的多种应用。它们各有各自的优点使其在不同应用中扮演着不一样的角色。为了更好地确定在特定应用中那种抗体最优，首先让我们先来了解下两者。[单克隆抗体]    单克隆抗体（mAb）指可以识别抗原内单个表位的抗体群体。由于mAb由免疫小鼠的脾或淋巴结中的单个B细胞产生，所以得到的抗体全部相同。除此之外，它们还可识别出特定抗原的相同表位。然而，虽然B细胞可以用于收获这类抗体，但是这些细胞的寿命有限，所以最终会停止产生抗体。为了克服这个限制，特异性产生抗体的B细胞与骨髓瘤细胞融合以产生能够提供持续高度特异性单克隆抗体的恒定供应的永生化B细胞-骨髓瘤杂交瘤应运而生。    单克隆抗体也可以针对许多靶标，鉴定特异性抗体特征（敏感性要求和交叉反应水平），并筛选单克隆抗体以鉴定表现出所需特征的任何细胞系。    单克隆也可以产生与一组分子交叉反应。在参与试验的患者中，在有多种可能的待测药物组合的情况下，这可能是非常有用的。    Monoclonals通常是老鼠或小鼠单克隆抗体，但它们也可以从各种物种（如兔和山羊）产生。mAbs的优点一、不朽的供应。一旦创建了单克隆抗体杂交瘤，就可以产生无限量的高度特异性抗体。二、高度特异。mAb在测定中用作一级抗体或用于检测组织中的抗原是非常理想的选择。三、重现性高。单克隆抗体产生较低背景染色和批次变化，并且具有低交叉反应性。因此，它们提供可重复的结果并确保亲和纯化的效率。 [多克隆抗体]    多克隆抗体（pAb）指已经被免疫动物（山羊，绵羊或兔）的免疫应答激活的多个B细胞克隆收集的抗体群体。与单克隆抗体不同，多克隆抗体识别抗原上的多个表位，并且所获得的血清含有许多不同亲和力的抗体。    通常在注射特定抗原以引发初次免疫应答后，还会给动物进行二次和三次免疫以产生针对特定免疫抗原的较高滴度的抗体。之后收集含有抗体的血清，并进行亲和纯化，以富集针对抗原产生的抗体。该方法的最终目的是产生针对感兴趣的抗原的高滴度，高亲和力多克隆抗体。pAbs的优点大多数研究人员喜欢多克隆抗体的原因有很多。一、高亲和力。由于抗体的结合点多于一个表位，多克隆抗体可以帮助扩增具有低表达水平的靶蛋白的信号。这使得这些抗体成为免疫沉淀和染色质免疫沉淀的理想选择。二、容忍轻微的变化。多克隆相对单克隆抗体来说，对于抗原变化（轻度变性，多态性，糖基化的异质性）较不敏感。三、更强的检测信号。多个表位通常提供更强大的信号，更加容易检测。此外，大多数实验室更喜欢多克隆抗体，因为它们不需要任何高度专业的培训或先进技术，并且生产相对快捷和便宜。[Which one is better？]   从产生方式来看。多克隆抗体是能够鉴定特定抗原的许多不同表位的抗体组，所产生的抗体来源于B细胞的选择，每个B细胞识别一个特定的表位。单克隆抗体有一个单一来源。多克隆抗体易于储存，更快地与所述抗原结合，并在鉴定和处理特异性表位时提供更强有力的保护。But…….多克隆抗体是否和单克隆抗体同样有效？    多克隆抗体在某些情况下能够比单克隆抗体表现更好。因为它们具有连接到多种抗原的能力，所以它们能够扩展由目标产生的信号，即使它仅有非常低的强度。如当处理染色质免疫沉淀时，多克隆抗体是最有效的方法，因为它们具有更广泛的目标区域，并且在涉及某些类型的蛋白质的表达时可以获得最低的共振。另外多克隆抗体的主要优点之一是高度耐受许多变化，而这一点恰恰是单克隆抗体会产生的问题。它们比其他类型的抗体更坚强，可以承受更多的抗原中断或改变以及更恶劣的条件和更多样化的环境。其次，它是非常便宜和易于构建，使用它们的研究人员不需要进行任何类型的深度培训，也不需要高级技巧来操作和执行。多克隆抗体的缺点是什么？    单克隆抗体可以无限期地产生和收获，区别于只能在短时间内获得有限收获的多克隆抗体。多克隆抗体还需要许多多种动物来生产同一种抗体。而这些抗体不能连续地从相同的来源获得，这意味着它们可能存在差异性。所以当对测试动物进行研究时，需要不同组别，以保证多克隆抗体尽可能准确。    所以，多克隆抗体不能取代由单克隆抗体产生的结果。 毕竟单克隆抗体会产生低染色效果和极小的差异。另一方面，因为多克隆识别抗原的几个表位，所以当靶标是单一抗原时，它们不是理想的。【总结】    虽然多克隆和单克隆抗体在研究实验室中占有一席之地，但大多数研究人员只会因为具有成本效益且非常易于使用而直接选择多克隆，因为不需要技术上的重新学习，就可以生产。检测大量抗原的能力使其易用于多种测试。另外，耐受抗原变化的能力也让其成为比单克隆抗体更好的选择，毕竟像多态性和变性这样的变化可能会对某些测试的结果产生巨大的影响，而多克隆抗体可以抵抗这些变化，并允许测试产生更准确和简明的结果。另外，研究人员能够在预算紧张的情况下进行所需的测试。    好了，我们下期再见。Bye！品牌简介    ?KTA™在瑞典语里是真实或纯正的意思，是GE Healthcare 层析系统的品牌，全球超过 100,000 科学家选用该系统在蛋白分离和纯化领域取得突破和进展。这个高贵的血统正飞速进入新一代：?KTA™ avant与?KTA™ pure。自1996引入以来，?KTA™对全世界科学家意味着卓越的纯化性能。    几乎可以纯化任何生物分子，使?KTA™蛋白纯化系统可以应对最简单和最艰难的挑战。?KTA™平台涵盖了从科研实验室到工艺开发再到大规模生产所有层析和切向流过滤技术。    ?KTA™系统由智能可扩展的UNICORN软件操作，使您更容易控制纯化工艺的每个阶段。    广泛的预装层析柱、层析介质、切向流过滤、?KTA™系统和UNICORN软件一起提供完整的解决方案，获得更好的结果。北京德泉兴业商贸有限公司为GE healthcare北京及山东科学仪器独家授权。现已提供全线产品支持，欢迎来函及致电：

如上图，本文工作内容是弄清楚了磺胺类抗肿瘤药物indisulam的作用机制：通过把RBM39(RNA binding motif protein 39)召集到泛素连接酶E3，诱导RBM39泛素化从而下调胞内RBM39，引起RNA切割紊乱杀死癌细胞。如何做的呢？如下图：文章作者利用CRISPR/Cas9技术在RBM39上fusion了GFP，这样就能通过流式简便、快速的实现对胞内RBM39水平进行监测。小分子药物indisulam是介导RBM39泛素化的桥梁，中间还需要其他蛋白的参与，文章作者再次巧妙的利用了CRISPR/Cas9技术去逐个“敲掉”可能参与这个过程的蛋白质之后用流式检测胞内RBM39水平，最终解析出上图中的DCAF15及DDB1参与了小分子药物indisulam介导的RBM39泛素化！Han T, Goralski M, Gaskill N, et al. Anticancer sulfonamides target splicing by inducing RBM39 degradation via recruitment to DCAF15[J]. Science, 2017. 想了解更多CNS级期刊最新内容，请关注我们的公众号，常有更新哦，也可加笔者微信交流：qianle522568！

    为了更好地服务用户，我们邀请您参与我们一项关于Western Blot 实验技术的调查。本问卷包含10道题目，大概占用您3分钟时间。【本期奖品】我们将在端午节从所有信息填写正确的参与者当中抽取两位粉丝。一位送出Lock &Lock保温杯一个，另一位可以获得德泉书写套装一套。再次感谢您的参与。北京德泉兴业商贸有限公司为GE healthcare北京及山东科学仪器独家授权。现已提供全线产品支持，欢迎来函及致电：

    细胞是一台精密的分子机器，凋亡过程实际一系列“分子齿轮”转动、传递的过程（如上图）。这次分享的是一篇17年1月的nature chemistry：按上图“所骥”，这篇文章做了在bcl-2家族“齿轮”转动之后线粒体膜电位的变化 - jc-1，线粒体膜通透性的改变 - 细胞色素c的释放，细胞色素c与其他分子组成凋亡体apaf1后激活caspase-3，以及接下来parp的cleaved，最后做了我们最熟悉的双染！nathalie busschaert, seong-hyun park, kyung-hwa baek, et al. a synthetic ion transporter that disrupts autophagy and induces apoptosis by perturbing cellular chloride concentrations [j]. nature chemistry, 2017. 想了解更多cns级期刊最新内容，请关注我们的公众号，常有更新哦！

不知道大家听说没有？台风来啦！             不过这个台风不是自然灾害而是全新发布的近红外激光成像仪！        2017年4月17日，Amersham Typhoon Nir 近红外激光成像仪在位于上海张江的GE中国科技园区全球首发，小G也在现场亲眼见证了这一激动人心的时刻。              Typhoon系列产品已有20余年的荧光成像历史，在专利荧光差异双向电泳dige检测中发挥了超强的成像检测能力，使我们能够精确定量1.1倍的差异蛋白。现在我们将其出色的荧光成像效果应用到western blotting检测中来，帮助大家获得微弱信号条带，精确定量western结果。             对于Amersham Typhoon Nir 有没有很好奇？别急...小G这就带你领略新Typhoon的魅力。       下面这款产品就是我们全新发布的Amersham Typhoon Nir 啦，超高颜值让你瞬间爱上成像实验。不仅如此，里面蕴含的高科技更是没有任何厂家可以比拟的哦。智信结果，定量精准1、共聚焦光路系统沿袭经典Typhoon共聚焦光路系统，保证检测器只接收样品的信号，而避免样品周围背景的干扰，获得图像更清晰，定量准确。2、近红外波段检测Amersham Typhoon Nir 首次选用685nm、785nm激光进行近红外波段检测，有效屏蔽印迹膜自发荧光的干扰，轻松获得背景干净的高质量图片。3、双通道成像可在同一张膜上同时成像内参蛋白和目的蛋白，进行内参蛋白归一化，使western定量更准确。双通道成像还非常适合检测蛋白磷酸化水平。4、逐点扫描模式保证整个样品上的每个位置都接收到完全一致的激发光能量，使得定量更准确。慧眼识真，高精灵敏1、激光扫描模式Amersham Typhoon Nir 采用激光光源，发出的激发光单色性好，能量高，保证了荧光检测的灵敏度。2、新一代增强检测器Amersham Typhoon 采用了新一代增强光电倍增管(pmt)作为信号检测器，增强了近红外波段的检测灵敏度，pmt强大的信号放大能力，确保微弱信号可以检测。高通量，高分辨率1、高通量Amersham Typhoon Nir 成像面积达40x46cm，可同时对20块大小为10x8cm的凝胶或蛋白转印膜进行成像，样品间可比性高，减少了工作量和等待时间。2、高分辨率Amersham Typhoon像素分辨率高达10 μm，提供高质量清晰图像，1000μm快速预成像功能可提供快速的样品预览。     除了这些特点外，Amersham Typhoon Nir 亦可升级成5激光，并有9种滤光片可供选择，除了荧光western blotting 检测外，还可应用于dna指纹技术、基因定为、克隆子测序前检测、多重pcr检测、emsa、click chemistry、转基因植物筛选、蛋白芯片、同位素检测、药物代谢分析等。    最近我们也会在《g课堂》中为大家详细介绍荧光westernblot和普通化学发光 westernblot的区别，请大家继续关注我们。    下期我们将为大家带来有关蛋白质纯化有关的技术内容，谈一谈洗涤剂胶束水平的重要性。      好了，我们下期再见。bye！Amersham™品牌简介20世纪40年代，Amersham（安马西亚,GE医疗生命科学的前身）开创了放射性同位素示踪剂产品，促进分子生物学的重大进展，最终创造分子生物学史上的里程碑，如dna测序。接下来的几十年间，Amersham继续为科学与医学做出重要贡献，如推出世界上第一款测量糖尿病患者的胰岛素水平的放射免疫分析试剂盒。Amersham创新传统为非放射性标记的发展做出重要贡献。1990年，Amersham ecl试剂成为第一个用于western blotting的化学发光底物，成为“化学发光”的代名词，至今文献引用排名第一。GE医疗生命科学提供广泛的Amersham化学发光、化学荧光与荧光检测的成像产品组合，成为业界的高质量和高可靠性的不二选择。北京德泉兴业商贸有限公司为GE Healthcare北京及山东科学仪器独家授权。现已提供全线产品支持，欢迎来函及致电：

   IKA的实验室技术事业部为众多研发应用提供一系列创新型设备。IKA 旋转蒸发仪设定了产品使用安全性，高效性以及易用性的新标准，对于有着严苛应用要求的用户它们提供的是卓越的蒸馏解决方案。    IKA RV 10系列旋转蒸发仪采用马达自动升降方式，拥有安全停止功能。它们完善的安全功能还体现在于间歇运行功能，马达平稳启动，升降终点识别功能，定时功能，以及意外断电时的安全提升功能。RV 10 数显型是IKA RV 10系列旋转蒸发仪不断自我升级的代表，仪器配置了新的通用型加热锅，竖直冷凝玻璃组件，最先进的安全功能以及数字连接功能。RV 10数显型将是您强劲可靠的实验伙伴。    旋蒸的原理：通过电子控制，使烧瓶在最适合速度下，恒速旋转以增大蒸发面积。通过真空泵使蒸发烧瓶处于负压状态。蒸发烧瓶在旋转同时置于水浴锅中恒温加热，瓶内溶液在负压下在旋转烧瓶内进行加热扩散蒸发。旋转蒸发器系统可以密封减压至 400～600毫米汞柱；用加热浴加热蒸馏瓶中的溶剂，加热温度可接近该溶剂的沸点；同时还可进行旋转，速度为50～160转/分，使溶剂形成薄膜，增大蒸发面积。此外，在高效冷却器作用下，可将热蒸气迅速液化，加快蒸发速率。   VACUUBRAND在真空泵制造领域具有超过50年的历史，从一开始，我们就有一个优势：为实验室用户提供符合最高质量标准的实验设备。我们所有产品设计都是专注于实验室客户的需求，加上全线模块化真空系统的理念，使得VACUUBRAND成为实验室领域真空技术的领导品牌。    VACUUBRAND的化学真空泵具有优异的耐化学腐蚀设计，这是由于它采用了很多氟化物材料，不仅对进气口到出气口的化学腐蚀性气体有很好的耐受性，而且对冷凝液有很好的耐受性。PC 3001 VARIO非常适用于高沸点溶剂的应用。通过精确且持续地调节隔膜泵的马达转速来自动调节最佳真空条件。进气口的收集瓶为玻璃材质，外覆保护膜，防止颗粒或者小液滴进入泵内。出气口的废气冷凝器效率高，结构紧凑，可实现近100%的溶剂回收效果。RV10digital与PC3001VARIO是一种最完美的搭配！

      上图引自一篇3月份上线的science，文章解析了Notch1受体与其配体结合的晶体复合物，同时利用多种技术手段评价了受体、配体互作细节，其中用流式细胞仪检测配体Jag1（Figure 1）、受体Notch1（Figure 2）上分别哪些位点影响两者亲和力！[1] Luca V C, Kim B C, Ge C, et al. Notch-Jagged complex structure implicates a catch bond in tuning ligand sensitivity[J]. Science, 2017.       想了解更多CNS级期刊最新内容，请关注我们的公众号，常有更新哦！北京德泉致力于为客户提供高质量、高品质的技术与服务，打造全面实验室解决方案，至臻技术，无忧服务，只为让您无忧~无虑。    

十里春风不如你，三里桃花不及卿。为了能将最优质的仪器、最贴心的服务送到客户身边，德泉市场部在行动。无惧路途遥远（奔袭30公里），无畏倒春严寒（口口白色呵气），德泉College Show  IKA校园行——北理工专场如期开始！解决客户仪器问题，德泉售后部整装待命；讲解仪器使用常识，德泉销售部随时出发。一切只为能将最优质、最贴心的服务送到客户身边！解决客户问题，带去全方位的实验室解决方案。       如果您的实验室还在为仪器的使用问题而苦恼，还在为维修问题而发愁，还在因为仪器的应用而耽误您的实验进程，那么请拿起电话，拨打这个号码：13810273162，下一站也许就是您的实验室。      北京德泉致力于为客户提供高质量、高品质的技术与服务，打造全面实验室解决方案，至臻技术，无忧服务，只为让您无忧~无虑。 北京德泉兴业商贸有限公司          市场部          郑蕾：13501137957  王志明：13810273162  欢迎您的来电！ 

玉兰花开，初春乍来。为了贯彻德泉无忧服务的宗旨，给客户提供高品质的服务，保障客户的实验进程，德泉市场部一直在待命！     中国科学院大学：我们走进材料学院、资环学院、生科学院，切实了解客户需求、提供全方位的解决方案，无忧服务我们是认真的！           北京林业大学：经过与林木育种国家工程实验室龙老师深入沟通，切实了解老师实验室仪器使用情况，针对老师的特定问题，预约了相应维修工程师（石工、史工），为老师的实验保驾护航。     北京大学医学部：同样的目标，同样的行动，满足客户的不同需求，解决客户的不同问题。        首都医科大学：了解到客户在使用Merck millipore纯水机的问题后，市场部预约专业的纯水售后维修工程师罗工，走进客户实验室，解决纯水机使用问题，提供仪器维护手册，保障客户实验进程。   如果您的实验室还在为仪器的使用问题而苦恼，还在为维修问题而发愁，还在因为仪器的应用而耽误您的实验进程，那么请拿起手机，德泉市场部等候您的电话。德泉市场部持续奔袭中，下一站也许就是您的实验室。   北京德泉致力于为客户提供高质量、高品质的技术与服务，打造全面实验室解决方案，至臻技术，无忧服务，只为让您无忧~无虑。 北京德泉兴业商贸有限公司          市场部          郑蕾：13501137957  王志明：13810273162  欢迎您的来电！ 

微波合成仪是应用先进的微波技术作为物理催化手段的新型化学反应装置，能催化完成加成、取代、酯化、水解、烷（酰）基化、聚合、环合和氧化等许多类型的有机、药物和生物化学反应。为什么我们要使用微波合成仪替代传统的反应方式呢？——更短的反应时间，更高的反应产率。微波合成仪利用微波对反应容器进行加热，加热速度更快，更均匀，这样就有效的减少了反应过程中副反应的发生，提高了反应的产率。微波合成仪除了提供热效应外，还有普通加热装置不能提供的非热效应，主要包括以下两方面：一是微波提供足够的能量使电子跃迁，增大分子的能量；二是微波影响原子间电子云密度，从而使带正电的原子核相互排斥，使键长增长，键能下降，最终使反应速度加快。     加快合成反应进程是化学家一直追求的，却并不容易实现。对于希望尽快研发出新化合物的化学家来说，Biotage微波化学合成仪是最佳选择。Biotage旗下Initiator微波合成仪至今已发展到第四代产品，在智能、集成、轻便、安全以及外观方面都做到了精益求精的地步。Initiator微波合成仪全系产品反应温度均可达300℃，实验操作压力可达30bar，升温速度2-5℃/s反应瓶实际反应体积0.2-20ml，合成量从mg级到g级，每一款微波合成仪均设计有三重安全防护，确保操作者的安全，可实时远程监控功率、温度、压力等实验条件，并可根据需要配备8位或者60位全自动进样机械臂。    8位全自动进样微波合成仪            60位全自动进样微波合成仪下面将列举一种利用Biotage微波合成仪进行的常见的有机合成反应：醛氧化反应生成醇反应温度130℃，反应时间7min，反应产物用二氯甲烷冲洗，洗脱液经过减压浓缩干燥，去掉溶剂，得到的样品经过HPLC-MS和1H NMR方法分析，合成物的产率为95%，纯度为 97%，无论是反应的时间，反应产率以及产物的纯度都远远优于普通的加热合成法。