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当前位置： 广州竞赢 > 解决方案 > 用振动切片机切出高存活率的活体肺组织切片

用振动切片机切出高存活率的活体肺组织切片

2024/09/06 17:16

阅读：2

分享：
应用领域：
医疗/卫生
发布时间：
2024/09/06
检测样品：
其他
检测项目：
生化检验
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2次
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参考标准：
/

方案摘要：

用振动切片机切出高存活率的活体肺组织切片

产品配置单：

前处理设备

DTK-1000N振动切片机

型号： DTK-1000N

产地： 日本

品牌： DOSAKA

¥10万 - 30万

参考报价

联系电话

方案详情：

实验一：切新鲜的小鼠肺


实验样品：小鼠肺（无病变）
所用设备：DTK-1000N振动切片机
实验步骤
1、活杀一只老鼠，解剖后露出完整肺部；
2、从支气管处注入2%的生理盐水冲洗肺部，直到整个肺呈现出白色状态；
3、从支气管处开始，取下整个肺，在支气管口处注入低温琼脂，直至充满全肺，再用生物线扎紧支气管，防止琼脂漏出（如图1）；
image.png

*图1   充满琼脂的活体老鼠肺

4、将肺放在4度冰箱里保存12小时；
5、从冰箱取出肺，进行修块处理，修块的大小根据实验要求而定，一般为1 x 1cm左右；
6、将修好的肺组织粘在切片机的样品盘中，设置切片机振动频率为55Hz，进刀速度为20 mm/min，依次切出200μm和300μm的切片（如图2和图3）
image.png

*图2   200μm老鼠肺切片

 image.png

*图3   300μm老鼠肺切片

实验结果：切片非常完整，肺泡、纤维等组织完整呈现出来，没有裂纹，活性保存很好。
 

实验二：切纤维化的人肺

1、实验样品：纤维化的人肺（换肺病人的局部组织）
2、所用设备：DTK-1000N振动切片机
实验步骤
1、取样，取样时需要避开严重纤维化的肺组织；
2、样品取出后浸泡在培养液（主要成分为氨基酸）中；
3、取出样品置于包埋管中，在包埋管里注入低温琼脂，然后将包埋管放在冰浴中，使琼脂快速凝固（如图4）；
 image.png

*图4   充满琼脂的活体肺

4、修块，去掉多余的琼脂；
5、将修好的肺组织粘在切片机的样品盘中，设置切片机振动频率为50，进刀速度为20mm/min，依次切出200μm和300μm的切片（如图5和图6）
image.png

*图5   200μm肺切片

image.png

*图6   300μm肺切片

实验结果：切片非常完整，肺泡、纤维等组织完整呈现出来，没有裂纹，活性保存很好。
总结：
老鼠肺可以被完整取下，所以可以采用从支气管处注入琼脂的方式来固定，这种固定方式的好处是不会阻断空气中的氧气进入肺循环，从而极大的增加了肺细胞的活性。而对于人体肺，取样时不能取出整个肺，无法采用往肺内灌注琼脂的固定方式，只能采用包埋管包埋的外部固定。这要求实验员非常快速的完成整个实验操作过程，否则，如果让肺泡和氧气阻断时间久了，肺细胞将会失去活性。另外，选择性能优良的振动切片机，切片时设置合适的振动频率和进刀速度，也是确保高活性切片的极为重要的因素。

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