【飞诺美色谱】水中抗生素的测定

本实验采用固相萃取方法结合液相色谱-串联质谱的方法，建立了水中抗生素的检测方法。水中的抗生素经Cleanert LDC (PEP-2) 固相萃取柱净化，Venusil MP C18色谱柱 (2.1×150 mm ，5 μm ，100 Å) 分离，0.1%甲酸水溶液(V/V)和乙 腈为流动相进行梯度洗脱，外标法进行定量。结果表明，抗生素添加量为0.02 μg/L时，回收率在 60%~120%之间，能够满足检测要求。

产品信息

前处理产品

产品名称：CleanertLDC(PEP-2)

P/N: LPE000100

液相色谱产品

产品名称：Venusil MP C18

P/N: VA951502-0

前处理方法

样品提取 : 量取500 mL水样，加入0.25 g EDTA，用盐酸调节pH 为4.0，待净化。

样品净化 : 取Cleanert LDC (PEP-2)大体积水专用柱 (1 g/200mL, P/N: LPE000100)，依次用9 mL甲醇，5 mL水， 5 mL 0.1%甲酸水(V/V)溶液活化小柱；将上述待净化液以90 mL/min流速通过小柱，再用5 mL水淋洗小 柱，抽干15 min；最后用 20 mL 5%氨化甲醇(V/V)洗 脱，收集；45℃氮气吹干洗脱液，用1 mL 20%乙腈 水(V/V)溶解定容，取上层清液适量过0.22 μm针式过 滤器，供LC/MS/MS检测。

基质混合标准工作溶液配制 :

取高浓度农药混合标准溶液，用空白样品基质溶液稀 释成 0.01 µg/mL 的基质混合标准工作溶液。

色谱条件

色谱柱： Venusil MP C18

规格： 5 μm ，100 Å , 2.1× 150 mm

货号： VA951502-0

流动相：

A：0.1%甲酸水溶液(V/V)；

B：乙腈，使用前经微孔滤膜过滤；

流速： 0.3 mL/min

柱温： 30℃

进样量： 10 µL

梯度洗脱： 见表1、表2

质谱条件

正离子模式

离子源： 电喷雾离子源 (ESI+)

采集方式： 多反应监测(MRM)

喷雾针电压： 5500 V

离子源温度： 650℃

雾化气(GS1)： 55 psi

辅助加热气(GS2)： 50 psi

气帘气(CUR)： 20 psi

负离子模式

离子源： 电喷雾离子源 (ESI-)

采集方式： 多反应监测(MRM)

喷雾针电压： -3500 V

离子源温度： 600℃

雾化气(GS1)： 60 psi

辅助加热气(GS2)： 50 psi

气帘气(CUR)： 15 psi

实验结果

由表4可知，采用固相萃取结合高效液相串联质谱法检测抗生素加标回收率在60%~120%之间，变异系数值小于20%，能够满足检测要求。由图1、2、3、4、5、6、7、8 可看出经Cleanert LDC (PEP-2)固相萃取柱净化效果良好， 采用Venusil MP C18色谱柱检测得到的抗生素峰形良好，且保留时间稳定。

结论

本实验建立了水中抗生素的LC/MS/MS检测方法，并结合固相萃取技术对水中抗生素的 含量进行了测定。对于加标量为0.02 μg/L的样品进行了检测，回收率在60%~120% ， 符合要求，固相萃取方法稳定并且色谱柱重现性良好，说明本方法能够用于检测水中 抗生素的残留量。