【飞诺美色谱】生活饮用水中双酚 A 残留量的测定

双酚 A，是一种重要的有机化工原料， 在工业上被用来合成聚碳酸酯、环氧树 脂、酚醛树脂等高分子材料，并广泛应 用于制造塑料食品容器，如保鲜盒、婴 儿奶瓶和矿泉水瓶等。研究发现 BPA有类似雌激素的作用，即使很低的剂量 也有诱发儿童性早熟、导致内分泌失调 等危害[1]。由于双酚 A 的广泛应用，且 不易降解，近年来不断有地表水、地下 水甚至饮用水中检出双酚A报道，双酚 A 的水体污染已成为饮用水安全领域的 一个重要问题。我国生活饮用水卫生标准中规定双酚A卫生限值为 0.01 mg/ L[2]。在即将生效的 GB 5749-2022《生 活饮用水卫生标准》标准中，也明确将 双酚 A 作为饮用水安全的参考指标。本 文参照 GB/T 5750.8-2023《生活饮用水 标准检验方法》中生活饮用水中双酚 A 残留量测定的液质方法建立了一套完整 的大体积水样富集净化的前处理方案。

产品信息

前处理产品

产品名称：Cleanert PEP-2

P/N: PE2006-2

产品名称：SPE-M08正压装置

P/N: SPE-M08

液相色谱产品

产品名称：Kinetex EVO C18

P/N: 00D-4726-AN

前处理方法

活化 : PEP-2 固相萃取柱(200 mg/6 mL,P/N: PE2006-2)使用前依次用 5 mL 甲醇、10 mL水活化；

富集 : 取备用水样100 mL，加入50 μL浓度为100 μg/L 4-壬基酚-D5 内标工作液，混匀，内标物在水中浓度为0.050 μg/L，水样以约5 mL/min速度通过固相萃取柱。

干燥 : 用氮气吹 2 min，使固相萃取柱干燥；

洗脱 : 用 15 mL 甲醇分 3 次洗脱，洗脱液下降滴速控制在 1 滴/3 s 左右；

浓缩定容 : 洗脱液在 50。C 用氮气吹至近干，再用 50% 甲醇溶液定容至 1 mL。

色谱条件

色谱柱： Kinetex EVO C18

规格： 1.7 μm ，100 Å , 2.1× 100 mm 货号： 00D-4726-AN

流动相： A：0.01%氨水水溶液； B：甲醇；

流速： 0.3 mL/min

柱温： 40℃

进样量： 10 µL

梯度洗脱： 见右表

质谱条件

离子源类型： 电喷雾离子源 (ESI-)

扫描方式： 多反应监测负离子模式 (MRM)

喷雾针电压： -4500 V

离子源温度： 500˚C

雾化气(GS1)： 50 psi

辅助加热气(GS2)： 50 psi

气帘气(CUR)： 30 psi

碰撞气(CAD)： 8 psi

为获得较好的稳定和灵敏度，各化合物监测离子对的去簇电压(DP)和碰撞电压(CE)，目标化合物定量离子对以及内 标监测离子对等参数均经过系统优化，优化信息参见表1。

实验结果

线性范围

分别吸取BPA、BPB、BPF、4-OP、4-NP的标准工作溶液 适量，使用50%甲醇溶液稀释，配制成浓度为0.1μg/L、0.5 μg/L、1 μg/L、5 μg/L、10 μg/L、50 μg/L的标准混合溶液 系列，其中内标4-NP-D5浓度为5 μg/L的标准线性溶液，以 各物质峰面积与内标峰面积的比值为纵坐标，浓度为横坐标，绘制标准曲线(图1)。均得到线性良好R2≥0.999的线性 回归方程见表2。

方法精密度与准确度

根据《生活饮用水卫生标准》(GB 5749-2022) 中对双酚A 的限量要求不得超过0.01 mg/L，本实验分别选择为 0.5、5、50 μg/L 三个梯度进行加标测定，每组添加浓度平行测定6次，计算回收率与精密度结果，由表5可得，双酚A各化合物添加浓度的回收率均在85%~120%之内，相对标准偏 差RSD小于10%；同位素内标4-NP-D5 回收稳定；本实验色 谱图见图3、4。

讨论

本方法中双酚A、双酚B、双酚F三个化合物直接采用外标法定量回收稳定性良好，满足方法学要求。 4-壬基酚、4-辛基酚考虑其化学结构存在较长直碳链结构，过柱富集时与 PEP-2结合紧密，在洗脱时存在一定损失，需要增加洗脱体积降低洗脱流速，以4-NP-D5为内标进行校正定量。

另外，双酚类化合物为合成碳酸酯塑料的原材料，实验过程中应避免污染引入，每批样品分析过程应包括试剂空 白、过程空白等质控。本实验试剂空白、过程空白均未检出(见图2)，耗材试剂符合要求无本底带入。

结论

本文重现了GB/T 5750.8 74.1生活饮用水中双酚A残留量液质色谱法的测定。使用MULTI-SPE M08大体积上样固相萃取装置搭配Cleanert PEP-2固相萃取小柱对水样进行净化和富集，液相色谱串联质谱同位素内标法检测。实验中线性良好R2≥0.999，平行性稳定，最低检出限浓度分别为：双酚A、双酚F、4-壬基酚，0.005 μg/L；双酚B、4-辛基酚，0.001 μg/L。各化合物三水平添加回收率在 85%~120%之间，RSD值均小于10%，能够满足标准检测方法要求。

参考文献

【1】谭松 . 双酚A与挤奶机安全性的讨论[C]，首届中国奶业大会论文集 (上册) ，2014 :392-395.

【2】中华人民共和国卫生部 . 生活饮用水卫生标准[S] . 北京: 中国标准出版社, 2006.