【飞诺美色谱】某磷酸酯类样品制备案例

某磷酸酯类样品制备案例

PP10039

应用及技术服务部

摘要：本实验采用Cheetah® HP-100高压制备仪器和Cheetah® MP-200中压制备仪器结合紫外检测

器的方法，分别选择MP C18（10 μm，100 Å，10 × 250 mm）填料和AQ C18 (20-35um，100 Å，

12g）对某磷酸酯类样品进行了纯化。结果表明：磷酸酯样品在紫外波长235 nm 下，流动相为去离

子水和乙腈，水相添加80mM 碳酸氢铵，进行洗脱，能够有效分离，且峰性良好。

关键词：Cheetah® HP-100；Cheetah® MP-200；碳酸氢铵；某磷酸酯样品；MP C18

前言

某些盐类样品，分析条件下保留及分离良好，但放大到制备条件后就不保留，这是

个比较普遍的问题。如本实验中环糊精类羧酸钠盐样品，极性较强，在十八烷基键合

硅胶制备柱上没有保留，通过酸处理后，使其脱离盐的形式，后保留及分离良好。

实验部分

仪器、试剂与材料

主要仪器设备

Cheetah® HP-100 和Cheetah® MP-200 制备液相

试剂材料

去离子水、乙腈和碳酸氢铵为色谱纯；

高效液相色谱柱：Venusil MP C18 10 μm，100 Å，10 × 250 mm

某磷酸酯样品：客户提供

样品前处理

称取50 mg 样品，加2 mL（1%TFA）水溶解，0.22 um 尼龙滤膜过滤。

制备条件1

色谱柱：Venusil MP C18 10 μm，100 Å，10 × 250 mm；

流动相：去离子水（80mM 碳酸氢铵）

检测器：235 nm

流速：4 mL/min

进样量：20 mg

等度：

制备条件2

色谱柱：AQ C18 20-35 μm，100 Å，12g Flash 柱2 支串联；

流动相：去离子水（80mM 碳酸氢铵）

检测器：235 nm

流速：8 mL/min

进样量：20 mg

等度：

检测条件

色谱柱：Innoval ODS-2 10 μm，100 Å，4.6 × 250 mm；

流动相：A：去离子水（80mM 碳酸氢铵） B：乙腈；

检测器：235 nm

流速：1 mL/min

柱温：25℃

进样量：20 μL

等度：

结果与讨论

本实验分别采用MP C18（10 μm，100 Å，10 × 250 mm）填料和AQ C18 (20-35um，

100 Å，12g）对某磷酸酯样品进行了制备，由表2、表3、及图1、图2 可知，流动相

为去离子水（含80mM 碳酸氢铵），进行等度洗脱时，样品通过制备，峰形良好，所

得产物纯度满足客户需求。

结论

本实验中某磷酸酯样品，极性较强，在十八烷基键合硅胶制备柱上保留很弱，选

用亲水的AQ C18，流动相采用纯水相则有保留且分离良好。

本实验采用MP C18 (10 μm，100 Å，10 × 250 mm)色谱柱和AQ C18(20-35um，

100 Å，12g）对某磷酸酯样品进行了纯化。结果表明亲水AQ C18 填料对该样品分离

效果良好，所得产物纯度能够满足客户要求。