【飞诺美色谱】食品中苏丹红染料的检测 Cleanert® Sudan 专用柱，升级方法

GB/T 19681-2005《食品中苏丹红染料的检测方法 高效液相色谱法》中采用正己烷作为萃取溶剂，用氧化铝固相

萃取柱净化样品。该方法样品处理过程复杂，且氧化铝的活性不易控制，回收率难以得到保证。

本实验利用装填具有芳香性功能基团的聚合物材料的Cleanert® Sudan 固相萃取柱萃取辣椒油、辣椒粉等食品中

4种苏丹红，用二氯甲烷洗脱，开发了一套食品中4种苏丹红检测的新方法，与国标方法相比，

可获得更稳定的回收率，溶剂用量更少更环保，方法也更简便。

1. 样品提取及净化

1.1 辣椒粉等粉状样品

称取0.5 g (准确至 0.001 g) 样品于三角瓶中，加入 5 mL正己烷，超声 10 min，过滤，

将滤液于 5000 r/min 下离心 5 min后取上清液 3 mL，待净化。

加标样品的处理：向 0.5 g (准确至 0.001 g) 辣椒粉中加入 2 mL 的 4 µg/mL 苏丹红混标以及 4 mL 正己烷，

然后按照上述方法进行预处理。

1.2 辣椒油等油状样品

称取 0.5 g (准确至 0.001 g) 样品于小烧杯中，加入 3 mL 正己烷溶解，涡旋1分钟混匀，待净化。

加标样品的处理：向 0.5 g (准确至 0.001 g)辣椒油样品中加入 1 mL 的 4 µg/mL 苏丹红混标，

然后按照上述方法进行处理。

1.3 火腿肠类样品

将火腿肠切成小丁，称取 3.0 g (准确至 0.001 g)，放入 10 mL 离心管中，加入 5 mL 正己烷，

超声 10 min，5000 r/min 离心 5 min 后取上清液 3 mL，待净化。

加标样品的处理：将火腿肠切成小丁，称取 3.0 g (准确至 0.001 g)，放入 10 mL 离心管中，

加入 2 mL 的 4 µg/mL 苏丹红混标以及 4 mL 正己烷，

然后按照上述方法进行处理。

1.4 火锅底料等酱类样品

称取火锅底料 1.0 g (准确至 0.001 g)，加入 1 mL 水，再加 5 mL 正己烷，涡旋 3 min，超声10 min，

接着以转速 6000 r/min 离心 5 min，取上层有机相 3 mL，加入无水硫酸钠 0.5 g，涡旋 0.5 min，

静置取上清液作为上样液。加标样品的处理：向 1.0 g (准确至 0.001 g)火锅底料中

加入 1 mL 水，再加 2 mL 的 4 µg/mL 苏丹红混标及 4 mL 正己烷，然后按照上述方法进行处理。

2. 净化方法

净化样品所用固相萃取柱为 Cleanert® Sudan 苏丹红专用柱 (500 mg/6 mL)

1. 活化：在 Cleanert® Sudan 苏丹红专用柱中依次加入 5 mL

二氯甲烷，5 mL 正己烷。

2. 萃取：将上述中的待净化液加入 Cleanert® Sudan 柱

中，再用 1 mL 正己烷洗涤样品瓶，一并加入 SPE 柱中，流

出液弃去。

3. 淋洗：待上样液完全流出后，用 3 mL 3% 异丙醇-正

己烷溶液淋洗，淋洗液弃去，开启真空泵，将小柱抽干。

4. 洗脱：3 mL 二氯甲烷洗脱，收集洗脱液。

5. 吹干与定容：将洗脱液于 50℃ 下氮气吹干，加入1 mL

乙腈溶解，使用 0.45 µm PTFE 有机滤膜过滤后，进行HPLC 分析。

3. 色谱条件

色谱柱：Venusil® MP C18

5 µm，100 Å，4.6 × 150 mm

流动相：乙腈：水=97：3(v/v)

流 速：1.0 mL/min

进样量：20 µL

柱 温：35℃

检测波长：520 nm

3. 色谱条件

色谱柱：Venusil® MP C18

5 µm，100 Å，4.6 × 150 mm

流动相：乙腈：水=97：3(v/v)

流 速：1.0 mL/min

进样量：20 µL

柱 温：35℃

检测波长：520 nm

4. 实验结果

液相色谱条件下，将浓度为 4 µg/mL 的标准溶液进行

HPLC 分析，得到4种苏丹红标准溶液色谱图如图1所示。

苏丹红Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ保留时间分别为：4.498 min、6.673 min、8.923 min、14.165 min。

经由上述样品处理方法处理的辣椒粉、辣椒油、火腿肠、火锅底料及其加标样品，经 HPLC 分析，

得到色谱图见图2~图9。

结论

Cleanert® Sudan 能很好去除油脂中的杂质，针对辣椒粉、辣椒油、火腿肠和火锅底料等四种不同的样品，

4种苏丹红的加标回收率都较理想。样品前处理的操作过程简单，所需耗材少，更经济、环保。

5. 订货信息