【飞诺美色谱】苯甲酸山梨酸糖精钠的测定（HPLC法）

苯甲酸、山梨酸和糖精钠是常用饮料及食品等的添加剂。食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠的测定方法有气相色谱法 (GC)、薄层色谱法 (TLC) 和高效液相色谱法(HPLC)。GC 法准确度不够，分离度不好；TLC 法操作复杂，仅可半定量分析； HPLC 法可同时测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠。具有方法简便，灵敏度高，选择性好，线性范围宽等优点。

1. 材料与样品处理

仪器 ：高效液相色谱仪 (配紫外检测器)。

试剂：

（1） 甲醇 (CH 3 OH) 色谱纯；

（2）乙酸铵 (NH 4 Ac) A.R.；

（3） 苯甲酸标准储备液 (1.0 mg/mL)；

（4）山梨酸标准储备液 (1.0 mg/mL)；

（5）糖精钠标准储备液 (1.0 mg/mL)；

（6）纯水 。

2. 色谱条件

色谱柱：Venusil ® XBP C18 L

4.6 mm × 250 mm，5 µm；

波 长：230 nm；

流动相：0.02 mol/L 乙酸铵:甲醇=95:5(v/v)；

流 速：1.0 mL/min；

进样量：20 µL；

柱 温：30℃。

在上述色谱条件下，注入 20 µL 苯甲酸、山梨酸和糖精钠标准混合液 (0.04、0.02、0.04 µg/µL)。色谱图见图1

3. 结果与讨论

3.1 标准曲线绘制

苯甲酸、山梨酸、糖精钠标准混合液的配制。吸取苯甲酸、山梨酸、糖精钠标准储备液，配制浓度分别为 0.01、0.02、0.04、0.06、0.08、0.10 µg/µL 的标准混合液。按上述色谱条件测定峰面积，并绘制校正曲线。见图2 ~ 4。由图可见，苯甲酸、山梨酸、糖精钠校正曲线的线性关系良好(相关系数均大于 0.99900)。

3.2 苯甲酸、山梨酸和糖精钠测定精密度试验

在上述色谱条件下，连续六次吸取苯甲酸、山梨酸和糖精钠标准混合液(浓度分别为 0.02、0.04、0.04 µg/µL) 20 µL注入色谱仪，分别绘制色谱图。见图5。

a) 保留时间测定精密度试验, 见表1。

由表 1 ~ 2 可见，苯甲酸、山梨酸和糖精钠保留时间相对标准偏差 (RSD) 范围为 0.39 ~ 0.74%；峰面积相对标准偏差 (RSD) 范围为 0.66 ~ 0.88%。表明仪器系统测定精密度良好。

3.3 内控样品测定

用可口可乐饮料作基质，配制含苯甲酸、山梨酸和糖精钠浓度分别为 0.04、0.02、0.04 µg/µL 的内控样品。按相关文献进行样品预处理。在同样条件下测定苯甲酸、山梨酸和糖精钠含量。结果分别为 0.0400、0.0198、0.0396 µg/µL。

3.4 结论

高效液相色谱仪及色谱柱 Venusil ® XBP C18-L (4.6 mm ×250 mm，5 µm)，测定食品中苯甲酸、山梨酸和糖精钠，具有灵敏度高、结果准确、精密度和线性关系良好、出峰时间快、峰形好、分离度好等特点。适用于饮料、食品等中苯甲酸、山梨酸和糖精钠含量的测定。

4. 订货信息