【飞诺美色谱】鸡蛋中三聚氰胺的检测 HPLC 法

1.三聚氰胺标准溶液配制
称取三聚氰胺标样 10.0 mg，加流动相溶解定容至 100 mL，即得浓度为 100 mg/L 的三聚氰胺标样溶液。将浓度为 100 mg/L 的三聚氰胺标准溶液分别用水稀释成浓度为 1 mg/ L、5 mg/L、10 mg/L、15 mg/L、20 mg/L 的标准品溶液，用 0.45 µm 滤膜过滤后进液相色谱检测。

2.样品提取
将鸡蛋打开搅匀，分别称取 1.00 g 鸡蛋样本置于 10 mL 具塞离心管中，分别加入 100 mg/L 三聚氰胺标样溶液 10 µL、20 µL、100 µL，分别得到添加浓度为 1.0 mg/kg、2.0 mg/kg、10.0 mg/kg 的样本。往装有上述样本的具塞离心管中分别加入10 mL 1%三氯乙酸溶液，2 mL 5% 醋酸铅溶液，摇匀，超声20 min，8000 rpm 离心 10 min，全部上清液转入固相萃取仪上样管中。
Cleanert® PCX 混合型阳离子交换固相萃取柱，标记序号依次放入Qdaura®卓睿全自动固相萃取仪中，上样管中放置对应样品，设定操作程序如下：3 mL 甲醇，3 mL 水依次活化，加样，3 mL 水，3 mL 甲醇淋洗，抽干，最后用 5 mL 5% 的氨化甲醇洗脱 (V/V)，接收洗脱液 (以上操作流速均为 1 mL/min)，取出收集管于 50℃ 氮气吹干，用 1 mL 流动相定容，0.45 µm 滤器过滤后进液相色谱检测。

3.色谱条件：
色谱柱：Venusil® ASB C8，4.6 × 250 mm，5 µm；
流动相：乙腈：10 mM/L 柠檬酸 + 10 mM/L 庚烷磺酸钠缓冲液 = 7：93 (pH=3.0)
波 长：240 nm； 流 速：1 mL/min；进 样：20 µL。

4.实验结果：

4.1峰型与分离度
分别移取浓度为 1.0 mg/L、5.0 mg/L 的三聚氰胺标准溶液，分别连续进样6次，结果如表1所示。
由表1结果可见，本方法具有很好的精密度和重现性。

4.2标准校正曲线
根据表2数据计算线性方程为：y = 87.43x - 13.67，R² = 0.999 ，相关曲线见图2。
结果显示，该方法在 1 ~ 20 mg/kg 范围内线性关系良好。
表 2 标准校正曲线实验数据

图 2 浓度与峰面积的回归曲线

结果显示，该方法在1~20 mg/kg范围内线性关系良好。

4.3添加回收率
由表3可见，本方法检测鸡蛋中三聚氰胺回收率较好
表 3 添加浓度与回收率数据

5.结论
通过上述实验可见， 运用本方法测定鸡蛋中三聚氰胺，基质净化效果好，杂质干扰小，色谱峰型良好对称度高，操作简单方便，和准确度高等优点，非常适用于鸡蛋中三聚氰胺的检测。

6.订货信息