用离子排斥色谱法实现了对果汁中的11种有机酸（草酸、柠檬酸、酒石 酸、苹果酸、抗坏血酸、乳酸、琥珀酸、甲酸、乙酸、富马酸）的分离测 定。以17mmol/L硫酸为淋洗液，样品在ICE-ION-300离子排斥柱上分离后，用 紫外检测器在210nm处测定其中的有机酸。各组分质量浓度测定的相对标准偏 差在1.5%～9.8%(n=10)。

利用离子色谱脉冲安培检测器对蜂蜜中的葡萄糖、果糖、蔗糖的测定方法进行了研究。采用CARBOPAC PA1分离柱和脉冲安培检测器，对淋洗分离条件进行了实验，选择50mmol/LNaOH作淋洗液，可使蜂蜜中的葡萄糖、果糖、蔗糖很好的分离。检出限分别为：葡萄糖2µg/kg，果糖2µg/kg，蔗糖5µg/kg。加标回收率为90％～108％。该方法只需简单的前处理，无基体干扰，分离效果好，测定准确度高，适用于蜂蜜中的葡萄糖、果糖、蔗糖的测定。

AN342 用加速溶剂萃取（ASE）技术对大体积的鱼肉样品进行PCBs的测定 PCBs： 多氯联苯 POPs： Priority Organic Pollutants 样品基体：鱼肉组织 仪器： Dionex ASE300 （带有100mL萃取池） Dionex 萃取采集瓶（250mL） HP6890 GC-ECD 试剂： 二氯甲烷（优级纯） Hydromatrix硅藻土 氧化铝（除去萃取液中共萃取的油脂物质） 萃取条件： 系统压力： 10Mpa（1500psi） 温度： 125℃ 加热时间： 5min 静态时间： 3min 溶剂： 二氯甲烷 冲洗体积： 60％ 吹扫时间： 120秒 静态循环次数：3次 总萃取时间：每个样品18min 溶剂总量： 每个样品120－140mL 样品制备： 称取30g鱼组织，标准加入50uL PCB同类标准溶液（正己烷中），分别含有50~250ug/mL PCB同类物质。最终样品浓度为80~400ng/g。样品与20g Hydromatrix硅藻土混合并研磨，然后装入已装有10g氧化铝的100mL萃取池中。

本文介绍了戴安公司的“只加水”（淋洗液自动发生）技术与AS15阴离子分析柱结合分析高纯水中的痕量阴离子和低分子量的有机酸，大体积直接进样，不需要预浓缩柱、加样泵等附加装置，获得非常好的检出限。具体方法请见附件。

摘 要:离子色谱已经成为无机阴离子和部分有机离子的最主要的分析方法，应用的范围也从常规无机阴、阳离子分析发展到对更复杂的有机化合物，并在食品、医药、生化、农业等领域得到广泛应用。本文着重介绍目前最新的离子色谱发展技术及其在最近在对食品、农药等方面进行分析应用的情况。 2.1 食品添加剂 2.1.1防腐剂: 采用离子色谱抑制电导检测分离苯甲酸和山梨酸，分离柱为两根Dionex HPLC-AG保护柱，1.5mmol/L Na2CO3为淋洗液，分离快速准确[12]。例如较常见的防腐剂苯甲酸以及尼泊金系列防腐剂，如对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸丁酯的测定，采用AG9HC分离柱，1mmol/LNa2CO3和5mmol/L NaOH淋洗液，抑制电导检测和紫外检测串联，紫外检测波长为254nm,分离效果和线性关系都较好[11]。 2.1.2酸味剂：食品中常见的酸味剂如柠檬酸、苹果酸、乳酸、琥珀酸等，离子交换色谱分离这一类有机酸通常采用IonPac® ICE-AS6阴离子分离柱，淋洗液为0.4 mmol/L七氟丁酸, 抑制电导检测器,可以得到以上酸的良好的分离，该方法可直接被应用于分析白酒、红酒、啤酒等中的各种有机酸和其它阴离子的分析[5,6,13]。 2.1.3食品中的甜味多为糖类或聚醇类物质，其测定方式与糖类相同，以食品中常用的甜味剂糖精的测定为例采用8.0mmol/L Na2CO3+5.0mmol/LNaOH为淋洗液，在阴离子交换分离柱AS-4上分离，抑制电导检测，常规阴离子不干扰其测定，对饮料样品可直接进样分析[14，15]。 2.2 糖类分析 由于糖在碱性条件下阴离子化，对在恒电位下的金电极或铂电极的安培检测会产生响应值，因此可采用高灵敏度和选择性的脉冲安培检测器与离子色谱联用对糖类进行分析。朱岩在分析葡萄糖，果糖，蔗糖等过程中[16]，采用NaOH作淋洗液，在AG6+AS6阴离子分离柱上分离糖类，金电极脉冲安培检测器检测，分析效果较好；使用NaOH作淋洗液，在糖柱Carbopac PA1上分离各种聚合糖醇，脉冲安培检测[17，18]，该方法相对于分析聚醇常使用的GC+衍生来说，分析时间短，回收率高。 与HPLC相比较采用脉冲安培检测离子色谱法测定糖类有许多优越性。就检测器而言，通常HPLC采用光学检测器，然而糖类光学特征差，因此采用HPLC糖类往往采用示差拆光检测，分析灵敏度和选择性比较低，无法完全满足痕量的生化分析的要求；采用脉冲安培检测，提高了分析的灵敏度和选择性，对痕量生化样品及基体复杂的样品分析具有优势。如用梯度淋洗，金电极为工作电极，Ag/AgCl电极为参比电极，脉冲安培检测分析二糖、三糖等[19]，不仅分析时间缩短，由于安培检测灵敏度高，分析的检测限可低到几十个ng/L。对于分析成分更复杂的糖类化合物如不同聚合度的麦芽糖、果糖等多糖时，常用NaOH与醋酸钠进行梯度淋洗，其中醋酸钠在淋洗过程中主要起推进作用，且对淋洗液的pH值不会产生影响。 2.3 氨基酸分析 目前氨基酸分析较常用的方法是高效液相色谱分离和柱前或柱后衍生紫外[20]或荧光检测[21]，这种方法已非常成熟。然而衍生反应的存在，总会影响测定的灵敏度和准确性。由于氨基酸是一种酸碱两性化合物，因此即可采用阳离子交换，又可采用阴离子交换分离氨基酸。虽然采用离子交换色谱间接电导检测法可以测定氨基酸[22]，该法采用对检测器是活性的流动相，测定两性的氨基酸，但实际测定过程有一定局限性。在强酸性或强碱性条件下，几乎所有氨基酸都能在铂电极或金电极上产生响应，而这现象产生的原因是金属电极表面生成的氧化物对氨基酸氧化起催化作用[23]。根据氨基酸的这两种特性，结合离子交换色谱与安培检测可实现氨基酸的直接分离检测。 阳离子交换分离氨基酸，一般采用较强酸高氯酸作淋洗液，梯度洗脱，铂电极为工作电极，参比电极为氢离子选择电极。然而该方法存在一定的局限性，如对于强酸性氨基酸在阳离子交换柱上保留很弱，分辨率很差；并且有部分氨基酸如酪氨酸、苯丙氨酸等在酸性条件下不稳定，因此氨基酸多采用阴离子交换法分离[7，24，25，26，27]，在此条件下几乎所有氨基酸都处于阴离子状态。由于不同氨基酸结构差异很大，同时分离20种常见氨基酸，一个固定浓度的淋洗液条件是不可能完成的，必须采用梯度淋洗。阴离子交换分离氨基酸，目前常采用较复杂的氢氧化钠/醋酸钠梯度淋洗，金电极为工作电极，pH电极为参比电极，积分脉冲安培检测[28]，能同时测定17种α-氨基酸及部分糖类及糖胺，大部分氨基酸的检测限可达到fmol范围。 2.4 农药测定 大多数农药结构复杂、品种繁多，虽然大多数可用HPLC或者GC分析。然而对部分不具光学吸收且能够离子化的化合物而言，离子色谱是较好的选择。 草苷膦是一种除草剂，在农业生产上有广泛的用途。但它在环境中不易降解，并且易溶于水，对环境造成污染。由于草苷瞵对光弱吸收，采用HPLC分离需要进行衍生或低波长紫外吸收，致使测定耗时，灵敏度不高。而草苷膦在水中有较大的电离，采用离子色谱抑制电导检测，分析柱为AS4SC，9mmol/LNa2CO3和4mmo/LNaOH为淋洗液，流速为1.5ml/min，在此条件下常规阴离子对分离无干扰，该方法可直接用于环境水样中痕量草苷膦的测定[29]。对于其它除草剂如三嗪类除草剂莠去津、扑草净、扑灭通等选择性内吸传导型除草剂。这些除草剂的使用有用量、温度等条件的限制，因此对它们必须准确的定量以控制其使用量。 三嗪类除草剂作为一种阳离子形态有机化合物可以用阳离子交换柱分离，在紫外波长为230nm处检测。采用CG-12阳离子交换分离柱紫外检测，淋洗条件为0.2mol/L H2SO4+25/100(v/v) CH3CN,得到较好的分离[30]。 对氯苯氧乙酸是一种常见的农药，由于其含有羧酸结构，因而可采用阴离子交换色谱分离-抑制电导检测[31]，分离柱为Ionpac AG3SC+AS4SC，流动相为0.8 mmol/L Na2CO3 +0.5 mmol/L NaOH，抑制电导检测器。可将其与常规阴离子很好的分离，可用于对对氯苯氧乙酸和工业级产品的测定。 各种氯代乙酸，由于可在水中离解，其分析可采用的离子色谱交换法，如使用Ionpac AG9HC+AS9HC（2mm）阴离子色谱柱，15 mmol/L Na2CO3，5 mmol/L NaOH流动相，抑制电导检测器分离.乙酸、一氯乙酸、二氯乙酸、三氯乙酸，分析效果较好[32]。 吲哚乙酸和吲哚丁酸均为植物生长调节剂，对吲哚乙酸和吲哚丁酸的测定除了在荧光检测中所提到的方法外[8]，还可以采用离子色谱法-抑制电导检测法[33]，该方法采用的色谱柱为Ionpac AG3SC+AS4SC，流动相为3 mmol/L Na2CO3 +3 mmol/L NaOH，抑制电导检测器检测。 2.5 其它化合物分析 对毒物的测定也有广泛的应用。Jaime等采用离子交换色谱柱后电化学氧化荧光检测+MS对海产品中常见的PSP毒素进行测定，分析结果准确可靠，该方法被应用于测定浮游植物和监控海产品中PSP的含量[34]。还有一些常见的毒物如苯酚等一些酚类物质的分离，采用离子色谱法也能获得良好的分离效果[35]。 注：本文原文刊载在《现代科学仪器》2003年第一期上，您可以从www.dionex.com.cn的《技术资料》网页浏览下载全文。

美国戴安公司的LC-PACKING纳升级HPLC是当今世界最先 进的微量色谱之一.已经广泛应用于蛋白质组学的研究 领域.特别是其同MADLI TOF质谱的完全兼容性,使得LC- PACKING更是广大MADLI TOF质谱用户的最佳选择. LC Packings/Dionex /Nano LC 系统的组成: 1.UltiMate™微孔泵和检测单元 流速范围从 50 nl/mi n 到 200 µl/min,压力范围0-6000psi 2.FAMOS™ 微量自动进样器，样品体积：50nL-5 µl， 5 µl-1mL，注入样品量为 1 µl 输出样品量也是1µl (无样品丢失)，取样对象可以是96、384多孔板，1.5ml 样品瓶（密封与开口均可，（双针技术）放置7块384孔 板，可连续取样2688次。内置双泵可以完成梯度2D色谱 分析. 3.Swithchos™ 微孔柱切换单元，允许全柱切换和快速 加载样品典型的装置。 4.Probot 微量样品收集器,是目前唯一一种可以直接将 分离样品点在MALDI TOF 质谱专用板上的样品收集仪 器.可以同ABI公司,布鲁克公司等大型TOF质谱直接连 接. 工作流程 用 FAMOS™向反向捕获柱注入样品, 使用Switchos™加 载泵以 30 µl/min的速度加载样品. 样品进到捕获柱后， Switchos 阀切换关闭， UltiMat e™ 单元的Nano梯度以 200 nl/min的速度将捕获柱中 的浓缩样品反冲到NanoLC的分析柱中，分析柱直径是7 5 µm ，填料是C18 PepMap™.，各种组分在这里分离然 后进入质谱检测。NanoLC的技术特点 1.提供了比 毛细管液相更高的灵敏度2.使用 Capillar y/Nano 柱，可在日常工作中达到最高的分离效率和极 好的峰容量 3.由于分析柱极小的直径，成为分析极少的样品量和稀 释样品的极好分析技术4.确保最少的样品丢失与质谱联 机有卓越的性能（特别是具有电喷雾离子源（ESI）的 在线质谱，可以最小的流速提供高浓度的样品） Capillary/Nano LC 与 MS联机: 1.可达到最高的灵敏度，使得毛细管/毫微级液相最佳 的分离效果与质谱最高的分辨检测结果有机地结合； 2、所有的进样、分离、检测和数据处理全部自动化： 全自动样品处理和导入、多维分离、MS/MS测序和采 集、数据库搜索；3、翻译后的修饰的鉴别；4、可大大 增加蛋白鉴别的通量。5、可与ESI、MALDI离子源质谱 联机 Peak parking 峰停驻技术 峰停驻技术用来增强 MS/MS 的灵敏度,用来分析不太复 杂的蛋白混合物(<50)；峰停驻技术可配合使用原位消 化技术，使灵敏度增加（样品量减少，光谱信息增 加）； 可改进数据质量和序列的覆盖面 原位消化技术 与2D胶相比可增加蛋白识别数量；可识别高含量蛋白污 染下存在的低丰量蛋白，同时极大地节省实验时间。 峰停驻技术可做下列描述： •进入质谱的峰淋洗速度被降低，使得有更多的时间识 别先进入的离子. •同时从 Nano LC分析柱来的淋洗液被停止. UltiMate™ 系统 提供Nano梯度淋洗(200 nl/min), 在 Nano LC (75 µm i.d.)柱中进行分离，被分离的组 分通过微量阀进入质谱，一旦进入质谱的峰达到一个确 定的峰高，MS将切换成MS/MS方式并得到MS/MS的光 谱 ，同时给出两个信号 ：1、微量阀被通知关闭，喷 射泵与MS在线连接，喷射泵以 25 nl/min的速度工作， 给质谱留有更多的时间得到MS/MS光谱,. 2、UltiMate ™ 系统被通知保持梯度 (35%B remains 35%B) ，流 速进一步降低以保持柱压的稳定，一旦质谱中的峰从一 个确定的溢出或确定的高度开始下降，MS开始切换回质 谱的模式，微量阀和UltiMate™接到通知恢复到峰停驻 发生开始时的条件。 NanoLC 2维液相色谱技术 2维毛细管/NanoLC/MS可取代2D凝胶分析。2D凝胶被广 泛地应用在蛋白质组学的研究中，但它有下列的缺点： 1、重现形不好 2、覆盖的蛋白数量少 3、对低峰量蛋白的灵敏度不够 4、消耗时间和劳动力 5、pH范围有限 6、不能直接与质谱在线联机 以下是典型的UltiMate Nano LC系统2D分离的流程： 样品用FAMOS微量自动进样器注入到BioX-SCX离子交换 捕获柱上.通过自动进样器上的梯度泵缓慢梯度改变淋 洗盐溶液浓度(at 30 ul/min),从 BioX-SCX柱上将肽的 不同片段分别洗脱,并通过RP捕获柱分别收集，当捕集 到肽后，盐被冲洗出系统并确认盐不会进入MS,此时Nan oLC的主梯度泵(200 nl/min) 开始从捕获柱反冲肽 片段进入NanoLC毛细管分析柱，肽在这里被分离,最后 进入MS做定性。

摘要：2,4-二异氰酸甲苯酯（2,4-TDI）、2,6-二异氰 酸甲苯酯（2,6-TDI）和4,4’-二苯甲烷二异氰酸酯 (4,4’-MDI)在酸性条件下转化为2,4-甲苯二胺（2,4-T DA）、2,6甲苯二胺（2,6-TDA）和4,4’-二氨基二苯甲 烷(4,4’-MDA)。2,4-TDA、2,6-TDA在流速为0.25 ml/m in，淋洗液为0.025mol/l硫酸钠溶液、0.012mol/l的硫 酸和3%的乙腈溶液的混合溶液的离子色谱仪上较好地分 离，4,4’-MDA在淋洗液为0.03mol/l的硫酸和40%的乙 腈溶液的混合溶液的离子色谱上有较好的峰形。在梯度 淋洗的条件下，0.025mol/l硫酸钠溶液、0.012mol/l的 硫酸和3%的乙腈溶液的混合溶液（持续8分钟），然后 切换成0.03mol/l的硫酸和40%的乙腈溶液的混合溶液， 在相当短的时间内，2,4-TDA、2,6-TDA和4,4’-MDA能 较好的分离。在电极电位为0.80V的玻碳电极的电化学 检测器进行测定。2,4-TDA、2,6-TDA和4,4’-MDA检测 限分别为0.00269μg/ml、0.00574μg/ml、0.00883μg/m l，即2,4-TDI、2,6-TDI和4,4’-MDI 的检测限分别为 0.00384μg/ml、0.00819μg/ml、0.0111μg/ml。具有良 好的线性关系和重现性。对空气样品进行测定，结果令 人满意。 关键词：2,4-二异氰酸甲苯酯 2,6-二异氰酸甲苯酯 4,4’-二苯甲烷二异氰酸酯 2,4-甲苯二胺 2,6甲苯 二胺 4,4’-二氨基二苯甲烷 离子色谱 直流安培检测 1.引言 芳香族异氰酸酯是聚氨酯橡胶（PUR）预聚体的主要成 分. PUR 经常用于生产人造橡胶，软硬泡沫, 胶粘剂 等。2,4- 、2,6-TDI和4,4’-MDI是最常用的单体异氰 酸酯。长期暴露在异氰酸酯环境中对人体危害很大[1- 3] .在高浓度 TDI的环境中容易产生易怒的黏膜，引起 哮喘和会对肺功能无法挽回的伤害 [4]. 因此需要建立 一个简单，快速，可靠的方法测定TDI和MDI。 对于TDI和MDI的测定以前已经有过很多报道。如工作环 境中的空气[6-9]、商业聚氨酯橡胶中[10-11]以及尿 液、血液中[4,12-17]的二异氰酸酯单体的含量测定。 但未见离子色谱-DC直流安培检测同时测定空气样品中 2,4- 和2,6-TDI和44’-MDI 异氰酸酯在常温下不是很稳定，而其相应的胺要稳 定的多，而且异氰酸酯在酸性条件下能完全转化为胺类 [4,12]。因此我们可以通过检测水解后空气中的TDA和M DA来测定TDI 和MDI的含量。 本文通过对TDA、MDA进行分离测定来检测其相应 的TDI、MDI，建立了离子色谱-DC直流安培检测测定 2,4-、2,6-TDI和4,4’-MDI的方法。 2．实验部分 2．1. 实验仪器和试剂 仪器：Dionex DX—500微孔型离子色谱仪配以直流安 培检测器。 试剂：2,4-甲苯二胺、2,6-甲苯二胺和4,4’-二氨基二 苯甲烷、硫酸、硫酸钠、乙腈均分析纯试剂 2．2．实验条件 分离柱：CG12-2mm+CS12-2mm(10-32)；检测器：直流安 培检测器 E=0.80V。 淋洗液：0.025mol/l硫酸钠溶液+0.012mol/l的硫酸+3% 的乙腈溶液的混合溶液和0.03mol/l的硫酸+40%的乙腈 溶液的混合溶液 ； 流速：0.25ml/min； 进样量： 25 μl *本文系浙江省自然科学基金和分析测试基金资助项目

第二章：有机酸 有机酸是食品中重要的风味物质，它可以表征产品的 质量，指示储存食品是否变质。抑制电导检测器对有 机酸的灵敏度较高，比Low UV检测器约高10倍，因此 食品中痕量的有机酸检测最好使用离子色谱法。通常 可在一次分析中同时确定食品中的无机离子和有机 酸。 果汁中的有机酸 果汁中有机酸谱图对于确定果汁的新鲜程度与是否掺 假都是非常重要的，通常需要测定某些有机酸的比 例，因为它是每个特定果汁的重要特征 蔓越橘与番茄汁中的有机酸 奎宁酸是蔓越橘果汁的重要标志，且成为其是否纯正 的衡量标准。用离子排斥色谱法与抑制型电导检测器 对其分离与检测是测定奎宁酸以及其它主要有机酸的 一种快速方法。另外，不仅是蔓越橘，其它果汁也具 有能反应其纯度的有机酸图谱。 由于没有高浓度盐的干扰，食品分析如番茄汁的分析 变得非常简单，氯化物随其他无机阴离子从柱空隙中 被洗脱，只需要对样品进行稀释和过滤即可。 果汁中有机酸和无机阴离子同时高分辨确定 如图所示，桔汁、葡萄汁和苹果汁中主要及次要的有 机酸及无机阴离子，可用梯度离子色谱同时高分辨地 检测出来，使用氢氧化纳梯度淋洗，IonPacAS11分析 柱的功效表现得十分明显，分析柱可在大约5分钟左右 的时间内平衡至初始条件。淋洗液中加入甲醇对于某 些性质极相近的有机酸的分离有所改善。 英国黑啤酒中的有机酸与阴离子 有机酸与无机阴离子是啤酒中的重要风味物质，阴离 子还影响啤酒外观。啤酒中有机酸与无机阴离子的高 分辨解析可在18分钟内获得。 食用色素 合成的食用色素广泛应用于食品与饮料中。食用色素 可分为四类：偶氮化合物（1-，2-，3-）、吲哚、三 苯甲烷与次甲基色素。这些色素大部分呈碱性或阴离 子形态，并且含有磺酸基、羧基或苯酚基团。这些强 离子化合物用传统的反相HPLC不易分离，通常要使用 离子对试剂。如使用如图所示的多项柱则可得到更好 的分离效果且不必用离子对试剂。 因版式限制，有关图谱不能上传，如有感兴趣的读 者，可向戴安公司市场部免费索取。 liujing@dionex.com.cn

戴安公司离子色谱在食品饮料分析中的应用实例 （连载五）——碳水化合物 糖与糖醇的同时确定 食品饮料中常含有糖与糖醇，使用CarboPac PA10 分析柱，可在例行检测中一次进样既可完成测定， 在等浓度淋洗条件下，在丙三醇，木糖，山梨 （糖）醇和甘露糖的后边单糖和二糖被快速地淋洗 出来。 营养性甜味剂 HPLC每天都在糖工业中用于检测有机酸与碳水化合 物。其中，各种金属型强阳离子交换柱经常使用， 但HPAE-PAD以其极大的优点成为强有力的替代方 法。 甜味剂中的杂质 通常的结晶糖产品如蔗糖、麦芽糖、乳糖、右旋糖 （葡萄糖）与左旋糖（果糖），它们的纯度很高， 加入食品中有明确的功能。它们中的痕量杂质可简 易快速地检测出，右图为典型的蔗糖分析。 食品中的糖 如图A所示，调味番茄酱等食品中的糖类很容易被 测定。样品的处理为简单的提取、稀释和过滤。图 B所示为奶油硬糖中的葡萄糖、果糖、麦芽糖、麦 芽三糖的检测，样品稀释2000倍并在进样之前经过 0.2μm的滤纸过滤。图C中，已加调味剂的土豆片 中的糖经过简单的提取后可直接检测，未知峰可能 是其它糖或易氧化成分，如醛。 糖浆中的糖 糖浆中的糖的分析采用了国际糖类标准分析方法委 员会1994年所指定的标准分析方法，该方法如图所 示。该方法的认定基于11个试验室的国际合作，使 用此方法得到的测试结果的重现性极好，且与联合 试验室的平行测试结果非常一致。此方法的优点 有：1）没有非糖杂质的共洗脱；2）大大减少了由 于杂质的共洗脱而对糖类估计过量的可能性；3） 不要求柱加热。 高脂肪食物中的糖 检测高脂肪食品中糖分的一个难题是脂肪会干扰糖 类的色谱分离，但可以在样品分析前萃取除去脂 肪。(图：巧克力中的糖)。 因受版面限制，不能刊登图谱，该资料已由戴安公 司印制成册，如需要，请向戴安公司市场部免费索 取。电话：010 67100336

离子色谱中常用的改善分离度方法 （戴安中国有限公司应用研究中心，北京，100085） 一.稀释样品 对组成复杂的样品，若待测离子对树脂亲合力相差颇 大，就要作几次进样，并用不同浓度或强度的淋洗液或 梯度淋洗。对固定相亲合力差异较大的离子，增加分离 度的最简单方法是稀释样品或作样品前处理。例如盐水 中SO42-和Cl-的分离。若直接进样，其色谱峰很宽而且 拖尾表明进样量已超过分离柱容量，在常用的分析阴离 子的色谱条件下，30min之后Cl-的洗脱仍在继续。在这 种情况下，在未恢复稳定基线之前不能再进样。若将样 品稀释10倍之后再进样就可得到Cl-与痕量SO42-之间的 较好分离。对阴离子分析推荐的最大进样量，一般为柱 容量的30%，超过这个范围就会出现大的平头峰或肩峰 二.改变分离和检测方式 若待测离子对固定相亲合力相近或相同，样品稀释的效 果常不令人满意。对这种情况，除了选择适当的流动相 之外，还应考虑选择适当的分离方式和检测方式。例 如，NO3-和ClO3-，由于它们的电荷数和离子半径相 似，在阴离子交换分离柱上共淋洗。但ClO3-的疏水性 大于NO3-，在离子对色谱柱上就很容易分开了。又如NO 2-与Cl-在阴离子交换分离柱上的保留时间相近，常见 样品中Cl-的浓度又远大于NO2-，使分离更加困难，但N O2-有强的UV吸收，而Cl-则很弱，因此应改用紫外作检 测器测定NO2-，用电导检测Cl-，或将两种检测器串 联，于一次进样同时检测Cl-与NO2-。对高浓度强酸中 有机酸的分析，若采用离子排斥，由于强酸不被保留， 在死体积排除，将不干扰有机酸的分离。 三.样品前处理 对高浓度基体中痕量离子的测定，例如海水中阴离子的 测定，最好的方法是对样品作适当的前处理。除去过量 Cl-的前处理方法有：使样品通过Ag+型前处理柱除去C l-，或进样前加AgNO3到样品中沉淀Cl-；也可用阀切换 技术，其方法是使样品中弱保留的组分和90%以上的Cl- 进入废液，只让10%左右的Cl-和保留时间大于Cl-的组 分进入分离柱进行分离。对含有大的有机分子的样品， 应于进样前除去有机物，较简单的方法是用Dionex的前 处理柱OnGuard的RP或P柱或在线阀切换除去有机基体。 四.选择适当的淋洗液 离子色谱分离是基于淋洗离子和样品离子之间对树脂有 效交换容量的竞争，为了得到有效的竞争，样品离子和 淋洗离子应有相近的亲合力。下面举例说明选择淋洗液 的一般原则。用CO32--HCO3-作淋洗液时，在Cl-之前洗 脱的离子是弱保留离子，包括一价无机阴离子、短碳链 一元羧酸和一些弱离解的组分，如F-、甲酸、乙酸、As O2-、CN-和S2-等。对乙酸、甲酸与F-、Cl-等的分离应 选用较弱的淋洗离子，常用的弱淋洗离子有HCO3-、OH- 和B4O72-。由于HCO3-和OH-易吸收空气中CO2，CO2在碱 性溶液中会转变成CO32-，CO32-之淋洗强度较HCO3-和O H-大，因而不利于上述弱保留离子的分离。B4O72-亦为 弱淋洗离子，但溶液稳定，是分离弱保留离子的推荐淋 洗液。中等强度的碳酸盐淋洗液对高亲和力组分的洗脱 效率低。对离子交换树脂亲合力强的离子有两种情况， 一种是离子的电荷数大，如PO43-、AsO43-和多聚磷酸 盐等；一种是离子半径较大，疏水性强，如I-、SCN-、 S2O32-，苯甲酸和柠檬酸等。对前者以增加淋洗液的浓 度或选择强的淋洗离子为主。对后一种情况，推荐的方 法是在淋洗液中加入有机改进剂(如甲醇、乙腈和对氰 酚等)或选用亲水性的柱子，有机改进剂的作用主要是 减少样品离子与离子交换树脂之间的非离子交换作用， 占据树脂的疏水性位置，减少疏水性离子在树脂上的吸 附，从而缩短保留时间，减少峰的拖尾，并增加测定灵 敏度。 在离子色谱中，可由加入不同的淋洗液添加剂来改 善选择性，这种淋洗液添加剂只影响树脂和所测离子之 间的相互作用，而不影响离子交换。对与树脂亲合力较 强的离子，如一些可极化的离子，I-和ClO4-，以及疏 水性的离子，苯甲酸和三乙胺等，在淋洗液中加入适量 极性的有机溶剂如甲醇或乙腈，可缩短这些组分的保留 时间并改善峰形的不对称性。为了减少样品离子与树脂 之间的非离子交换作用，减少树脂对疏水性离子的吸 附，在阴离子分析中，可在淋洗液中加入对氰酚。如测 定1% NaCl中的痕量I-和SCN-时，加入对氰酚占据树脂 对I-和SCN-的吸附位置，从而减少峰的拖尾并增加测定 的灵敏度。IC中，一价淋洗离子洗脱一价待测离子，二 价淋洗离子洗脱二价待测离子，淋洗液浓度的改变对二 价和多价待测离子保留时间的影响大于一价待测离子。 若多价离子的保留时间太长，增加淋洗液的浓度是较好 的方法。 注：本文已发表在《环境化学》2002年第二期“戴安色 谱园地”

DX-600离子色谱是目前功能最强大的离子色谱， 可以同时满足简单的等度分析和复杂的梯度淋洗 分析；可以使用戴安公司的“只加水”技术：EG 40淋洗液自动发生器和SRS自身再生抑制器；可 以选择使用GP50或GS50梯度泵以及PDA100二极管 阵列检测器以及电化学检测器等。 DX-600离子色谱系统由高性能的部件组成，使用 极其简单。灵活多样的系统配置，可用不同的泵 和检测器。

离子色谱的关键技术--抑制器

美国戴安公司最新推出盐转换器—阳离子自动再生 抑制器（SC-CSRS）是柱后电解淋洗液抑制器，应 用于阳离子的电导检测。SC-CSRS在阳离子交换的 应用取代CSRS-ULTRA抑制器，它用于测定铵盐和 胺类化合物时扩大线性范围，增加灵敏度。SC-CSR S将弱电离的铵盐和胺类化合物转化为强电离的MSA 形式，因此增大了响应值，扩大线性范围到三个数 量级。

快速溶剂萃取在食品样品前处理中的应用 萃取通常是食品样品分析第一个必须的步骤。传统的 萃取方法如索氏提取，需要大量的溶剂且耗费时间， 通常需要数个小时，超声萃取虽然缩短了萃取的时 间，但也需要大量的溶剂且不易实现自动控制。溶剂 的大量使用和操作频繁地暴露在溶剂中使得这些方法 不满足常规工作的要求。 戴安公司开发的快速溶剂萃取（ASE）技术是最新的全 自动萃取方法，仅用极少的溶剂，利用升高的温度加 快解析动力达到加速萃取的目的，在高温和高压下萃 取的时间从传统的溶剂萃取的数小时降低到以分钟 计，ASE极大地减少了样品准备的繁琐，在ASE自动萃 取样品的同时，实验人员还可做其他的样品准备工 作，ASE使得样品的准备变成自动流程，刚一问世，就 被接受为环境、食品和其他固体半固体样品的标准萃 取方法，ASE适用于美国EPA SW-846方法的3545号标 准中所涉及的所有压力流体萃取的碱性/中型/酸性 （BNAs）物质、氯化杀虫剂和除草剂、多氯联苯 （PcBS）、有机磷杀虫剂等。 ASE技术概述 ASE快速溶剂萃取通过在升高的温度和压力下使用有机 或极性溶剂达到萃取目的。泵将溶剂注入装好样品的 萃取池，温度升高到设定的温度（温度范围：室温— 200OC），萃取后的萃取液从加热的萃取池转入标准的 收集瓶进行进一步的纯化或直接分析。 增加温度可加速解析动力学，而同时升高的压力则保 证溶剂在超过正常沸点时仍保持液态。整个萃取过程 仅使用极少的溶剂，时间仅需15分钟。与其他传统的 萃取方法相比，时间和溶剂的消耗均大大减少，由于 ASE所用的溶剂与传统的索氏提取或其他现行的方法相 同，所以ASE可以方便进行方法的开发。 ASE200快速溶剂萃取仪概述 戴安公司的ASE200是全自动萃取仪，可根据存储的萃 取程序全自动萃取，24个萃取位，萃取池体积最大可 达33毫升，（一次可萃取30克固体样品，ASE300最多 一次可萃取100克固体样品），可以在萃取中根据预先 制定的程序在不同的萃取方法之间进行任意切换， 如：可以用同一种溶剂连续萃取多个样品，也可用不 同的溶剂萃取同一个样品，为避免不同的样品之间的 交叉污染，每个萃取之间可全自动的进行流路清洗。 系统的安全措施消除了潜在的隐患发生，温度、压 力、溶剂泄露等均有传感器，并有声音报警，在必要 时会自动关闭仪器。 ASE200的操作 ASE200的组成：输送溶剂的泵、萃取加热炉、控制溶 剂和将萃取液转换到收集瓶的切换阀，所有功能都是 全自动的。 ASE的样品准备与其他萃取技术相同，包括干燥、粉碎 或混合等，准备好的样品加入萃取池并放到传递转盘 上，当炉体温度达到预定，转盘将萃取池转入炉体位 置并在压力下密封。 热平衡后（一般约需5分钟），萃取池在炉体中保持在 用户要求的温度下静态萃取（一般约需5至15分钟）， 萃取液放入收集瓶同时加入一些新鲜的溶剂清洗并用 氮气对萃取池彻底吹扫，萃取池回到转盘，ASE开始按 程序进行下一个样品的萃取。 从谷物中萃取杀虫剂 在食品和农产品中确定杀虫剂、除草剂和其他相关的 化合物对确保食品安全非常重要。目前，多种分析技 术正快速增加，很多技术要求对杀虫剂组分提高萃取 效率。 这里列出的对小麦中多种不同的杀虫剂组分萃取的数 据来自两个独立的研究人员的共同研究结果，粉碎的 小麦样品送到戴安公司用ASE进行萃取，萃取液返回研 究者进一步处理或直接分析。 第一组，杀虫剂 表1是现行的萃取方法与ASE方法的萃取条件的对比， 萃取的回收率对比列在表2，ASE的回收率均高于现行 的方法，用的时间最短并大大减低了溶剂的使用量， 也不需要对萃取液进行后萃取的净化。 表1 小麦中的杀虫剂 第一组：现行萃取方法与ASE萃取条件的对比 样品量溶剂体积后萃取总时间样品分析 现行方法 3-20克130毫升SPE净化60分钟GC-FPD ASE3-20 克15毫升无15分钟GC-FPD 表2 小麦中的杀虫剂 第一组：现行萃取方法与ASE萃取的回收率对比 Malathion (µg/L) Methylchlorpyrifos (µg/L) 样品12351011 现行方法404060406060 ASE方法5050701008070 现行方法 708050306070 ASE方法9010060708090 第二组 杀虫剂、除草剂和防霉剂 表3中是ASE在第二组研究中的萃取条件，回收率结果 列在表4。在这个研究中，萃取样品的标准加入量两倍 于定量检测限（如象在GC/MS单离子检测模式所用）， 在本次实验中，萃取液分析前要做进一步的净化。数 据表明，ASE方法对很多不同的杀虫剂有非常好的回收 率。 表3 小麦中的杀虫剂研究编号：2号 ASE萃取条件 样品量静态萃取时间溶剂总时间压力溶剂量温度样品 分析法加热时间 3.0克5分钟乙腈12分钟 2000psi14毫升100OCGC-MS5分钟 表4 ASE萃取小麦研究编号：2号 杀虫剂、除草剂、 防霉剂标准加入回收率 有机磷杀虫剂Azinphos- methylChlorpyrifosChlorpyrifos- methylDemeton- SDiazinonDichlovosDimethoateDisulfotonDisulf oton-sulfoneOmethoateParathionParathion- methylPhoratePhorate-sulfone氯化杀虫剂 Endosulfan-alphaEndosulfan-betaEndosulfan- sulfateMethoxychlor-o,pMethoxychlor-p,p’甲 氨酸盐杀虫剂CarbarylCarbofulan除草剂 AtrazineDiclofop- methylLinuronTriallateTrifluralin防霉剂 ImazalilThiabendazole 峰值（µg/L） 56208382618582298748440183256682048509222143 610268444044 回收率（%） 从水果和蔬菜中萃取有机氯农药 由于水果和蔬菜中富含水分，样品中常需要加入硅藻 土，所示的样品农药峰值均在100µg/Kg，对香蕉和马 铃薯用同样的萃取条件萃取，萃取液用GC分析，表5和 表6中的结果表示，ASE对水果和蔬菜中所有的有机氯 农药均有非常好的回收率和相对标准偏差（RSD）。 表５　ASE从香蕉中萃取有机氯杀虫剂 组分alpha-BHCbeta-BHCgamma- BHCHeptachlorAldrinHeptachlor EpoxideDieldrin4,4’-DDE2,4’- DDDEndrin4,4’-DDD4,4’-DDT Avg.100.3102.298.989.289.493.593.7 92.195.494.488.089.6 Std2.32.33.27.62.22.11.61.82.52.72 .75.8 RSD2.32.33.28.52.52.21.71.92.63.03 .06.4 a 每个组分含100 µg/Kg b 萃取条件：10克样品与6克硅藻土混合，100OC， 10MPa（1500Psi）；加热5分钟，静态萃取5分钟， 60%溶剂冲洗，60秒吹扫，己烷/10%丙酮 表６　ASE从马铃薯中萃取有机氯杀虫剂 组份Alpha-BHCBeta-BHCGamma- BHCHeptachlorAldrinHeptachlor EpoxideDieldrin4,4’-DDE2,4’- DDDEndrin4,4’-DDD4,4’-DDT Avg.96.3108.697.493.995.995.297.19 5.495.797.893.793.0 Std6.32.36.63.53.32.40.550.670.851 .81.84.5 RSD6.62.16.83.73.42.60.570.700.891 .91.94.8 a 每个组分含100 µg/Kg b 萃取条件：10克样品与6克硅藻土混合，100OC， 10MPa（1500Psi）；加热5分钟，静态萃取5分钟， 60%溶剂冲洗，60秒吹扫，己烷/10%丙酮 鱼肉组织中多氯联苯（PCBs）的选择性萃取 在对含有多氯联苯污染的鱼肉组织或匀浆萃取分析 时，常有脂肪被共萃取出来，脂肪会干扰色谱分析。 常用尺寸排斥色谱（SEC）、柱色谱和酸处理等净化手 段来除去这些脂肪，但这些过程除消耗时间外还增加 了潜在的分析损失，ASE的交替选择性萃取的方法因此 显示出极大的优势。 选择性萃取可以通过选择适当的溶剂和在萃取池中预 先加入吸附剂实现，在本次实验中使用了铝粉做吸附 剂，其收集液不需做进一步的净化，可直接进样进行 气相色谱分析。 鱼肉组织样品由加拿大的国际研究委员会（NRC- CNRC）提供。 选择性与非选择性ASE萃取的对比 表7中结果是ASE用己烷对同一鱼肉组织样品进行非选 择性和选择性萃取的对比，在选择性萃取中，萃取池 的底部放入铝粉吸附了脂肪和其他共萃取出的物质， 萃取液非常清亮，同时使PCBs的定量分析大大简化。 通常，ASE的选择性萃取均得到满意的结果（表7）， 同时还省去了对包括硫酸处理或尺寸排斥色谱等净化 过程的需要。 使用这一方法，样品的准备时间和可能的分析损失都 会明显降低。 表7 ASE选择性萃取鱼肉组织中的PCBs的回收率 Congener52101/90105118138/163/164153170/1901 80187/182 Cert.a Value124±32124±3754±24132 ±60102±2383±3922±846±1436±16 Extract11001011241074848306530 Extract21071031281094848316230 Extract3991001251074848316430 Average102101126b10848b483164b30 Std.Dev.4.41.52.11.20.00.00.581.50 .0 RSD(%)4.31.51.71.1N/AN/A1.92.4N/A 从蚝组织中萃取多氯联苯 表8中的数据表明ASE从蚝组织中萃取同类多氯联苯的 平均回收率和RSD（%）。 表8 从蚝组织中萃取PCBs的回收率 PCB CongenerPCB28PCB52PCB101PCB153PCB138PCB180 Avg. Rec.,n=(as% of Soxhlet) 90.086.983.384.576.987.0 RSD(%) 7.84.01.53.53.04.3 样品的准备和分析 蚝样品由国际海洋大气署实验室（NOAA）（美国，华 盛顿）提供。样品与等比例的HydromatrixTM（一种 商品干燥剂）混合以吸附水分。 分析和定量 ASE萃取液先与硝酸银/硫酸一起通过硅胶柱；然后通 过铝柱，浓缩至1毫升，用带有30m X 0.25mm的Rtx-5 柱子和ECD检测器的气相色谱分析。 不同基质食品中的脂肪确定 食品中的脂肪含量已经引起世界的广泛关注。在美 国，营养标签和教育机构要求食品中所有的饱和脂肪 和非饱和脂肪都需要标记在标签上，食品制造商同样 需要一种常规的确定脂肪含量的方法用于生产过程的 质量控制。 目前所用的方法，如索氏提取和自动索氏提取，在用 有机溶剂如氯仿或石油醚萃取后测定重量，这种方法 需要使用大量的溶剂和很多的时间，约数百毫升溶剂 和2至16小时，因此发展仅用很少溶剂的快速溶剂萃取 技术非常必要。 ASE技术与索氏提取的对比 ASE可用来测定多种固体半固体食品中的脂肪含量，脂 肪的含量通过将预先称重的小瓶中的萃取液用氮气蒸 发掉溶剂后再称重小瓶确定。 样品由多个不同的食品公司提供，在这些对比中，所 有的索氏提取结果的数据都是由提供食品样品的公司 提供的。 表9中的结果是用ASE方法萃取不同的快餐食品，然后 测定脂肪含量，得到的回收率与索氏提取的结果相 当，特别是相对标准偏差的结果相当符合。 表9 从快餐食品中萃取脂肪 Sample(n=5)Potato ChipsCorn ChipsCheese SnacksTortilla Chip Avg.%Fat(wt.%) 34.032.833.321.519.2 Std. Dev.0.110.080.170.070.10 RSD(%) 0.330.250.510.340.53 表10-14是其他食品的萃取结果对照。在大部分情况 下，索氏提取和ASE使用相同的溶剂结果相当符合，使 用不同溶剂时，同样也能获得相当符合的结果，表12 中，索氏提取用甲醇/氯仿混合溶剂萃取谷类甜饼中的 脂肪，但提供食品样品的厂家想从生产线中去掉甲醇 并不再使用氯化溶剂（氯仿），ASE改变了萃取溶剂， 用丙酮/异丙醇萃取获得了同样的结果。 表10 从加工食品中萃取脂肪 MethodSoxhletASE, N=3a SolventMethanol/CHCl3(2:1) Hexane/IPA(3:2) Avg. %Fat(wt.%)20.0- 22.020.8 Std. Dev.N/A0.18 RSD(%)N/A0.85 表11 快餐膨化食品中萃取脂肪 SampleCracker 1Cracker 1Cracker 2Cracker 2 MethodSoxhletaASEb,n=3SoxhletaASEb ,n=3 Avg.%Fat(wt. %)15.414.628-3028.1 Std. Dev.N/A0.09N/A0.20 RSD(%) N/A0.65N/A0.70 表12 谷物类甜点中脂肪的萃取 MethodSoxhletASEa SolventMethanol/CHCl3 (2:1)Hexane/IPA(3:2) %Fat(wt.%)10.0- 12.011.6 Std. Dev.N/A0.09 RSD(%)N/A0.73 表13 从狗饼干中萃取脂肪 SampleSRMaSRMBrand XBrand X MethodSoxhletASEbSoxhletASEb SolventPetroleum etherPetroleum etherPetroleum etherHexane/IPA(3:2) Avg.% Fat(wt.%)8.809.1210.310.4 Std. Dev.0.500.15N/AN/A RSD(%)5.71.6N/AN/A表14 从 低脂肪膨化食品中萃取脂肪 MethodSoxhletASEa %Fat(wt.%)1.401.43 Std. Dev.N/A0.03 RSD(%)N/A2.1 ASE与Mojonnier方法的对比 传统的Mojonnier方法从奶制品中萃取脂肪要先做预 处理（通常使用氨水）然后用乙醚/乙醇和石油醚/乙 醇萃取，处理的目的是为溶解酪蛋白释放出空隙间的 脂肪。这种方法无论是时间还是劳力都有很多的消 耗，整个萃取需要很多步骤。用ASE方法与Mojonnier 法对比，萃取高脂肪含量的食品和奶酪时ASE法不需要 进行预处理步骤。ASE萃取30分钟的结果与Mojonnier 法有非常好的符合。 从油料种子中萃取油 食品和食品加工所用的油来自Canola、大豆、亚麻 籽、棉籽等油料种子，精确地确定含油量对优化油的 产出量非常有必要。 现有的从种子中萃取油的方法要消耗大量的溶剂（通 常要几百毫升）和很长的时间（通常要8到16小时）。 ASE方法与现有的官方方法对比 从Canola种子（含油量约占重量的45%）中萃取油， 是ASE与官方AOAS（美国油料化学协会American Oil Chemist Society）方法AM-2-93对比的最好例 子，[AOAS法基于FOSFA(油料种子和脂肪学会联合会 Federation of Oil Seeds and Fat Association) 的官方方法], 该方法的各项指标在表15中给出，ASE 所用的条件列在表16。 萃取结果表示ASE法与AOAS官方方法的结果非常接 近：ASE萃取结果含油为重量的44.9%，三次萃取相对 标准偏差（RSD）0.31%, AOAS法萃取含油为重量的 45.2%，十二次萃取相对偏差为0.24%。总含油量的百 分比变化是萃取时间的函数，用柱型图表示。ASE得出 与AOAS方法相似的萃取结果，但时间大大减少，溶剂 的使用量也大大减少。 过氧化物值（PV）和游离脂肪酸（FFA）的确定表示在 ASE的萃取过程中没有明显的甘油三酸酯的降解。 表15 从油料种子中萃取油AOCS AM 2-93法萃取条件 样品量加热炉萃取再研磨萃取溶剂溶剂用量总时间 4克研磨种子130oC，2小时4小时，排掉溶 剂，冷却7分钟2小时，排掉溶剂，冷却石油醚150- 250毫升10.5小时 表16 从油料种子中萃取油ASE方法萃取条件 系统压力加热炉温度炉加热时间静态萃取时间新溶剂 量吹扫时间溶剂静态萃取次数 6.7MPa(1000psi) 105oC5分钟10分钟100%60秒石油醚3次

第三章：胺与其它有机碱 由于致癌物质亚硝胺可由胺转化而来，且胺类也是食 品变质的一个指标，因此食品与饮料中胺的检测显得 越来越重要。 阳离子与甲胺 低分子量的亚硝胺，如三甲基胺与二甲基胺是鱼类与 其它一些食品质量的标志。通过调整柱子的选择性， 低分子量的胺与无机阳离子可同时检测。甲胺、二 胺、三甲基胺与普通阳离子可于12分钟左右得到分 离。 无机阳离子、胆碱与乙酰胆碱 胆碱对人体正常的新陈代谢起着重要的作用，因此它 经常被加入到婴儿食品与配制维生素中。右图A是采用 UV检测器，硅质反相HPLC离子对分离法对胆碱的分 离。从排除基体干扰与有利于分析的角度来看，阳离 子交换柱与抑制电导检测器显示了更为优良的特性， 它们分离胆碱、乙酰胆碱得到的色谱图见图B，同A比 较，B中的胆碱与乙酰胆碱的顺序颠倒过来且Na+与K+ 同时被检测出。 风味物质与添加剂 自然存在的生物碱，如咖啡因、茶碱和可可碱是咖 啡、茶、可可、可乐型饮料中重要的苦味成分。多相 聚合物薄壳型柱可一次分离十种不同的生物碱，它能 够给出与典型的反相C18柱不同的特征保留值。柱选择 性的不同可使得生物碱与潜在的干扰基体很好的分 离。 海产品变质的指标物—胺类 鱼类中的生物胺是海产品变质的指标物。虽然各种高 效液相色谱法已经发展起来，但由于缺乏合适的生色 团，分析生物胺一般要用衍生技术。一种改进的分析 方法——配有脉冲积分安培检测器的离子色谱，可直 接检测μg/L级的生物胺而无需衍生技术。图A是从变 质的鲱鱼罐头提出的生物胺的色谱图，图B则是加入各 种胺标（300μg/g）的色谱图。 水溶性维生素 为了标定各种营养成分，保证食品质量，检测食品在 储藏过程中的变化等，需检测食品中的维生素。对于 水溶性维生素的测定，硅胶反相离子对HPLC是常用的 方法。由于组分可成功地在多相柱上分离而无需使用 离子对试剂，这样可以UV检测和电导抑制检测两种分 析检测手段在一次进样中串联起来，图A、B所示为两 种检测器串联使用到的结果。 新鲜水果与蔬菜中的三嗪除草剂 由于三嗪除草剂使用广泛，所以成为对新鲜水果、蔬 菜中多项农残检测的主要监测内容。气相和配C-18柱 液相色谱法在这方面已有很多发展，因每种食品的不 同带来不同的潜在干扰，对不同的基质应选择不同的 柱子。右图是常见的除草剂在多相阳离子交换/反相高 分子柱上分离得到的色谱图，该柱的避免了硅反相柱 的交替选择更换，在图中的分离中如需要对峰进行准 确的识别，所用的淋洗液应注意与质谱兼容。 注：本文因版面条件限制不能刊登相应色谱图，有意 者请与liujing@dionex.com.cn联系，另《离子色谱 在食品饮料中的典型应用范例》将于本月底或下月初 出版，欢迎免费索要。

生物液相色谱和氨基酸直接分析技术 生物液相主要应用 糖类 带积分安培检测的高效阴离子色谱可以直接定量测定 以下物质: l 糖蛋白 单糖和低聚糖 l 唾液酸 l 发酵培养基和食品中的氨基糖和乙二醇 l 多聚糖 氨基酸 生物液相氨基酸分析仪(AAA-DirectTM)的配置可对以 下物质直接测定(无需柱前和柱后衍生): l 发酵液,细胞培养液,体液和食物.饮料中的 氨基酸和糖 l 蛋白质水解中的氨基酸、糖和氨基糖图谱 蛋白质和肽 高性能的色谱柱配合淋洗液自动发生装置使分离效果 大大提高: l 监视由于唾液酰化作用,羧基末端截断,氨 基末端焦谷氨酸结构,天冬氨酸的脱酰胺作用，以及色 氨酸和蛋氨酸的氧化引起的蛋白质成分的差异. l 绘制肽图 核酸 在多种变化条件下分析核酸 l 正常的(8-30mer)和超长的(30-70mer)寡 核苷酸单碱基的不同 l 超螺旋质粒和线性DNA的分离 l 聚合酶链反应产物和硫代磷酸（抗制敏寡 核苷酸）分析 小生物分子 生物液相离子交换柱和超级检测技术的结合给以下物 质的分析提供了最高的分辨率和灵敏度 l 肌醇磷酸 l 生物活性胺 l 体液中的有机酸和无机离子 l 维生素 l 抗生素 BioLC--可以满足全部生物液相需求的系统 生物液相 在为生物分子分析提供最佳色谱设计中，戴安公司突 破了其它高效液相系统的极限。使用惰性、非金属的 PEEK流路，消除了对生物相容性和腐蚀的担心，使用 者可以很自由地为分离选择最好的缓冲液。生物液相 系统提供了具有最大灵活性的模块组件设计。 自动进样器 AS50自动进样器具有一个经校验的可移动的注射针， 对少到1μL体积的样品量仍可保证很高的注射精度准 确度。可变的注射体积减少了样品稀释的需求，并且 提供稳定的操作，相对标准偏差小于0.5％，珀尔帖制 冷可保护不稳定的样品。AS50最多可存放100个1.5ml 的样品瓶。 色谱箱 色谱箱内有进样阀，柱选择阀，分析柱，保护柱和检 测池。所有组件均设计成最小的死体积。精确的温度 控制适合对温度敏感的样品的应用。 优良的泵系统 GS50是生物液相系统首选的泵系统。全PEEK流路的双 柱塞串联梯度泵，适合使用2-4.6mm的色谱柱；该泵 可以提供平滑的、无脉冲流动以及精确的比例和优良 的流动精度，可满足敏感、稳定的生物液相的要求； 泵的死体积小，可提供精确的梯度。 多种检测器 生物液相系统可以使用3种检测器。检测器可提供优良 的信噪比和在广的研究范围内最大的灵敏度。每个检 测器均提供友好的用户服务诊断和屏幕简单校正。利 用PeakNetTM数据管理软件可进行全自动检测。 ED50电化学检测器 ED50是一个功能强大的并且多用途的检测器，提供三 种模式的电化学检测。它可以提供脉冲安培、直流安 培和抑制型电导检测。 直流安培 直流安培检测器是高灵敏度检测器，适用于苯酚、儿 茶酚胺、氰化物、硫化物、碘化物和其他分析物的应 用。连续直流电压作用于工作电极进行电化学氧化或 电解目标分析物。通过测量电化学反应的电流达到定 量分析。 脉冲安培 为避免直流安培电极被糖污染，开发了脉冲安培检测 器，脉冲安培检测利用依次重复的四重脉冲电位可以 使电极表面保持清洁并确保检测器的连续响应。氨基 酸、乙醇、甘醇、醛类和烷醇胺都可以通过该种方法 检测。脉冲安培检测（PAD）可提供高的灵敏度和特异 性，无需衍生反应。 抑制型电导 电导检测器用于检测无机阴、阳离子如：CL-、SO42- 、F-、Na+、K+ ，也可检测有机离子如：有机酸、磷 酸和胺类。生物液相独有的离子交换柱配备抑制型电 导检测模式可以进行极低含量的检测并具有非常高的 灵敏度。 AD25 紫外可见检测器 紫外可见吸收检测器是应用于蛋白、多肽、核酸、维 生素或其他生物小分子的非常常规的检测器。AD25检 测器是具有双光束、多波长的光度计，波长范围190- 800nm。配备先进的纤维光学技术可提供简单可靠的操 作；内置的氧化钬自动波长矫正功能，可获得更好的 准确度；非金属流路可消除由金属引起的生物分子变 性；前开门方式便于对检测器中的氘灯、钨灯和流通 池的维护。 PDA-100二极管阵列检测器 二极管阵列（PDA）检测器主要用于对蛋白和多肽的检 测。PDA所能提供的关于分析物的纯度和鉴别的信息超 过传统多波长检测器。PDA-100是具有高分辩率低漂 移的高效检测器。它的双光源可提供从190-800nm范 围内的全部波长。使用这种检测器，每个样品的扫描 时间只要几毫秒，光谱的波长、时间、和光度信息是 连续的，增加了单个样品分析的信息量。 通过对分析物谱图和储存在PeakNet6软件中的谱图进 行比较可鉴别分析物。配有双灯的PDA-100检测器可 提供非常低的基线噪声。 色谱工作站PeakNet6 PeakNet6是最有效的色谱数据管理系统。作为色谱工 作站，PeakNet6可为单台仪器提供服务也可同时管理 多台仪器。软件可突出系统优势，具有强大的数据处 理能力、仪器控制能力、安全性以及网络工作能力。 BioLC--测定生物分子的强有力的方法 糖类和糖蛋白的分析 戴安公司的 CarboPac高效阴离子交换柱（HPAE）配 合脉冲安培检测器（PAD）彻底改变了对糖类的测定。 作为测定由各种配糖体（如糖酯、糖肽、低聚糖或氨 基葡萄糖）和其它生物源派生来的糖类的最佳方法， 无需衍生的HPAE-PAD法已得到广泛认可。 BioLC生物液用于可靠地分析糖基化蛋白，制药中的糖 类高聚物以及发酵肉汤中的简单糖类。 系统配 置 GS50梯度泵，PEEK材料，真空脱 气 ED50电化学检测器，检测 池 色谱柱参考戴安公司在生物和制药方面色谱柱应用的 指南 高分离度分析蛋白质和肽 对于离子交换和反相分离来说，BioLC是最优的设计。 非金属流路可耐缓冲液的腐蚀。此外由于BioLC可在典 型的HPLC的压力下工作，使其成为分析肽的极好工 具。 GS50泵可灵活地选择微孔或标准孔流速，这两种流速 均可输送高精度和高重现性的梯度淋洗液。戴安公司 的ProPac柱一次进样即可快速分离小到一个氨基酸的 脱酰胺基变异体，MAbs，以及其它差异蛋白质。 PDA-100是高分辨率和高灵敏度的光谱检测器，可用 于蛋白质和肽的定性和定量分析。 系统配置 GS50梯度泵，PEEK材料，真空脱气 PDA-100光电二极管阵列检测器，PEEK材料检测 池， AD25光度检测器，PEEK材料检测池， 色谱柱参考戴安公司在生物和制药方面色谱柱应用的 指南 特种核酸的测定 使用戴安独家的DNAPac®柱技术的生物液相BioLC，给 DNA的分离带来了前所未有的高分辨率。应用戴安 MicroBead™技术的DNAPac®柱，可分离碱基数从1-60 的低(聚)核苷酸。可在多种变性条件下，如高温 （80℃以上），Chaotropic 试剂和高PH值（12.4） 条件下，进行对低(聚)核苷酸的筛分完全消除了次级 结构的影响并判定未序列。 系统配 置 GS50梯度泵，PEEK材料，真空脱 气 PDA-100光电二极管阵列检测器，PEEK材料检测 池， AD25光度检测器，PEEK材料检测池， 色谱柱参考戴安公司在生物和制药方面色谱柱应用的 指南 灵敏的生物小分子的分析 BioLC对复杂基体中的生物小分子的分离和定量有优 势。 诸如有机酸，无机离子，抗生素和维生素类的这些分 析物，均能通过配有光度检测器、电导检测器或安培 检测的BioLC系统，以特定的流速和灵敏度进行测定。 系统配 置 GS50梯度泵，PEEK材料，真空脱 气 ED50电化学检测 器 电导池， DS3 ASRS-ULTRA（4mm）阴离子自动再生抑制 器 色谱柱参考戴安公司在生物和制药方面色谱柱应用的 指南 不需衍生的氨基酸直接分析 BioLC AAA直接氨基酸分析仪在氨基酸测定方面从配 置上进行了的革新。与现有方法不同，采用高灵敏度 的脉冲安培检测器（IPAD）直接测定的方法，无需柱 前和柱后的衍生，用于测定初级和次级氨基酸，氨基 糖类，含磷氨基酸，以及含硫氨基酸（如磺基丙氨 酸）中的常见氧化产物，检测限可达10-15~10-10摩 尔 ，与茚三酮法相比，灵敏度至少高出50倍。 系统配置 带有真空脱气的微孔PEEK GP50泵 ED50电化学检测器（包括PH参比电极） 氨基酸金工作电极 AAA-DirectTM----不需衍生的氨基酸直接分析技术 技术特点 氨基酸和氨基糖高分辨分离。 阴离子交换分离完全消除了基体影响。 一次进样氨基酸和碳水化合物同时出峰。 灵敏度高，检出限可达pmol, 至少比茚三酮方法高出 50倍。 对于大部分氨基酸, 检测器响应的线性超过三个数量 级。 可靠的定量分析-所测数据与阳离子交换/茚三酮氨基 酸分析方法所测的数据完全吻合。 可以直接地检测尚很难检测的氨基酸，如：色氨酸， 半胱氨酸，胱氨酸，蛋氨酸和磷酸氨基酸。 对于如胶原蛋白之类的复杂蛋白样品来说,是一种更快 速、更便捷的方法。 样品前处理简单。 可以适用于任何常用的水解过程,如6M HCI, 4M甲基 磺酸(MSA),过甲酸氧化/6M HCI,以及4.2M NaOH。 脉冲安培检测器（IPAD）的直接检测,免除了费时的样 品衍生过程及昂贵的试剂消耗.样品只需稀释和过滤， 图1所示为100pmol标样的典型谱图。 最佳保留时间和检测响应值 对氨基酸标准溶液及诸如细胞培养液,发酵液和蛋 白水解液等实际样品的分析已证明了,该系统具有优异 的检测器响应和保留时间稳定性.图2所示是氨基酸标 准混合液连续进样100次以上检测器响应值.图3和图4 分别为细胞培养液介质进样100次以上保留时间和检测 器响应的重现性. 稳定可靠的分析柱技术 AminoPac PA10微孔柱是专门用于氨基酸分离的选择 性高效阴离子交换柱.与以往的离子交换柱相比,这种 柱子有很多优点: 梯度淋洗后快速再平衡。 优异的传质特征,分离效果好。 耐酸碱(PH范围:0-14) 机械稳定性(4000psi)和化学稳定性高,延长柱子寿 命。 复杂基质进样后,可以用常规有机溶剂快速清洗 常用的梯度程序 图5所示为分离22种常见氨基酸的标准三元梯度. (水,0..25M氢氧化钠,1.0M醋酸钠).如果有特殊应用, 梯度程序可以自由设定. 适用于所有标准水解过程 四种常用的水解过程,如6M HCI, 4M MSA,过甲酸氧 化/6M HCI和4.2M NaOH,都适用于AAA-Direct氨基酸 分析系统.另外,由于色谱保留机理是离子交 换,AminoPac PA10对中性样品组分没有保留,这样就 完全消除了基体的影响. 同时测定氨基酸，氨基糖和碳水化合物 蛋白水解物中通常存在氨基糖。AminoPac PA10对氨 基糖亦有很好的响应，因此在测定氨基酸的同时可测 定氨基糖（图6）。 生化工业中，AAA-Direct氨基酸分析系统已经以实验 和在线方式被用于发酵池和大规模细胞培养液中氨基 酸和氨基糖的直接监控.这就为蛋白和肽治疗过程中氨 基酸和碳水营养物的监控提供了更简便的方法. 图7所示为细胞培养液的分析结果.插图为分析中所用 IPAD的波形,图中蓝线为积分阶段.采用此波形,能同 时测定样品中常见的氨基糖和氨基酸.如果积分阶段移 向更低的电压,羟氨基酸的影响被抑制.同一样品中的 碳水化合物和羟基氨基酸能被选择性地检测. 图8所示是大肠杆菌发酵液随时间变化的一系列谱图的 叠加.各种氨基酸随时间的变化一目了然.这对生产过 程的最优化非常有利，因为基本氨基酸的量可以根据 需要简便地控制和调整. 蛋白质和肽水解产物 运用AAA-Direct氨基酸分析系统,已经成功地分析了 包括胶原蛋白在内的各种蛋白质和肽水解产物.检验数 据与柱后茚三酮分析法的结果完全一致.图9所示为胶 原蛋白水解物的色谱图。尤其值得一提的是，所有氨 基酸的定量只需一次进样。 食品和饮料分析 该系统已经用于多种食品和饮料样品的分析，包括未 加工和加工过的肉类水解物,果汁和蔬菜汁,啤酒和红 酒。 图10所示为多种不同的未加工肉类经过MSA水解后的分 析谱图.图11所示为红酒中的游离氨基酸测定结果。样 品前处理非常简单,因为IPAD的灵敏度非常高,允许样 品稀释1000倍,甚至更高。 图12所示为AAA对胡萝卜汁中的氨基酸和糖的测定结 果，胡萝卜榨汁后经过滤稀释即可直接进样分析 对尚难测定的色氨酸直接分析 色氨酸在常用的HCI水解过程中会分解,影响测定结果. 而NaOH水解过程在柱前、柱后衍生分析方法中又比较 麻烦,因为水解产物必须经中和、稀释。.因此在阳离 子交换/茚三酮方法中势必会消耗大量样品.另外,在衍 生过程中产生的大量NaC1干扰,也是个问题.在AAA- Direct氨基酸分析系统中，因为用NaOH作为淋洗液， 色氨酸经NaOH后可直接进样分析。样品的准备非常简 单，不需中和反应。进样前只需进行水解产物的稀释 和过滤 图13和14分别表示采用几种不同的水解方法对 大豆粉和牛初乳水解后分析结果的比较，其结果相 近。

第一章 无机阴离子与阳离子（2） 食品中的过渡金属 食品中的过渡金属经常通过原子吸收或ICP方法检测， 而带有柱后衍生装置及可见检测器的离子色谱在提供 性能信息方面则是更具吸引力的检测方法。该技术与 螯和离子色谱结合的新拓展是通过基体消除和预浓缩 过程，消除钙、镁离子的影响，而这些成分的存在一 直是困扰原子吸收和ICP技术的问题。螯和离子色谱允 许在这些成分高浓度存在的条件下检测ppb含量的过渡 金属。 杏干中的亚硫酸盐 亚硫酸盐作为防腐剂常被用在食品和饮料中，很多国 家都有严格的水平限制。有报告报道，亚硫酸盐会引 起个别神经性过敏反应。美国食品药品管理局限定产 品中含有10mg/Kg或高于该指标的亚硫酸盐时必须在 产品的标签上注明含量。图中所示是Kim,H.J和 Kim,Y.K.J.的工作，脉冲安培检测器比直流安培检测 器更有利，因为它可大大提高检测器响应的重复性。 样品经用淋洗液稀释和匀质后进样。 火腿中的硝酸盐和亚硝酸盐 常用的检测食品中硝酸盐和亚硝酸盐的方法费时，且 涉及到使用蛋白沉淀剂或固相萃取等一系列的样品处 理步骤，这里使用的方法大大简化了样品的处理过 程，匀浆后的肉类样品在70-80oC的水中萃取15分 钟，然后离心过滤，等分滤液不需进一步净化即可进 样，在每次运行后，用100mM的氢氧化纳清洗系统5分 钟，以防止柱子污染。 IonPacAS11是此项应用最理想的分析柱，因为它不仅 可以分离硝酸盐和亚硝酸盐，还可以对带有对紫外吸 收有潜在干扰的化合物基质的分析物进行分离，这些 物质会从柱子的空隙中淋洗掉。 多聚磷酸盐 多聚磷酸盐作为食品添加剂被广泛地应用在果汁和罐 头食品中以保证食品不褪色、不损失香味，同样还被 用来处理火腿、保鲜蔬菜、作奶酪的乳液稳定剂和冷 冻食品的保湿剂，多聚磷酸盐在上述的应用中表现的 功能主要取决于它的离解能和缓冲能力，这与多聚磷 酸盐的分子链长度有关。 商品多聚磷酸盐是不同链长的聚磷酸盐的混合物，最 广泛被用来确定这些产品特性的检测方法是通过端基 滴定来确定平均链长。 微孔离子色谱正被逐渐接受为批量生产时各批之间的 质控手段，由于它提供了实际链长分布的“指纹图” 而被用来在未知样品中确定多聚磷酸盐产物。所示色 谱图为两个均为50%的六聚磷酸盐样品的检测结果，两 个样品是来自同一批（不同次）的干粉，但生产出的 奶酪具有略微不同的性质。这些色谱图表示了多聚磷 酸盐在生产过程中临界点的不同水解度并精确定位问 题的所在，以方便确定解决问题的方案。 注：由于制版问题，不能刊登图谱，感兴趣者可与我 们联系。liujing@dionex.com.cn

                             技术译文离子色谱-一种分析啤酒的全能方法

                             ---节选译自戴安应用文献AN46
简介：离子色谱法是定性及定量分析溶液中离子的有
效手段。尽管已有多种方法用于啤酒分析，其中包括
气相色谱法，高效液相色谱法和湿化学法，离子色谱
法正在迅速成为另一种方法。
啤酒工业感兴趣的化合物的范围涉及了无机离子，有
机醇，提供饮料苦味和总体口味的酒花苦味物质、蛋
白质、碳水化合物和用来监控发酵程度的醇类。在保
证啤酒制品质量的同时，这种方法也用来测定防腐剂
和色素的含量。
酿制啤酒的第一步是用温水浸泡大麦，有时会添加其
他谷物，在大麦中的酵母会把谷物中的淀粉分解为葡
萄糖、麦芽糖和其他低聚糖和高聚糖，这就是发酵的
过程，得到的溶液就是甜醪，上述麦芽汁加入酒花和
酵母后，较小的糖类就发酵为醇类，因为啤酒中各种
成分的浓度、化学行为、分子量范围都有不同，这就
使区分和测定啤酒成分变得困难。离子色谱法提供了
一种监控发酵过程和分析最终产品中以上各种复杂化
合物的方法。
本篇文献介绍了使用离子交换和离子排斥色谱分别测
定发酵过程中的五类物质，包括碳水化合物，醇类，
有机酸，无机阴离子，无机阳离子，此方法中使用了
安培法和电导法两种电化学检测方法。










图一 使用离子交换配合安培检测分离麦芽汁里可醇解
糖类图二 使用离
子交换配合安培检测分离一种美国啤酒中的单糖、二
糖和三糖









图三 离子交换色谱配合脉冲安培检测分离一种美国啤
酒中麦芽寡糖，图四 离子排斥色
谱配合脉冲安培检测分离一种美国啤酒中的乙醇和甘
油
包括葡萄糖、麦芽三糖、麦芽四糖直至麦芽九糖










图五 分离British stoat 啤酒中的有机
酸
图六 离子交换色谱分离美国爱尔啤酒中无
机阴离子和有机酸










图七 离子交换色谱美国熟啤酒中的阴离子