粉晶毛细管模式样品进样器

关于手动进样的重现性问题，我一直存在疑惑。 本来在气相版已经发过了，为了更加广泛的调查，在这边也发一个。版主别砍我啊。对于填充柱和大口径毛细管不分流，重现性一般3%以内，这个基本上是没有太大疑问的。对于毛细管柱分流进样模式，手动进样的重现性众说纷纭。有的说偏差很大，最大能插一倍，有的说偏差百分之一二十，有的说熟练的话也能到3%以内，更有甚者，说练习一个月之后达到了0.5%，比自动进样器还要好。虽然手动进样确实与操作熟练程度关系很大，而且仪器性能、色谱条件、样品性质的差异也都会影响重现性，但是从普遍意义上讲，总应该有个比较正常的范围吧，或者说应该有个类似于中位数、平均值之类的特征值吧。所以希望用过手动几样的朋友们畅所欲言，把自己的情况说一下，样本量大了，应该是具有统计意义的。 .首先说我自己的情况用过山东瑞虹7820和杭州科晓1690的分流进样，RSD一般很难到10%以内，如果做3~5针，有时候能碰巧比较接近，但是如果连续做很多针，经常能碰到超过平均值百分之二三十的数据，总体平均下来一般10%以上或者接近10%。安捷伦6890的SPL进样也经常用，重现性略为好一些，但是要完全随机连续做，不挑数据的话，也只能到10%左右或者5~10%。只有在样品最适宜、进样口维护完美、操作十分熟练的的情况下才能做到3%以下

关于手动进样的重现性问题，我一直存在疑惑。对于填充柱和大口径毛细管不分流，重现性一般3%以内，这个基本上是没有太大疑问的。对于毛细管柱分流进样模式，手动进样的重现性众说纷纭。有的说偏差很大，最大能插一倍，有的说偏差百分之一二十，有的说熟练的话也能到3%以内，更有甚者，说练习一个月之后达到了0.5%，比自动进样器还要好。虽然手动进样确实与操作熟练程度关系很大，而且仪器性能、色谱条件、样品性质的差异也都会影响重现性，但是从普遍意义上讲，总应该有个比较正常的范围吧，或者说应该有个类似于中位数、平均值之类的特征值吧。所以希望用过手动几样的朋友们畅所欲言，把自己的情况说一下，样本量大了，应该是具有统计意义的。.首先说我自己的情况用过山东瑞虹7820和杭州科晓1690的分流进样，RSD一般很难到10%以内，如果做3~5针，有时候能碰巧比较接近，但是如果连续做很多针，经常能碰到超过平均值百分之二三十的数据，总体平均下来一般10%以上或者接近10%。安捷伦6890的SPL进样也经常用，重现性略为好一些，但是要完全随机连续做，不挑数据的话，也只能到10%左右或者5~10%。只有在样品最适宜、进样口维护完美、操作十分熟练的的情况下才能做到3%以下

目前，毛细管电泳的分离模式有以下几种。　　(1)毛细管区带电泳，用以分析带电溶质。为了降低电渗流和吸附现象，可将毛细管内壁涂层。　　(2)毛细管凝胶电泳，在毛细管中装入单体，引发聚合形成凝胶，主要用于测定蛋白质、DNA等大分子化合物。另有将聚合物溶液等具有筛分作用的物质，如葡聚糖、聚环氧乙烷，装人毛细管中进行分析，称毛细管无胶筛分电泳，故有时将此种模式总称为毛细管筛分电泳，下分为凝胶和无胶筛分两类。　　(3)胶束电动毛细管色谱，在缓冲液中加入离子型表面活性剂如十二烷基硫酸钠，形成胶束，被分离物质在水相和胶束相(准固定相)之间发生分配并随电渗流在毛细管内迁移，达到分离。本模式能用于中性物质的分离。　　(4)亲和毛细管电泳，在毛细管内壁涂布或在凝胶中加入亲和配基，以亲和力的不同达到分离目的。　　(5)毛细管电色谱，是将HPLC的固定相填充到毛细管中或在毛细管内壁涂布固定相，以电渗流为流动相驱动力的色谱过程，此模式兼具电泳和液相色谱的分离机制。(6)毛细管等电聚焦电泳，是通过内壁涂层使电渗流减到最小，再将样品和两性电解质混合进样，两个电极槽中分别为酸和碱，加高电压后，在毛细管内建立了pH梯度，溶质在毛细管中迁移至各自的等电点，形成明显区带，聚焦后用压力或改变检测器末端电极槽储液的pH值使溶质通过检测器。　　(7)毛细管等速电泳，采用先导电解质和后继电解质，使溶质按其电泳倘度不同得以分离。　　以上各模式以(1)、(2)、(3)种应用较多。　　电极槽和毛细管内的溶液为缓冲液，可以加入有机溶剂作为改性剂，以及加入表面活性剂，称作运行缓冲液。运行缓冲液使用前应脱气。电泳谱中各成分的出峰时间称迁移时间。胶束电动毛细管色谱中的胶束相当于液相色谱的固定相，但它在毛细管内随电渗流迁移，故容量因子为无穷大的成分最终也随胶束流出。其他各种参数都与液相色谱所用的相同。