冷冻制备传输系统

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冷冻制备传输系统相关的厂商

  • 上海纯华生物科技有限公司 金牌4年
    400-860-5168转4572
    为了更好服务于第三方检测机构和CRO企业，国家级仪器重大专项的承担者上海科哲生化科技有限公司将下属色谱事业部分立，成立了上海纯华生物科技公司，上海纯华生物科技有限公司集高效液相色谱、制备液相系统、蒸发光检测器、荧光检测器、多维液相等产品于一体，具有独步国内的荧光检测器技术，对于黄曲霉毒素、多氯联苯、维生素等荧光物质检测可提供完整的解决方案，是第三方检测机构最实惠的选择。
    主营产品：
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  • 深圳市吉美斯制冷设备有限公司
    深圳市吉美斯制冷设备有限公司从事温度控制系统工程有10多年历史了。为了更好 的服务客户先后在深圳，天津，南宁，广州，上海，重庆等地区成 立多个办事处服务点。以生产冷水机,冷冻机,冰水机,冷水机组,冰水机组,冷冻机 组,工业冷水机,水冷机,工业冷冻机,水冷式冷水机,风冷式冷水机,制冷机,螺杆冷 水机,螺杆冷冻机,螺杆冰水机、冷风机、低温螺杆机、超低温冷冻机、冷热一体 机、冷油机，加热器和其它非标 温度控制设备。公司拥有最先进的管理制度，一流的技术力量，专业资深的技术团队，可根 据每一位顾客要求，量身定制最实用、最完美、最经济的技术方案，以最热诚的 态度，最专业贴心的技术，服务每一位顾客，帮顾客解决控温问题。
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  • 深圳市瑞雪制冷设备有限公司
    深圳市瑞雪制冷设备有限公司是一家专业生产制造冷水机、低温冷冻机、螺杆式冷水机、开放式冷水机、模温机、食品速冻机、超低温冰箱、冷库及工业工艺性空气调节等工业制冷设备、商业制冷设备的专业厂家。公司集设计、生产、制造、销售、维修服务为一体的综合性企业。公司产品质量卓越、工艺严谨、外型美观、价格优惠。并可根据用户实际需求，提供各种非标制冷设备的设计、生产，并提供周详的整体规划设计及工程安装、维修保养。 我公司本着“低温绿色制冷、高效节能环保”的研发设计思路，整合欧美国家先进制冷技术.结合国际知名品牌制冷元件（如德国比泽尔Bitzer、美国谷轮Copeland、台湾汉钟Hanbell.丹佛斯Danfoss、ALCO、美国merson），研发高效节能型中央空调机组 工业冷水机组（5℃～20℃）、中低温冷水机（-5℃～-10℃），螺杆式盐水冷冻机组（-15℃～-35℃）、螺杆式乙二醇冷冻机组（-20℃～-30℃）、混凝土冷却、搅拌冷水机组（+7℃～-2℃）、工业用冷（热）水机组（7℃～+80℃）、超低温水产品速冻机组（-35℃～-70℃）、复叠式冷冻机组（-45℃～-80℃）、深冷机组（-80℃～-110℃）、超低温冷冻冷藏库（-35℃～-70℃）等制冷主机；工艺性空气调节有：净化型恒温恒湿空调、全新风恒温恒湿空调，低温空调（温度范围和精度：-20℃～10±1℃）、酒窖恒温恒湿空调（湿度范围和精度：30～90±5％）（温度范围和精度：10℃～18℃±1℃）等空气处理设备；以及低温冷阱（-100℃至-145℃）、超低温冰箱（-100℃至-145℃）、等各种高低温环境试验室/箱等环境模拟试验设备。公司广泛用于酒店、办公楼、医院、商场等大中型建筑的中央空调系统，有色金属冶金、化工及医药中间体、石油化工、塑胶、粮油、食品、机械、医药、电子、建筑、空气分离等生产加工的工艺冷源。同时公司承接各种工业生产工艺冷却、低温冷冻冷藏保鲜库、食用菌库房制冷设备、冷却工程等制冷、制热工程的设计、安装施工 。 “以诚为本、顾客至上，质量与信誉并重”是瑞雪公司永恒的经营理念，严格遵循ISO9001、ISO14001、CE、CCC等质量管理体系，为实现高品质的产品提供了有力保障。瑞雪制冷生产的产品已服务于中国20多个省份的100多个城市，为各行各业提供最优性价比的产品及高效服务，在节能环保、新能源、生物制药、光电科技、海洋工程、新材料、高端装备制造配套、化工化纤、塑料塑胶、食品、航空航天、军工、研究院所、涂装、电镀、电子、汽车等行业得到了广泛的应用，已成为工业制冷行业化系统解决方案的专家，得到广大客户的青睐、推荐与使用。瑞雪制冷以技术为核心，以产品创新为导向，以全程高效服务客户为宗旨，以不断满足客户需求为目标，为推动中国工业制冷事业不断创新而奋斗。
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冷冻制备传输系统相关的仪器

  • 上海纯华PrepChromaster-8000型高压制备色谱系统 400-860-5168转4572
    PrepChromaster-8000型高压制备色谱系统-----专为高通量纯化打造 为了满足中药与天然产物分离纯化领域的需求，推出了PrepChromaster品牌，为该领域提供制备色谱解决方案级产品，是中药与天然产物分离纯化实验室的理想选择。PrepChromaster-8000型是一款连接快速色谱和传统高压制备高效液相色谱的二元制备色谱设备，主要应用于药物活性成分、天然产物研究，合成化学分离纯化，在节省制备成本的同时极大地提高了分离效率。仪器特点1、本系统最大制备量可达克级，可适配10-100mm直径的各类色谱柱；2、本系统检测器使用全波长紫外-可见检测器，可同时选用4个不同检测波长3、本系统可使用Flash柱，支持各种级别的Flash低压分离纯化；4、本系统可以使用高压不锈钢柱，支持300bar以内高压级别的分离；5、本系统支持液体或固体样品上样，可以避免贮备过多的定量环；6、具有压力显示、报警、过压保护功能，实时监控泵的压力波动；7、本系统具有全波长光谱扫描功能，可检测190nm-850nm范围任意四个波长信号；8、带有光源自检功能，管理光源寿命，提醒及时更换；9、带有单色仪自校正功能，波长准确性高；10、进样方式独特设计，防止样品与溶剂扩散；11、本系统采用先进的进样技术，两种进样模式可选，进样时间短，避免样品残留和堵塞；12、高速准确的阀切换，避免样品的损失，提高回收率。13、本系统可以使用小粒度填料的不锈钢柱和商品化的Flash柱；14、独立的进样和馏分收集流路，避免交叉污染；15、智能馏分收集器可按体积、阈值、时间和色谱峰收集馏分；16、本系统提供多种标准试管架和试管，用户可自定义试管架，标配孔径18mm试管架；17、软件具有自动进样、梯度、色谱图、馏分收集图、设备状态同图显示的功能；18、软件具有自动进样状态显示与控制功能，可显示阀、注射泵、进样臂的状态；19、软件支持梯度，程序设定功能，具有阶梯、线性、点-拖式梯度曲线；20、软件支持智能馏分收集，具有时间、阈值、峰值、手动等多种收集方式；21、软件支持馏分索引功能，实时显示馏分收集位置与对应的色谱峰位置；22、软件支持色谱分峰与定量功能、审计追踪、数据管理、用户管理、个人管理等功能；23、仪器操作有软件控制，分离纯化参数都可以在线更改；24、软件中文界面，模块化设计，便于学习和操作，符合中国用户使用习惯。 仪器组成1、高压二元梯度泵系统；2、混合器；3、四波长UV-VIS检测器；4、自动进样器馏分收集一体机；5、溶剂槽；6、模块化液相工作站；7、电脑 ； 技术指标泵1、流量范围：0～200mL/min单泵，0～400mL/min双泵；2、压力范围：标准300bar；紫外检测器1、检测器范围：190～850nm；2、检测器光源：氘灯-钨灯组合光源；3、波长精度：±1nm；重复性0.2nm；4、检测方式：UV-VIS检测器，4波长实时显示；自动进样模块1、定量环：10mL；2、进样位数：108位；3、试管规格：13*100mm；馏分收集模块1、馏分收集容器：400位（标配）；2、试管规格：18*180mm，（其它规格可定制）； 可选配件1、 蒸发光散射检测器；2、二极管阵列检测器； 由于技术不断进步，本公司保留设计更改之权利，更改恕不通知，敬请谅解。
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    厂商： 上海纯华生物科技有限公司
    品牌： 纯华/CHUNHUA
    型号： PrepChromaster-8000
    价格： 20万 - 30万元
  • 冷冻传输系统gatanALTO 1000 400-860-2797
    GATAN Alto1000 冷冻传输系统品牌： GATAN 名称型号：GATAN冷冻传输系统Alto1000制造商： GATAN公司经销商：欧波同有限公司产品综合介绍： 产品功能介绍扫描电镜工作者都面临着一个不能回避的事实，就是所有生命科学、石油地质学以及许多材料科学的样品都含有液体成分。很多动植物组织含水量达到98%，这是扫描电镜工作者最难对付的样品问题。使用扫描电镜冷冻传输系统就是克服样品含水问题的一个快速、可靠和有效的方法，它能帮助扫描电镜工作者获得包含液体成分样品的真实样品形貌。 品牌介绍美国GATAN公司成立于1964年并于70年代末进入中国市场。GATAN公司以其产品的高性能及技术的先进性在全球电镜界享有极高声誉。作为世界领先的设计和制造用于增强和拓展电子显微镜功能的附件厂商，其产品涵盖了从样品制备到成像、分析等所有步骤的需求。产品应用范围包括材料科学、生命科学、地球物理学、电子学，能源科学等领域， 客户范围涵盖全球的科研院所，高校，各类检测机构及大型工业企业实验室，并且在国际科学研究领域得到了广泛认同。经销商介绍欧波同有限公司是中国领先的微纳米技术服务供应商，是一家以外资企业作为投资背景的高新技术企业，总部位于香港，分别在北京、上海、辽宁、山东等地设有分公司和办事处。作为蔡司电子显微镜、GATAN扫描电子显微镜制样设备及附属分析设备在中国地区最重要的战略合作伙伴，公司秉承“打造国内最具影响力的仪器销售品牌”的经营理念，与蔡司，GATAN品牌强强联合，正在为数以万计的中国用户提供高品质的产品与国际尖端技术服务。产品主要技术特点：ALTO 1000系列是一个令人激动的冷冻扫描电镜新概念产品。根据客户的应用和需求，可量身定做最适合的冷冻系统配置。尽管你拍摄扫描电镜图像的样品对真空不敏感，但有可能会受到电子束热损伤，或者你希望对含水材料进行深入研究，包括内部超微结构分析，ALTO 1000系列中总有一款适合您。两个ALTO 1000系列产品可供选择（ALTO1000D和ALTO1000E），模块化的设计及各种附件为今后因研究需求的变化而升级系统提供了方便。 ALTO1000 D和ALTO1000 E中，内嵌式液氮肼与前处理室一体化，保证了低温和无污染操作。在液氮肼上方配有一个冷台，保证了样品在处理过程中的低温环境。这两种型号中还配有冷冻断裂刀具，ALTO 1000 E还包含了多用途的磁控喷镀系统，多种喷镀金属可供选择。轻巧的ALTO 1000系列 SEM周边的空间越来越紧张，GATAN很自豪地设计出世界上最紧凑的冷冻传输系统。体积虽小，使用却依然方便。由于出色的照明系统，样品传输的过程中可视性很好，小体积的前处理室确保快速的达到真空状态。 您使用的是什么类型的扫描电镜?无论是低或高真空电镜，或FIB + SEM系统，ALTO 1000系列都可以为您量身定制，达到最佳使用效果 前处理室 ALTO 1000具有一个设计精密的前处理室直接连接在SEM上。前处理室配有独立的专用机械泵。 由于前级窗口、高亮度白色LED和大直径的球阀的配置，确保了样品在传送的过程中具有优越的可视性。 轻巧的ALTO 1000系列! SEM周边的空间越来越紧张，Gatan很自豪地设计出世界上最紧凑的冷冻传输系统。体积虽小，使用却依然方便。由于出色的照明系统，样品传输的过程中可视性很好，小体积的前处理室确保快速的达到真空状态。 您使用的是什么类型的扫描电镜?无论是低或高真空电镜，或FIB + SEM系统，ALTO 1000系列都可以为您量身定制，达到最佳使用效果。 对于场发射扫描电镜高效冷冻传输配置我们推荐ALTO 2500。 前处理室 ALTO 1000具有一个设计精密的前处理室直接连接在SEM上。前处理室配有独立的专用机械泵。 由于前级窗口、高亮度白色LED和大直径的球阀的配置，确保了样品在传送的过程中具有优越的可视性。 ALTO1000 D和ALTO1000 E中，内嵌式液氮肼与前处理室一体化，保证了低温和无污染操作。在液氮肼上方配有一个冷台，保证了样品在处理过程中的低温环境。这两种型号中还配有冷冻断裂刀具，ALTO 1000 E还包含了多用途的磁控喷镀系统，多种喷镀金属可供选择。样品座 随ALTO 1000系列配备了标准样品座，它可以装载10mm的铝制样品托，利用冷冻胶可以很容易地将样品粘在上面。 样品座的选择范围很大，如带嵌入式铆钉的，和带夹具的用来固定体积较大的样品。样品座被真空传输装置推送至ALTO 1000的前处理室，随后再到达SEM样品室。液氮泥和真空传输装置 在某些应用中，在样品放入前处理室之前需要快速的冷冻。在这种要求下，作为高级配置的‘D' 和‘E' 系列配备了‘液氮泥加工站’和‘真空传输装置’(VTD)。液氮泥加工站与机械泵相连并制造出液氮泥，一种介于液体和固定之间的形态。这种比液氮温度更低的环境能够迅速冷冻样品，保证其超微结构不被破坏并减少冰晶生成。VTD使样品在液氮泥加工站和前处理室之间传输并维持真空状态(避免了冰霜污染)。 ALTO 1000的真空传输装置设计紧凑、轻质并配有一个大面积的可视窗，为用户将样品从前处理室传输到SEM室的冷台上提供了良好的可视性。样品座 随ALTO 1000系列配备了标准样品座，它可以装载10mm的铝制样品托，利用冷冻胶可以很容易地将样品粘在上面。样品座的选择范围很大，如带嵌入式铆钉的，和带夹具的用来固定体积较大的样品。样品座被真空传输装置推送至ALTO 1000的前处理室，随后再到达SEM样品室。液氮泥和真空传输装置 在某些应用中，在样品放入前处理室之前需要快速的冷冻。在这种要求下，作为高级配置的‘D' 和‘E' 系列配备了‘液氮泥加工站’和‘真空传输装置’(VTD)。液氮泥加工站与机械泵相连并制造出液氮泥，一种介于液体和固定之间的形态。这种比液氮温度更低的环境能够迅速冷冻样品，保证其超微结构不被破坏并减少冰晶生成。VTD使样品在液氮泥加工站和前处理室之间传输并维持真空状态(避免了冰霜污染)。 ALTO 1000的真空传输装置设计紧凑、轻质并配有一个大面积的可视窗，为用户将样品从前处理室传输到SEM室的冷台上提供了良好的可视性。“液氮泥”制备工作站系统控制 GATAN多年的冷冻系统设计和使用经验让我们意识到准确定位控制系统的重要性。只有手掌大小的键盘控制器，实时显示系统参数，操作简单，可放在任意使用方便的位置。 一些简单而直观的控件如前处理室和喷镀单元，都可与主要组件组合。简单而安全的功能特性的关键是每个组件间互相通讯。这包含了与SEM相连接的部分，保证了在样品传输过程中的操作安全性。安全特性整个系统提供了电子机械互锁，保证了在所有操作条件下用户和显微镜的安全性。 产品主要技术参数： 样品预处理装置液氮泥快速冷冻（-210℃）；冷源冷冻制备腔室含一体式液氮冷阱和冷台，扫描电镜冷台采用过冷氮气气冷，分体式液氮杜瓦只需6 L液氮，可连续提供扫描电镜冷台3 h连续工作时间；真空冷冻制备腔室，包括：机械泵，工作时冷冻制备腔室真空度优于10-3 mbar量级；多角度样品观察窗； 气锁阀门控制真空传递装置连接；球阀与扫描电镜样品室连接，具有电动开关和电动机械安全锁；样品处理包括断裂、升华、喷镀（ALTO1000E）等功能。标配冷冻断裂刀；可设定升华时间及温度，自动升华；真空传输装置设计紧凑小巧，使用方便，密封效果好。扫描电镜冷台和防污染装置低温氮气气冷扫描电镜冷台（-185℃ ~ + 50℃），温度稳定度为1℃；根据扫描电镜类型定制防污染装置，可设温度为 -190℃或更低；扫描电镜样品室内配置LED照明灯。高集成按键式控制板体积小，可方便的放置在触手可及的位置。 产品主要应用领域： ● 植物学、动物学和医学（如植物叶、根毛、花粉、冬虫夏草、动物器官组织等）● 食品原料（如牛奶、酵母等）● 脂类、聚合体、油漆和化妆品（如面霜、雪花膏、牙膏等）● 光束或电子束灵敏的材料(如：照相感光乳剂)● 石油地质学(泥、泥浆、油母岩等)● 液体、半液体和泡沫（啤酒花、冰淇淋、酸奶等）● 热敏半导体材料(如：低K材料) 哺乳动物肾脏细胞，示细胞核 面霜冷冻-FIB/SEM: 烟草叶片
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    厂商： 北京欧波同光学技术有限公司
    品牌： GATAN
    型号： ALTO 1000
    价格： 面议
  • 高分辨率扫描电镜冷冻传输装置Alto 2500 400-860-2797
    品牌： GATAN 名称型号：GATAN冷冻传输系统Alto2500制造商： GATAN公司经销商：欧波同有限公司 产品综合介绍： 产品功能介绍扫描电镜工作者都面临着一个不能回避的事实，就是所有生命科学、石油地质学以及许多材料科学的样品都含有液体成分。很多动植物组织含水量达到98%，这是扫描电镜工作者最难对付的样品问题。冷冻传输设备是一种将经过冷冻制样后的样品置入 SEM 样品室内，并维持样品低温状态的一种设备。它综合了制样、维持样品低温真空环境、在不破坏 SEM 真空前提下安全传送样品至SEM。是冷冻扫描电镜不可或缺的利器！品牌介绍美国GATAN公司成立于1964年并于70年代末进入中国市场。GATAN公司以其产品的高性能及技术的先进性在全球电镜界享有极高声誉。作为世界领先的设计和制造用于增强和拓展电子显微镜功能的附件厂商，其产品涵盖了从样品制备到成像、分析等所有步骤的需求。产品应用范围包括材料科学、生命科学、地球物理学、电子学，能源科学等领域， 客户范围涵盖全球的科研院所，高校，各类检测机构及大型工业企业实验室，并且在国际科学研究领域得到了广泛认同。经销商介绍欧波同有限公司是中国领先的微纳米技术服务供应商，是一家以外资企业作为投资背景的高新技术企业，总部位于香港，分别在北京、上海、辽宁、山东等地设有分公司和办事处。作为蔡司电子显微镜、GATAN扫描电子显微镜制样设备及附属分析设备在中国地区最重要的战略合作伙伴，公司秉承“打造国内最具影响力的仪器销售品牌”的经营理念，与蔡司，GATAN品牌强强联合，正在为数以万计的中国用户提供高品质的产品与国际尖端技术服务。产品主要技术特点： Alto 2500 是一款高分辨率的新一代冷冻传输系统，专为场发射扫描电镜（FE SEM）设计，是冷冻扫描电镜中的性能冠军。Alto 2500系统提供的制样技术包括快速冷冻（为了保持含水状态），真空传输（防止样品污染），冷冻断裂（展示内部微观结构），升华（净化非含水成分）和镀膜（允许高分辨表面成像和X-RAY分析）。Alto 2500冷冻前处理室 Alto 2500配备了专用的直接连在SEM上的前处理室。该高真空前处理室配有一个独立的且在工作中无振动产生的涡轮分子泵。前处理室高程度可视化有利于观察样品，同时室内装有灯管，配合双筒显微观察镜可以在处理样品过程中更好的观察样品。大容量一体式液氮冷肼设计，不仅保证看充足的低温供应和优异的低温环境，而且提供了无污染操作环境。冷肼上部装有一个冷台和防污染板，温度可分别达到-180℃和-190℃。利用样品台加热器可以使其升温，从而达到可控温度升华的目的。珀热电阻温度传感器能够灵敏的显示冷台和防污染板的温度。前处理室还配置了标准双功能冷冻断裂刀具，还可选配可控断裂深度的冷冻旋转断裂刀具。喷镀专为冷冻环境设计的磁控高性能喷镀单元，5nm的分辨率精度是获取高分辨率FEG-SEM图像的保证。该单元可选配互换式多点喷碳装置。真空传递装置 真空传递装置是一个紧凑而轻巧的装置，将经过快速冷冻工作台冷冻后的样品继续保持真空状态，并转移到前处理室和SEM样品室中。大面积玻璃窗保证了良好的可视性，可以让操作者顺利的将样品推送到冷台。 快速冷冻工作台冷冻工作台含有两个可制“液氮泥”的处理罐，不仅可以快速冷冻样品，而且还能装载预冷冻样品。可选配‘撞击式冻装置’。SEM冷台模块低温氮气高效冷却的冷台模块很易于SEM样品台楔合。利用内置可控温加热器和精确的温度感应器能轻易的控制温度在-185℃到+50℃之间。冷台模块冷气管具有一定的弯曲度，即使在通有冷却氮气的情况下冷台也可旋转一定的角度。在FIB+SEM中，可以设置最大倾斜角度。为了保证获得无污染的图像，在SEM样品室内配置了一个独立的根据不同SEM而定制的可显温度的防污染板。系统控制面板键盘控制器显示系统参数，只有手掌大小，操作简单。在使用过程中，控制器可以方便的放在任意方便的位置。安全特性整个系统提供了电子机械互锁，保证了操作者和显微镜的安全性。产品主要技术参数： 样品预处理装置液氮泥快速冷冻（-210℃）；多功能液氮泥工作站，有装载样品座的铰链式装置，可将冷冻预处理后的样品很方便的对接至真空传输装置上。前处理室的冷台由直接嵌入的液氮杜瓦直接冷却，确保最佳制冷效率和最低制冷速度；通过减震装置将分子泵直接耦合到前处理室上，确保最佳的抽气效率和样品室真空；冷源4-2-1 冷冻前处理室采用一体式液氮冷阱制冷，扫描电镜冷台采用过冷氮气气冷，分体式液氮杜瓦只需6 L液氮，可连续提供扫描电镜冷台3 h连续工作时间；高真空冷冻制备腔室，包括：前级机械泵，涡轮分子泵（70 L/S），工作时前处理室真空度优于10-6 mbar量级；多角度样品观察窗，×10倍和 ×20倍双目显微观察镜，气锁阀门控制真空传递装置连接，；球阀与扫描电镜样品室连接，具有电动开关和电动机械安全锁；一体式液氮冷阱及防污染装置，防污染装置可设温度为 -190℃；样品制备腔室内部液氮冷冻台（-180℃ ～ +100℃）及防污染装置；样品处理包括断裂、升华、喷镀功能。标配冷冻断裂刀；可设定升华时间及温度，自动升华；标配Pt靶材磁控喷镀，可选其他靶材（Au/Pd, W , Ir 和 Cr），自动喷镀，提供高纯氩气供给连接组件；真空传输装置设计紧凑小巧，使用方便，密封效果好。扫描电镜冷台和防污染装置低温氮气气冷扫描电镜冷台（-185℃ ~ + 50℃），温度稳定度为1℃；根据扫描电镜类型定制防污染装置，可设温度为 -190℃或更低；扫描电镜样品室内配置LED照明灯。高集成按键式控制板，体积小，可方便的放置在触手可及的位置。 产品主要应用领域： ● 植物学、动物学和医学（如植物叶、根毛、花粉、冬虫夏草、动物器官组织等）● 食品原料（如牛奶、酵母等）● 脂类、聚合体、油漆和化妆品（如面霜、雪花膏、牙膏等）● 光束或电子束灵敏的材料(如：照相感光乳剂)● 石油地质学(泥、泥浆、油母岩等)● 液体、半液体和泡沫（啤酒花、冰淇淋、酸奶等）● 热敏半导体材料(如：低K材料)喷镀前 喷镀后 真菌感染后的叶片表面 硅藻绿霉菌 冰淇淋 酸奶
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    厂商： 北京欧波同光学技术有限公司
    品牌： GATAN
    型号： Alto 2500
    价格： 面议
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  • 连接即未来——徕卡真空冷冻传输系统
    童艳丽今年的华东电镜会比以往时候来得更晚一些，经历了漫长的等待，终于10月23日在美丽的宜兴市东氿湖畔举行。会上徕卡纳米技术产品经理童艳丽以《连接即未来 徕卡真空冷冻传输系统》为题做了一个专题报告。报告结束后，老师们对此显示出浓厚的兴趣，纷纷前往展台咨询。徕卡真空冷冻传输系统之核心部分EM VCT500设计理念及其在冷冻扫描电镜，冷冻FIB，真空传输等三个应用方向的相关制样流程及应用实例。徕卡EM VCT500样品传输杆是真空冷冻传输系统的核心，它可以与徕卡各种电镜制样设备相连接，依据样品应用需求实现各种方式样品制备；另一方面，它可以与各种外部设备/分析仪器相连接，依据样品应用需求实现各种方式分析检测。 徕卡EM VCT500样品传输杆是一款货真价实的真空冷冻传输系统，可以长时间保持高真空和低温，并且通过一系列紧密的内部硬件设计及图形化操作界面，实现用户直觉化操作，轻松实现真空冷冻传输。 Cryo-SEM应用方向一个经典制样流程： 如需了解更多详情，可咨询徕卡客户服务热线：400-630-7761.
    时间： 2020-10-28
    作者： 徕卡显微系统
  • 清华团队开发基于电喷雾电离技术的冷冻电镜样品制备方法
    生物大分子的三维结构可以直观地揭示其生物学功能、细胞内进程以及探索其在疾病中发挥作用的方式。冷冻电镜（cryo-electron microscopy,cryo-EM）单颗粒分析技术通过对生物大分子的直接成像进行高分辨率结构测定，已成为结构生物学的重要研究手段。冷冻电镜单颗粒分析技术需要对生物大分子溶液的冷冻样品采集大量电子显微数据，以进行三维结构解析，因此高质量的冷冻样品制备在其中起着至关重要的作用。良好的制样方法需要能够简便地、可控地制备出接近理想状态的生物大分子冷冻样品。诺贝尔化学奖获得者雅克杜博切特（Jacques Dubochet）等人于1984年发明了冷冻样品制备的滤纸夹置法（Pipet-blot-plunge），至今仍然是冷冻电镜样品制备的主要手段。在这种传统的制样方法中，研究人员难以精确控制样品冰层厚度和大分子颗粒分布，导致冷冻样品的均一性和可重复性较差。越来越多的证据表明，在样品被冷冻之前的瞬间，生物大分子会吸附在超薄的液体层的气液界面（Air-water interface, AWI）上，导致生物大分子的颗粒结构损伤、变性或产生优势取向，减低了高分辨率冷冻电镜结构分析的效率和成功性。如何获取可重复的高质量的生物大分子冷冻样品仍然是冷冻电镜技术应用中的一个难题。图1. ESI-cryoPrep方法设计和仪器装置示意图4月25日，清华大学生命科学学院王宏伟课题组和精密仪器系欧阳证、周晓煜课题组在《自然方法学》（Nature Methods）在线发表了题为“电喷雾辅助的冷冻电镜样品制备方法用以减轻界面吸附效应”（Electrospray-assisted cryo-EM sample preparation to mitigate interfacial effects）的研究论文。研究采用非变性质谱（Native mass spectrometry, native MS）中广泛使用的电喷雾电离（Electrospray ionization, ESI）技术，设计并搭建了一种新型冷冻样品制备装置ESI-cryoPrep（图1），成功实现了无需滤纸夹吸的冷冻样品制备，并获得了多种生物大分子近原子分辨率的三维结构。研究表明，ESI-cryoPrep可以有效地将生物大分子颗粒完整嵌入无定形态薄层冰中，避免其吸附在空气-水、固体-水界面上，并对该装置制备生物大分子冷冻样品过程中的界面模型进行了机理阐释。ESI-cryoPrep以“软”电离技术ESI为基础，通过向蛋白溶液施加高电压形成大量带电的蛋白液滴，可以有效地减少蛋白的变性与碎裂。在电场的驱动下，带电液滴飞向电镜载网的过程中伴随着去溶剂化的进行；液滴表面的电荷密度激增至瑞利极限导致库仑裂变形成带电的次级液滴；这一过程循环往复直至液滴最终沉积在电镜载网上；收集到带电液滴的电镜载网被插入液氮冷却的液态乙烷中即可实现对液滴的快速冷冻。该过程完全省却了滤纸的夹吸，避免了滤纸材料对液体和生物大分子的影响。因为液滴表面的小分子离子形成了双电层效应，生物大分子与液体的界面被隔绝开，从而避免了生物大分子吸附到气液或固液界面上，更好地保持了生物大分子的天然结构。该研究首次对ESI液滴中的生物大分子的天然结构（Native structures）进行了直接测定，指导获得ESI的“软着陆”电离参数进行冷冻制样与非变性质谱分析。该工作是冷冻电镜与质谱技术的交叉融合，共同致力于解答生物大分子结构解析与分析的科学问题。研究团队在搭建的设备上，经过多次摸索确定了制备高质量冷冻样品的相关参数。这些参数既能满足保存高比例完整结构生物大分子颗粒的需求，又能促进带电液滴在附着电镜载网表面的扩展和浸润。研究团队运用优化的ESI-cryoPrep装置制备了五种生物大分子的高质量冷冻样品，获得了与目标生物大分子尺寸相对应的理想冰层厚度，并实现了全部测试样品70Sribosome、20Sproteasome、apo-ferritin、ACE2和streptavidin的高分辨率三维结构解析，分辨率分别为2.7[gf]c5[/gf]、2.0[gf]c5[/gf]、2.1[gf]c5[/gf]、3.3[gf]c5[/gf]和1.9[gf]c5[/gf]。研究团队对冷冻电镜数据进行了深入的挖掘与分析，发现与预期假设一致的结果。ESI-cryoPrep可以有效地将生物大分子颗粒完整嵌入无定形态冰的薄层中间，抑制目标生物大分子在空气-水或石墨烯-水界面的吸附（图2），从而避免蛋白质颗粒的结构损伤或者优势取向问题。研究工作提出了电荷残留模型，阐明了电喷雾电离产生的液滴表面的电荷不均匀分布保护蛋白质颗粒免于界面吸附的作用和机制。这种学科交叉的研究成果不仅将为冷冻电镜样品制备提供应用价值，还将对冷冻电镜技术和非变性质谱领域的交叉和发展产生积极影响，为更多创新应用开辟新的可能性。自主研发的高质量冷冻电镜样品制备装置，一方面可以缩短结构解析的漫长探索过程，更高效地获得高分辨三维结构，分析其作用机理；另一方面也提升了原创研发具有自主知识产权和高精尖技术的能力，减少对国外相关仪器和设备的依赖。图2.ESI-cryoPrep方法制备的冷冻样品中蛋白质颗粒在断层成像中的代表性空间分布清华大学生命科学学院2017级博士生杨梓和精密仪器系2018级博士生范菁津（已毕业）为该论文共同第一作者，清华大学生命科学学院教授王宏伟，精密仪器系教授欧阳证和副教授周晓煜为论文共同通讯作者。清华大学生命科学学院王家副研究员和范潇博士等为课题的启动和推进作出重要贡献。研究得到国家自然科学基金、腾讯基金会等的资助，并得到清华大学冷冻电镜中心和计算中心的技术支持。
    时间： 2024-05-13
    作者： dahua1981
  • 【瑞士步琦】喷雾干燥 & 冷冻干燥技术制备白细胞介素粉体研究
    喷雾干燥 & 冷冻干燥技术制备白细胞介素粉体研究趋化因子是一种小的(8-12 kDa)细胞因子，参与许多病理过程，因此是重要的靶点。它们通常由不同类型的细胞(如白细胞)分泌，并通过与同源 G 蛋白偶联受体的细胞表面结合来介导生物学效应。趋化因子配体和受体有 50 多种，根据其初级氨基酸序列的半胱氨酸残基排列进行分类和命名。趋化因子可用于(慢性)炎症性疾病、癌症和感染性疾病的治疗应用。目前，市场上有两种基于白介素的产品，即重组白介素-11预白介素(Neumega)和重组人白细胞介素-2醛白介素(Proleukin)。Neumega 是一种由大肠杆菌重组 DNA 技术产生的血小板生成生长因子，可静脉给药。皮下应用的 Proleukin 是一种淋巴因子，也是通过转基因大肠杆菌的重组 DNA 技术产生的。为了增加储存的稳定性、保持药物的生物活性，Neumega 和 Proleukin 都采用冷冻干燥的工艺，制成冻干粉制剂使用。虽然冷冻干燥（FD）是一种广泛使用的技术，具有多种优点，可以快速、温和干燥，但喷雾干燥(SD)可以缩短工艺周期，并可以在常压下进行加热处理。同时，颗粒的性质，如粒径、固体状态和残余水含量可以通过参数进行调节。这里必须指出的是，蛋白质的变性或/和展开也可能发生在 SD 过程中，SD 过程的放大是复杂和高成本的。SD 的另一个重要挑战是粉体回收率低于 100%，这对于高成本疗法和工艺开发来说是一个问题，特别是放大到最终设备上。对于白细胞介素，已经有了一些成功的冷冻干燥研究案例。然而，据我们所知，SD 作为一种替代方法尚未被研究过。这项工作的目的是开发一种 SD 工艺，使模型白介素以一种保留白介素结合亲和力和生物活性的方式干燥。为此，我们使用了模型白细胞介素，探索喷雾干燥工艺的潜在可行性，并对比分析冷冻干燥和喷雾干燥工艺对白细胞介素活性影响。1材料在磷酸盐缓冲盐水中提供野生型CXCL8（CXCL8，72个氨基酸，8.4kDa）、CXCL8的突变体（dnCXCL8，66个氨基酸，7.7kDa）等各种试剂。将蛋白质溶液用PBS稀释至最终蛋白质浓度为1mg/ml，即1% w/w。冷冻干燥机喷雾干燥仪：BUCHI B-90 HP▲ 步琦纳米喷雾干燥仪 B-90 HP2实验过程配方溶液分别采用如下冻干程序（表1）和喷干程序（表2）进行样品制备。干燥后的样品在 4-8℃ 的氩气干燥器中保存 12 周。并进行粉体的物性表征。表1，适用于所有配方中 FD 程序。箭头表示间隔内的压力或温度增减。间隔冻干工艺时间间隔[hh：mm]温度[℃] 压力[mbar]0速冻，放入小瓶～00:20-196atm.1冻结，平衡02:00-20atm.2初级干燥00:30↑ -15↓ 0.0453_01:00-150.0454_10:00↑ 00.0455_08:0000.0456二级干燥01:30↑ +200.0457_02:30+200.0458结束，封装小瓶_～+25atm.表2，SD 工艺参数及由此产生的过程变量。通过使用纯缓冲液进行测量来确定以 ml/min 为单位的喷射速率。实验过程中喷嘴温度升高，喷嘴温度是在 SD 过程结束时观察到的温度 。进口温度[℃]喷雾速率[%]空气流量[l/min] 粒度[μm]6030（～0.51ml/min）100±27.0过程变量出口温度[℃]压力[mbar]喷头温度[℃]29±131±152±23实验结果1、 通过激光衍射分析测定粒径SD 蛋白粉通过 HELOS 系统的激光衍射分析进行筛选。在 SD 后和第4周、第8周和第12周将粉末直接湿分散在甲苯中进行分析。通过对同一批次 SD 粉的三个样品进行测量，确定了 PSD 分析的标准误差。不分析 FD 粉末的粒度，因为冻干物通常是最终的药物剂型，没有对饼状进行研磨或破碎，只分析了 SD 粉。图1 通过激光衍射分析测定粉体粒径，在 10 次超声脉冲后进行测量，SD 粉末的 PSD 随储存时间的变化不大。除了在第0周分析的 SD dnCXCL8 喷雾粉末和在第8周分析的 SD HSA-dnCXCL8 外，所有干粉的跨度都小于 2.8。在测量这两个 PSD 时，一些较大的团块将分布分别向 517μm 和 129μm 的 x90 方向移动(图1b、图1c)，导致 PSD 变宽。2、 圆二色光谱测定结构利用圆二色谱(CD)对 SD 和 FD 后的蛋白质二级结构的变化进行评价，并将其与未处理蛋白质的光谱进行比较。CD 光谱在设备上记录，波长为 190-250nm，使用 1mm 石英比色皿，响应时间 4s。5 次扫描取平均值，并用 PBS 校正背景，计算平均残基椭圆率，并绘制不同曲线。由 图4 显示，经过 SD 和 FD 后的 CD 光谱显示只有轻微的结构变化。液体白细胞介素制剂在 90℃ 温度下热处理5分钟，SD 温度在 60℃ 温度下热处理 5 分钟，会产生轻微的沉淀，但结构保持完整 (图4A)。dnCXCL8 也出现类似的结果。SD 和 FD 均未引起二级结构的改变。即使加热蛋白质也未引起二级结构的变化(图4B)。虽然 HSA-dnCXCL8 具有更明确的α-螺旋结构，但 SD 和 FD 后没有变化。在 90℃ 热处理 5min 后二级结构发生了完全损失 (图4C)。3、 离液展开测定稳定性采用荧光光谱检测gdmhcl在0-6M范围内诱导展开，并在SD和FD后和储存3个月后测定蛋白质稳定性。将样品稀释至0.7μM，并在室温下平衡5min。CXCL8 和dnCXCL8 的激发波长为 280nm, HSA-dnCXCL8 的激发波长为 290nm。在 300-400nm 范围内测量所有3种蛋白的发射光谱，并将狭缝宽度设置为 5nm。蛋白质展开的特征是波长移位，并使用 Origin 2019b 的玻尔兹曼进行计算得到如下图谱。图5 显示，展开的过渡中点和 CXCL8 的相对协同性在很大程度上没有变化。对于 dnCXCL8，无法建立明确的过渡点。对于 FD HSA-dnCXCL8 也观察到了同样的情况。对于参考光谱和 FD 光谱（HSA-dnCXCL8 除外），显示了标准偏差，如图中的误差条所示。4、 趋化性测试：博伊登室测定为了检测 SD 和 FD 后以及储存三个月后的白细胞介素的活性，进行了趋化试验测定中性粒细胞的活化和迁移，预计 CXCL8 具有促迁移作用，而 dnCXCL8 和HSA-dnCXCL8 不应表现出任何中性粒细胞迁移激活。使用 NIS-Elements BR 3.2 软件进行细胞计数，计算每种情况下的平均值和标准偏差。上图显示储存 12 周后 SD CXCL8 的 CI 较对照显著增加 (图6a, p = 0.05)。SD 和 FD CXCL8 在中性粒细胞活化和迁移方面没有变化。对于 dnCXCL8, SD 和 FD 样本的 CI 与各自的参考 CI 相当。HSA-dnCXCL8 在 SD 后 (即W0) 的 CI 显著增加 (图6c, p = 0.04)。4结论本研究针对磷酸盐缓冲盐水配制的白细胞介素（未添加额外添加剂）采用 SD 和 FD 两种干燥方式分别进行深入评估。用纯缓冲液进行的 DoE 确定了一种最佳的 SD 工艺，在 60℃ 的干燥空气温度、100 L/min 的空气流速和 30% 的喷雾速率下具有较高产率，这表明即使是热不稳定的蛋白质也可以喷雾干燥。此外，SD 工艺比 FD 更快、更有效，理论上导致每分钟产量比 FD 高 130 倍（甚至考虑到 SD 的产量仅 63% 和 77% 之间）。FD 粉末呈现饼状结构，而 SD 粉末的粒度为 X5020μm。这为粒子工程提供了定义粒子特性的可能性，允许更广泛的应用。RM 是可比较的，同样二级结构没有改变，结合亲和力和活性保持至少 12 周，这些结果表明白细胞介素的 SD 是可行的。未来，将继续优化本研究中的工艺参数，并将其转移到具有工业型台式喷雾干燥器中，以更大规模地系统考察粉体产量和工艺时间，从而对 SD 进行全面评估，作为 FD 的替代方案，实现经济快捷高效的生产！5文献来源Comparing freeze drying and spray drying of interleukins using model protein CXCL8 and its variants
    时间： 2023-07-31
    作者： 瑞士步琦
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  • 【推荐讲座】冷冻电镜，ACD软件，低温样品制备技术，想学的，点进来快快报名啦！

    【推荐讲座】冷冻电镜，ACD软件，低温样品制备技术，想学的，点进来快快报名啦！

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  • 冷冻干燥样品制备方法，有多少标准方法支持？

    这两天在编制一份本地检察院相关的土壤报告，由于要数据要得很急，我们采用冷冻干燥的方法处理样品，鉴于任务的敏感性，质控的同事认为有些检测项目的标准方法里面，并未把冷冻干燥法作为样品制备方法写入标准方法里面，担心会有尾巴，最终在报告的备注里面说明了采用冷冻干燥法。版友们有碰到类似问题吗？你们是怎么处理的？

  • 【原创大赛】超微结构保存更好——高压冷冻与冷冻替代样品制备技术

    【原创大赛】超微结构保存更好——高压冷冻与冷冻替代样品制备技术

    最近一直在摸索着用高压冷冻和冷冻替代样品制备技术，刚开始做的时候冰晶特别严重，如下图Hela细胞。冰晶已经把细胞超微结构破坏的不行了。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231539_611900_2423894_3.jpg经过很长时间的摸索，得到以下制样方法：1 取样1.1 培养细胞：取适量的细胞悬浮液，低速离心成细胞团，去上清，细胞团呈米糊状，用移液枪取适量细胞，填满Carrier，加入适量冷冻保护液1-Hexadecene，滤纸吸取多余水分，使冷冻保护液液面略高于Carrier（Carrier用丙酮清洗，然后在空气中晾干，用1-Hexadecene浸泡备用）。1.2 小鼠肝脏：从活体上取出的组织，先用锋利的刀片在低温下切成尽可能薄片状，从中挑选合适的部分切下来，然后装入Carrier，加入适量冷冻保护液1-Hexadecene，滤纸吸取多余水分，使冷冻保护液液面略高于Carrier。2高压冷冻高压冷冻仪在使用前，要先做一些准备工作：要先加入足够的液氮，并加入压力液甲基环己烷，然后用空载的carrier高压冷冻三次，保证高压冷冻仪在最佳工作状态。2.1 将上述装有样品的carrier快速安置到高压冷冻仪，准备高压冷冻。2.2 高压冷冻样品，迅速把样品冷冻下来，并做好记录。通过高压冷冻仪冷冻样品后产生的冷冻速度和压力变化曲线，可以选择冷冻效果较好的样品继续下面实验。2.3 转移样品，首先把现配的替代液1%锇酸（0.5g锇酸溶于50mL丙酮）分装到2mL冻存管中，迅速放入液氮冷冻备用，冷冻过程中保持冷冻管直立。与此同时，冷冻替代仪加满液氮，将自制的冻存管架放入样品腔，预冷至-100℃。用预冷的镊子，在液氮下将Carrier分别装入冻存管，冻存管盖不宜拧的过紧，然后迅速转移到冷冻替代仪样品腔室的冻存管架里。3 冷冻替代 步骤 温度 时间 1 -100℃ -90℃ 4h 2 -90℃ 72h 3 -90℃ -60℃ 8h 4 -60℃ 8h 5 -60℃ -30℃ 4h 6 -30℃ 8h 7 -30℃ -20℃ 2h 8 -20℃ 8h 9 -20℃ 4℃ 2h 10 4℃ 1h 温度达到4℃后，用4℃的丙酮浸洗样品3次，每次15分钟。此过程中，会有部分样品与Carrier分离，若还有没分离的可以用解剖针将样品从Carrier中剥离。4 渗透包埋分别用以下渗透液渗透。 步骤 渗透液 浓度 时间 1 Epon812/丙酮 1:1 1.5-2h 2 Epon812/丙酮 3:1 6-12h 3 Epon812 100% 1h 4 Epon812 100% 8h 5 Epon812 100% 1h然后将样品转移至包埋槽，60℃烘箱聚合48h。5 超薄切片把两种生物样品对应的每一个包埋块分别超薄切片，各捞两个铜网，并染色。6 电镜观察观察细胞内超微结构保存情况，对感兴趣区域拍照。终于有所改善，如下图的小鼠肝脏细胞，轮廓十分清楚，结构保存完好。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231516_611895_2423894_3.jpg局部放大后观察，能看见核孔，双层核膜，甚至是膜的磷脂双分子层结构（这是在常规化学固定制样中很难看到的），看到这些让人激动不已。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231516_611894_2423894_3.jpg碰巧看见一个正在分裂的线粒体。线粒体脊很清楚，双层膜紧挨着，不像常规制样间隙那么大。另外，线粒体基质保存完好，所以线粒体整体较细胞基质反差大。http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231516_611893_2423894_3.jpg以下是常规化学固定制样的结果，可与上面高压冷冻及冷冻替代制样技术结果对比：http://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609231644_611928_2423894_3.jpghttp://ng1.17img.cn/bbsfiles/images/2016/09/201609

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