磷酸肽

在国家自然科学基金的大力支持下(项目资助号：21021004)，中国科学院大连化学物理研究所邹汉法研究员在磷酸化蛋白质组分析技术方面获得新进展，相关成果发表在最近一期的Nature Protocols上(2013，8，461-480)。(http://www.nature.com/nprot/journal/v8/n3/abs/ nprot.2013.010.html)。　　固定化金属离子亲和色谱(IMAC) 是磷酸化蛋白质组学研究中最常用的磷酸化肽段富集技术之一，常规的IMAC使用的螯合基团有三羧甲基乙二胺、次氨基乙酸、亚氨基二乙酸等，在螯合铁、镓等金属离子后可用于磷酸肽的富集。其缺点是特异性不高，在富集磷酸肽的同时也富集了一些酸性肽。研究人员发现了磷酸酯锆或钛表面与磷酸肽之间的高特异性相互作用，并利用这一相互作用建立了以磷酸基团为螯合配体的新一代固定化金属离子亲和色谱技术。实验表明，该新型IMAC对磷酸肽富集的特异性优异，可以有效避免酸性肽段的非特异性吸附。与传统的IMAC相比较，其对磷酸肽的富集能力提高3-10倍，从而大大提高了蛋白质磷酸化分析的检测灵敏度和鉴定覆盖率。该新型IMAC方法自2006年发表首篇论文以来，已在Mol. Cell. Proteomics, J. Proteome Res., Anal. Chem.等蛋白质组学与分析化学权威期刊发表论文20余篇，其中2007年发表在Mol. Cell. Proteomics的一篇论文已经被引用110余次。采用该方法为核心技术进行了人类肝脏蛋白质磷酸化的规模化分离鉴定，建立了迄今为止国际上人类肝脏蛋白质磷酸化的最大数据集 (Mol. Cell. Proteomics，2012，11，1070-1083)。

蛋白质磷酸化是在激酶催化下将磷酸基团转移到底物蛋白质上的可逆过程，是能够调控蛋白质结构与功能且参与细胞内信号转导的重要翻译后修饰，在植物的生长、发育、环境适应以及作物的产量和品质调控中发挥着重要作用。深度解析磷酸化蛋白质组，是探讨磷酸化如何参与这些生物学过程以及筛选与作物重要农艺性状相关的关键磷酸化靶点的有效手段。然而，与动物相比，植物磷酸化蛋白质组的深度解析在技术上更具挑战性。这是由于植物细胞具有致密的细胞壁和大量的色素以及其他次生代谢物。前者增加了蛋白质提取的难度，而后者干扰了磷酸肽富集的效率和特异性。 中国科学院遗传与发育生物学研究所汪迎春研究组通过探索一系列的实验条件，研发出高效的植物磷酸化蛋白质组学新技术。该技术的主要特点是利用脱氧胆酸钠高效抽提植物蛋白，同时消除常规方法中导致样品损失和灵敏度降低的两个步骤，即在蛋白酶消化前的样品净化和在磷酸肽富集前的脱盐处理，在色素与其他干扰分子共存的情况下进行高特异性、高灵敏度地磷酸肽富集。 科研人员应用这一方法，在拟南芥、水稻、番茄和衣藻等绿色生物的组织中高效纯化磷酸化蛋白质组（单针质谱可鉴定约11,000个磷酸位点）。由于该技术主要面向高等植物及其他绿色生物（如衣藻），且操作简便，降低了实验所需的人力和试剂费用，因此命名为GreenPhos。GreenPhos可定量分析不同植物的磷酸化蛋白组，分析深度深、定量重复性高，有望成为植物磷酸化蛋白组学的通用技术。研究人员应用该技术，深度解析了拟南芥响应不同时长盐胁迫的差异磷酸化蛋白质组，发现了包括剪接体蛋白和一些激酶响应盐胁迫的磷酸化事件。 11月27日，相关研究成果在线发表在《分子植物》（Molecular Plant，DOI：10.1016/j.molp.2023.11.010）上。研究工作得到国家重点研发计划与中国科学院战略性先导科技专项的支持。中国科学院植物研究所的科研人员参与研究。GreenPhos工作流程及多种绿色生物磷酸化蛋白质组鉴定结果

2012年 第1号　　根据《中华人民共和国食品安全法》和《食品添加剂新品种管理办法》的规定，经审核，现批准苯甲酸及其钠盐等17种食品添加剂和酪蛋白磷酸肽等4种营养强化剂扩大使用范围及用量，批准食品工业用加工助剂珍珠岩可作为助滤剂用于淀粉糖工艺。　　特此公告。　　二○一二年一月十日　　附件1：苯甲酸及其钠盐等17种扩大使用范围及用量的食品添加剂 名称类别食品分类号食品名称/分类最大使用量（g/kg）备注1.苯甲酸及其钠盐防腐剂14.04.02.01特殊用途饮料（包括运动饮料、营养素饮料等）0.2以苯甲酸计2.番茄红素（合成）着色剂01.01.03调制乳0.015以纯番茄红素计。01.02.01发酵乳0.01506.06即食谷物 ，包括碾轧燕麦（片）0.0507.0焙烤食品0.0516.01果冻0.05以纯番茄红素计。如用于果冻粉，按冲调倍数增加使用量。3.环己基氨基磺酸钠（又名甜蜜素），环己基氨基磺酸钙甜味剂07.01面包1.6以环己基氨基磺酸计07.02糕点1.64.焦磷酸钠水份保持剂01.06.04再制干酪14可单独或与其他磷酸盐混合使用，最大使用量以磷酸根（PO43-）计5.焦糖色（苛性硫酸盐法）着色剂15.01.04威士忌按生产需要适量使用 6.焦糖色（亚硫酸铵法）着色剂14.05.03植物饮料类（包括可可饮料、谷物饮料等）0.1 7.可可壳色着色剂07.01面包0.5 8.磷酸三钠水份保持剂01.06.04再制干酪14可单独或与其他磷酸盐混合使用，最大使用量以磷酸根（PO43-）计9.六偏磷酸钠水份保持剂01.06.04再制干酪14可单独或与其他磷酸盐混合使用，最大使用量以磷酸根（PO43-）计10.麦芽糖醇和麦芽糖醇液甜味剂04.01.02加工水果按生产需要适量使用 06.10粮食制品馅料12.10.02半固体复合调味料11.日落黄及其铝色淀着色剂14.04水基调味饮料类0.1以日落黄计12.氢氧化钙酸度调节剂01.01.03调制乳按生产需要适量使用 13.三氯蔗糖甜味剂04.05.02加工坚果与籽类1.0 14.山梨酸及其钾盐防腐剂09.04熟制水产品（可直接食用）1.0以山梨酸计09.06其他水产品及其制品15.山梨糖醇和山梨糖醇液甜味剂04.01.02.05果酱按生产需要适量使用 07.04焙烤食品馅料及表面用挂浆（仅限焙烤食品馅料）按生产需要适量使用 16.甜菊糖苷甜味剂03.0冷冻饮品0.5 16.01果冻17.辛烯基琥珀酸淀粉钠其他13.01.01婴儿配方食品1作为DHA/ARA 载体，以即食食品计。13.01.02较大婴儿和幼儿配方食品50　　附件2：酪蛋白磷酸肽等4种扩大使用范围及用量的营养强化剂 名 称类别食品分类号食品名称/分类使用量备注1.酪蛋白磷酸肽营养强化剂01.01.03调制乳≤1.6 g/kg 01.02.02风味发酵乳2.聚葡萄糖营养强化剂13.01婴幼儿配方食品15.6-31.25 g/kg 3.维生素D营养强化剂14.02.03果蔬汁（肉）饮料（包括发酵型产品）2-10 μg/kg 4.左旋肉碱（L-肉碱）营养强化剂14.06固体饮料类6-30 g/kg