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四环素类测试的流动相甲醇——咪唑缓冲溶液:取甲醇20mL、咪唑缓冲溶液80mL混匀。咪唑缓冲溶液:取咪唑68.0g,乙二胺四乙酸二钠0.40g、乙酸镁10.0g,加水800mL使溶解,冰乙酸调pH 至7.2,再用水稀释至1000mL,经0.45μm水相微孔滤膜过滤后备用。
请教各位大侠,四环素提取为什么都选用Na2EDTA-McIlvaine缓冲液作为提取剂,除了泛泛的回收率好之外,能不能详细讲讲,为什么选取,也就是怎么想到这种溶液的,提取的机理是什么,待测物结合净化中用到的HLB柱是怎么样作用的
本人一个多月前用HPLC-DAD同时测定四环素、土霉素、金霉素、美他环素和多西霉素,采用C8柱分离,流动相为草酸(0.01M):乙腈:甲醇=70%:20%:10%,信号强度在100多mAU以上,现如今条件不变,同样的方法操作,信号强度却在10mAU左右,排查一段时间,也不知道什么原因,请高手指点和帮助!非常感谢!