液相质谱定量

样品流路中分析物与金属表面相互作用引起的金属吸附是寡核苷酸分析中的主要问题之一。使用传统的 LC系统（基于不锈钢材质）通常会导致峰形不佳、灵敏度和定量性能受损。本文介绍了使用为解决金属吸附问题而开发的 Nexera XS inert系统分析寡核苷酸的示例。对灵敏度、定量性能和残留进行了评估，结果显示，与在流路中使用不锈钢的 HPLC 系统相比，该生物惰性系统在整体性能上明显改善。Nexera XS inert系统对金属配位化合物表现出优异的分析性能。通常用于 HPLC 流路的不锈钢 (SUS) 具有出色的耐压性，但含有磷酸基团的化合物可以通过金属配位作用与润湿不锈钢表面吸附。金属吸附会对峰形、检测灵敏度和重现性产生负面影响，并降低定量分析的性能。一般通过重复注入高浓度样品来抑制吸附，但这种方法既费时又昂贵。另一种方式是使用含有螯合剂的溶液来抑制吸附。但是此方法不适用于 LC/MS 分析，因为它可能导致污染和灵敏度降低。为了评估金属吸附抑制效果，采用常规HPLC系统（Nexera XR）和生物惰性UHPLC系统（Nexera XS inert）进行分析，并分别使用不锈钢色谱柱和无金属色谱柱。寡核苷酸的反相色谱分析中通常采用离子对试剂，本实验中使用HFIP（1, 1, 1, 3, 3, 3-六氟-2丙醇）和DIPEA（N, N-二异丙基乙胺）。样品信息：序列：5'-dG-dC*-dC*-dT-dC*-dA-dG-dT-dC*-dT-dG-dC*-dT-dT-dC*-dG-dC*-dA-dC* -dC*-3'，(*) 表示 5-C 或 5-U 甲基化 (d) 2'-脱氧核苷分子量：6431.72色谱及质谱条件：略。图 1 显示了使用 Nexera XR 和不锈钢色谱柱以及 Nexera XS inert和无金属色谱柱分析的 10 ng/mL 标准寡核苷酸溶液的色谱图。与 Nexera XR 相比，Nexera XS inert 的峰强度增加了约 1.7 倍。图1 寡核苷酸标准溶液(10 ng/mL)的MRM色谱图图2 (a) Nexera XR，(b)Nexera XS inert 交叉污染比较分析浓度为1000 ng/mL的寡核苷酸溶液后，立即将样品溶剂水作为空白进样以评估残留情况。图2（a）显示了Nexera XR空白分析的色谱图，图2（b）显示了Nexera XS inert空白分析的色谱图，可以看到两者的残留水平分别为0.0790%和0.0033%。这些结果表明，Nexera XS inert系统显著抑制了金属吸附并最大限度地减少了交叉污染。样品流路中分析物与金属表面相互作用引起的金属吸附是寡核苷酸以及其他金属敏感化合物分析中的主要问题之一。Nexera XS inert在样品接触流路中使用生物惰性材料，对易被吸附的化合物具有出色的峰形、分离度、灵敏度、重现性和定量性能。而且，该系统耐压超过100MPa，适用于超快速分析，显著提高实验室分析通量。Nexera XS inert系统与MS的结合是分析金属敏感化合物的理想解决方案。本应用中使用的仪器（Nexera XS inert+LCMS-8060）参考文献：1、LCAV-0001-0274，Improvement of Quantitative Performance in LC/MS Analysis of Oligonucleotides using Nexera XS inert本文内容非商业广告，仅供专业人士参考。

第二十届全国色谱学术会议于4月19日在西安曲江国际学术会议中心顺利召开，来自于国内外上千名的专家学者汇聚于此分享着在色谱领域中最新的研究成果和进展。在此次会议上，来自于中国科学院大连化学物理研究所的许国旺研究员向到场的嘉宾和观众介绍了液相色谱-质谱联用技术在代谢组学中的最新研究进展，并与现场嘉宾和观众进行了交流。　　许国旺谈到，代谢组学是通过考察生物体系受刺激或扰动前后代谢物谱及其动态变化来研究生物体系代谢网络的一种技术。根据研究目的不同，可以将代谢组学研究策略分为非靶向代谢组学和靶向代谢组学。通常非靶向方法主要用于代谢表型区分或差异代谢物发现的研究。从分析技术的角度来看，非靶向代谢组学是尽可能多地定性和相对定量生物体系中的代谢物， 最大程度反映总的代谢物信息。靶向代谢组学通常针对某个代谢通路或某些感兴趣的已知代谢物进行高灵敏度检测和准确定量分析，主要用于某些差异代谢物的验证等经典的靶向代谢组学LC-MS分析先由目标代谢物标样产生选择反应监测(SRM)/多反应监测( MRM) 离子对， 然后对样品中的目标代谢物进行靶向分析。中国科学院大连化学物理研究所 许国旺研究员　　近年来随着分析化学的发展，代谢组学技术也获得了蓬勃发展。核磁共振和质谱是代谢组学研究领域的最主流分析平台，与其他色谱-质谱联用技术相比，液相色谱-质谱联用技术更适合分析难挥发或热稳定性差的代谢物，同时LC既可以选择与飞行时间、四级杆-飞行时间、离子阱-飞行时间、静电轨道阱等高分辨质谱串联，以进行非靶向代谢组学分析，又可以与四级杆、三重四级杆或四级杆离子阱等质谱串联，利用选择反应监测或多反应监测检测模式进行靶向代谢组学分析。LC-MS技术的这种灵活性与普适性，使得它成为了代谢组学研究中功能最为常用的技术平台。　　基于LC-MS的代谢组学技术研究近年来取得了突飞猛进的成果，但技术的发展永无止境，就基于LC-MS的代谢组学分析技术而言仍存在很多问题亟待解决，例如，生物样品中代谢物组成十分复杂，许多痕量代谢物有重要的生理功能和意义，但目前的方法难以检测或因其含量较小导致分析误差很大 代谢组学面对的是大样本分析预处理技术及分析方法的重现性和可靠性显得尤为重要 生物样本间的个体差异导致了不同的基质效应，如何在复杂生物基质条件下对代谢物进行准确的定量分析也是代谢组学面临的挑战之一。　　随着各种质谱仪器灵敏度和分辨率性能的大幅度提升基于LC- MS技术的代谢组学能够获得的代谢特征也在快速增加，但是如何将这些代谢特征转变为有用的代谢信息依然是代谢组学研究工作者面临的挑战之一，可以预见未来将会有更多的新技术、新方法出现，以满足日益增长的代谢组学研究需求。

p　　2017年7月18日，安捷伦在北京举办质谱及液相新产品发布会。会上发布了多款创新产品，包括早前在2017美国质谱协会年会(ASMS)及国际高效液相色谱分离技术会议(HPLC)期间展出的革命性Ultivo三重四极杆液质联用系统、Agilent 1260 Infinity II Prime 液相色谱系统、全新Agilent InfinityLab液相色谱纯化解决方案和7250 GC/Q-TOF。发布会结束后，安捷伦接受了媒体群访。安捷伦科技副总裁兼质谱事业部总经理Monty Benefiel、安捷伦科技副总裁兼液相分离事业部总经理Stefan Schuette、安捷伦科技液相分离事业部市场经理Anneke Mü hlebach、安捷伦科技质谱事业部分析流程解决方案资深总监蔡小嘉、安捷伦科技大中华区实验室解决方案生命科学市场部经理庄晨杰、安捷伦科技生命科学事业部制药行业及液相分离市场经理韩莹出席媒体会并就媒体关心的话题进行了交流和回答。/pp style="text-align: center "img title="14.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201707/insimg/14b97303-6cac-47aa-89d2-0291cc0f81e2.jpg"//pp style="text-align: center "strong媒体会现场/strong/pp　　strongUltivo和7250 GC/Q-TOF/strong/pp　　“今天特别要介绍的是安捷伦最新推出的7250 GC/Q-TOF，作为安捷伦第三代GC/Q-TOF系统，具有更高的性能。更重要的是，其具备可使用低电子轰击能量的EI离子源，能更好地对较复杂基质中的化合物进行确认。”Monty Benefiel之后向大家推介了本次发布会的焦点——Ultivo，“安捷伦一直秉持“有的放矢、别具匠心”的产品理念，Ultivo机身小巧，仅为6460 的三分之一，这就意味着以前放一台6460的空间，现在可以摆放三台Ultivo。实现Ultivo的小体积与强大功能，需要很大的创新。”/pp　　Monty Benefiel就媒体关心的问题给出了解释。他表示，“Ultivo性能良好，有些指标要高于6460。Ultivo的革命性体现在其机身小巧，性能出色，同时操作、维护更加方便。通常，很难在一台仪器上同时实现以上三点。Ultivo在体积大幅度减小的同时，在性能上却能够保证依旧优秀，专利的双层六级杆技术是关键原因。在这个过程中，安捷伦的R& D工程师扮演了很重要的角色。在经过长期地不懈思考，安捷伦的R& D工程师开发出这个最新技术——双层六级杆。”/pp style="text-align: center "img title="2.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201707/insimg/105a64c3-3e57-4d48-a468-033dd534adda.jpg"//pp style="text-align: center "strong安捷伦科技副总裁兼质谱事业部总经理Monty Benefiel/strong/pp　　strong1260 Infinity II Prime LC系统/strong/pp　　“安捷伦最新推出了全新制备液相的产品家族，它不是一个单独产品的概念，而是一个全线的产品，从分析到半制备到制备、涵盖全流程的完整制备液相产品家族。用户可以根据自己的需求和预算选择不同的定制方案。”Stefan Schuette介绍说，“安捷伦液相系统从1220、1260到高端的1290有不同的产品线分布。1260 Infinity II Prime LC是1260产品线中较高端的产品，也保留了很多1290产品线中特有的功能，比如Blend Assit混合助手的功能，可以帮助研究人员在线地、自动地实现流动相混合和梯度搭配，简便、快速、安全。”/pp　　“安捷伦工程师的伟大之处在于不管你定多高的目标，他们都能够超预期地完成目标。正因为拥有这样追求卓越的开发团队，才使得安捷伦一直保持在创新上的领先。例如Feed Injection技术，以往实验室只能采用固定的进样模式，但是无法以多体积的方式进样，进样体积固定意味着进样量固定且单一，缺乏灵活性。然而客户希望能够同时实现固定定量进样和灵活范围进样,这是一个很难逾越的技术壁垒。但是经过整个团队不断地努力和多轮沟通讨论，我们最终隆重推出了这样一个新的功能。”/pp style="text-align: center "img title="3.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201707/insimg/d9811da9-9dae-4935-aa72-dcd721768f73.jpg"//pp style="text-align: center "strong安捷伦科技副总裁兼液相分离事业部总经理Stefan Schuette/strong/pp　　媒体会提问环节气氛热烈，媒体与安捷伦就新产品新技术展开广泛而深入的交流。群访结束后，安捷伦发言人们接受媒体拍照留念。/pp style="text-align: center "img title="4.jpg" src="http://img1.17img.cn/17img/images/201707/insimg/5dd1ead1-6b92-478c-b57a-d3b4beb41a12.jpg"//pp style="text-align: center "strong从左至右：庄晨杰、蔡小嘉、Monty Benefiel、Stefan Schuette、Anneke Mü hlebach、韩莹、安捷伦科技大中华区实验室解决方案销售发展兼全球战略客户项目总监林达音/strong/p