组织处理

八戒：猴哥救我！悟空：呆子，何事慌张！八戒：猴哥你没听说吗！非洲猪瘟来了，一个被传染，一窝都遭殃啊！我听说辽宁、黑龙江、吉林、江西、福建、四川好多兄弟都已经被扑杀了。悟空：呆子！那还不离我远点！问题一、什么是非洲猪瘟？非洲猪瘟（African Swine fever，ASF）是由非洲猪瘟病毒（African Swine fever virus，ASFV）感染家猪和各种野猪（不传染人）引起一种急性、出血性、烈性传染病。其特征是发病过程短，最急性和急性感染死亡率高达100%，且只能依靠实验室监测确诊。 2018年8月3日我国确诊首例非洲猪瘟疫情。问题二、目前在中国的传染范围？自8月初我国首次发现非洲猪瘟以来，截至11月22日，全国有20个省份47个市（区、盟）发生73起家猪疫情、1起野猪疫情，累计扑杀生猪60万头。全国非洲猪瘟疫情呈现多点散发状态，但在各地动物疾控部门的积极行动下，疫情开始趋于平稳，总体防控有效。问题三、非洲猪瘟检测的样品处理方法介绍一、非洲猪瘟样品处理1. 目的规范ASFV样品和实验材料的处理程序，保证ASFV相关实验的顺序开展和实验室的生物安全。2. 适用范围适用于疑似ASFV临床样品的实验前的处理3. 程序3.1实验材料ASF的易感动物，主要为家猪、野猪和蜱，通常采集的样品为家猪、野猪的血液样品、组织样品以及蜱三类。田间采集的样品通常需要经过简单的预处理，才能进行后续的检测、诊断工作。血清：用于病毒核酸检测、病毒抗原和抗体检测。将采好的猪血的注射器或采血管在室温下倾斜静止2~4h（防止暴晒），或置于37℃温箱内1h，待大部分血清析出后，取出血清，必要时经离心分离血清。（最低建议量5ml）。抗凝全血：用于病毒核酸检测和病毒抗原检测。采血前，在真空采血管或注射器内按比例加入抗凝剂。采集血液，轻轻上下颠倒，使血液与抗凝剂充分混匀，防止血液凝固的同时避免溶血。也可以将血液放入装有玻璃珠的灭菌瓶内，震荡脱落纤维蛋白。必要时，可加入双抗以抑制血源性或采血过程中可能出现的细菌污染。当血样用于病毒核酸检测时，一般不用肝素而选用EDTA作为抗凝剂。（最低建议量1mL）。组织样本：活体采集，采用扁桃体，用于临床健康动物ASF监测。尸体剖检ASF发病动物或死亡动物经解剖取材，包括：ASFV靶器官的采集：脾脏、淋巴结、肾脏、扁桃体。其他病变组织脏器的采集：采集具有明显病变的肝脏、肺脏、心脏等组织器官，选取部位在病变和健康组织交界处。腐败动物尸体的样品采集：剖检取股骨，将附着的肌肉和韧带等全部剔除，采集骨髓。最低建议量5克。蜱的采集：蜱可进行核酸检测、抗原检测和蜱的形态学鉴定，查找猪圈的墙边、墙缝、木质或瓦质的屋顶，或挖掘猪圈地面均可能找到蜱，也可查看猪表皮，采集蜱。1-1样品保存条件注：用于病毒分离和病理学检测的样品禁止-20℃保存。3.2实验器材和试剂 1）台式高速冷冻离心机、组织研磨仪、水浴锅、计时器、冰箱和移液器等。2）无菌的剪子、镊子、钢珠、2mLEP管、移液器吸头（10μL,200μL、1000μL）等。3）其他试剂和耗材主要包括：0.01mol/L PBS（PH7.2）、0.8%NaOH、75%酒精棉球等。3.3样品处理程序3.3.1血清及全血样品处理取血清或全血样品1mL于灭菌EP管里，保存备用3.3.2组织样品处理适用于脾脏等组织样品和蜱的处理。尽可能减少污染，每取一个组织块或蜱，用火焰消毒剪镊等取样器械，组织块应分别放入灭菌容器内并立即密封，做好标记，注意防止组织间相互污染。3.3.2.1组织样品的处理应在二级生物安全柜中进行，勿使液体溅到生物安全柜中。3.3.2.2将0.1-0.2g组织块放入2mLEP管中，用剪刀剪成碎块，加1-2mL0.01mol/L PBS（PH7.2）,再加入1-2粒灭菌钢珠，密封后，表面消毒备用。剩余样品放回容器内，重新密封，表面消毒后保存-70℃冰箱。3.3.2.3组织样品的破碎可以利用组织研磨仪在生物安全柜外操作，将样品制成组织悬液。重磅推荐使用Scientz-48L冷冻型高通量组织研磨器3.4病毒灭活病毒的灭活处理应在二级生物安全柜中进行，将处理好的血清、全血或者研磨破碎后的组织样品连同EP管放入60℃水浴中，放置30min灭活。3.5使用后仪器处理剪刀、镊子等均应放入消毒缸进行消毒，放入铁饭盒内，并装入密封袋内进行高压灭菌处理。装有组织样品保存液的容器和盛有组织块的离心管应密封管口，表面消毒后放入密封袋中高压灭菌。钢珠、吸头等废弃物应用0.8%NaOH浸泡30分钟消毒后，置密封袋内高压灭菌。消毒残液应装入密封容器内高压灭菌处理。3.6注意事项操作之前要确认生物安全柜和实验室已进行了彻底的卫生消毒处理，防止样品间交叉感染。二、非洲猪瘟病毒的核酸检测可用实时荧光PCR配套相应实际进行，具体操作步骤以仪器生产公司指南为准。 问题四、病毒杀灭和防控方式非洲猪瘟病毒虽然在环境中比较稳定，但在猪肉烹煮处理过程中较易失活，70℃-75℃加热30分钟以上，病毒就会被杀灭，也就是说我们日常烹饪过程中只要把猪肉熟透(包括最中间部位温度至少达到70℃以上)，即使有病毒也会很快失去感染力并丧失活性。 新芝生物Scientz-48L冷冻型高通量组织研磨器介绍新芝生物推出的Scientz-48L冷冻型高通量组织研磨器具备以下特征：1.应用场景多样。可以对不同组织进行干磨、湿磨、混合以及均质化处理。2.实验效率高。能提高提取大通量样品中核酸的效率和质量。3.实验过程安全。研磨过程采用封闭式一次性离心管，有效地避免了样品交叉污染。4.仪器稳定性好。对同一组织样品可设定相同的研磨程序，从而获得相同的研磨效率，提高了实验的可重复性。5.研磨效果好。产品采用高效研磨球进行研磨，相较于传统研磨方式对样品的研磨更为均匀、充分。目前，新芝生物Scientz-48L冷冻型高通量组织研磨器已助力沈阳、大连、朝阳、本溪、鞍山、锦州、葫芦岛等多地动物疾控中心用于非洲猪瘟检测实验的样品前处理。Scientz-48L冷冻型高通量组织研磨器高效、稳定、安全的仪器特性很好地解决了检测过程中检测样品数量多、实验一致性难以控制等问题，得到了广大用户的一致好评。产品用途1.适用于各种植物组织包括根、茎、叶、花、果、种子等样品的研磨破碎； 2.适用于各种动物组织包括大脑、心脏、肺、胃、肝脏、胸腺、肾脏、肠、淋巴结、肌 肉、骨骼等样品的研磨破碎； 3.适用于真菌、细菌等样品的研磨破碎； 4.适用于食品、药品成分分析检测的研磨破碎； 5.适用于易挥发样品包括煤炭、油页岩、蜡制品等样品的研磨破碎； 6.适用于塑料、聚合物包括PE、PS、纺织品、树脂等样品的研磨破碎。主要技术参数1.时间设定：1(秒)-9999(秒)2.频率设定：10—70Hz，即振荡300—2100次/min 3.额定功率：180W4.夹具行程：34mm(垂直)5.温度设置 : -20℃或者-30℃6.电磁锁控制开门7.样品容量：随机标配：铝合金适配器5ml 12孔，2ml 48孔 可选配：铝合金适配器2ml24孔8.电源需求：220V单相交流，2.5A新芝生物公司简介宁波新芝生物科技股份有限公司（股票代码：430685）始创于1989年，公司总部位于宁波市国家高新区，注册资金6102万元，是全球知名的生物样品处理设备提供商，也是国内超声波技术应用探索的先行者。依托强大的科研技术实力，公司在超声波、温湿度、高低压、超低温等技术层面积累了丰厚的经验，并先后研究开发包括生物样品前处理仪器、分子生物学仪器、实验室洁净设备、冷冻干燥设备、工业防垢除垢设备、环保除藻防控设备在内的多款产品。公司始终坚持业界前沿的技术研究和应用开发，致力于为科研、教育、环保、医疗、制药、石化、农林、材料等领域客户提供先进的产品设备和行业解决方案。公司目前拥有宁波、杭州两地四大研发中心，拥有高水平研发人员数十人，专利60余项。公司曾多次承担国家科技部、发改委、卫生部重大科研项目，是国家发改委高技术产业化示范工程中心、科学仪器产业化基地、宁波企业工程（技术）中心。公司研制的高压气体基因枪一举打破国外技术垄断，填补国内相关领域空白，荣获浙江省科技进步二等奖。公司高度重视品牌培育和市场开拓，为更好地服务客户，公司在全国各地建有30余个办事处，办事处均配备销售工程师和售后工程师，可随时满足客户需求。全球超过15,000家实验室在使用新芝生物的产品，各类仪器设备市场保有量超过100,000台套，产品远销美、英、法、俄、日、韩等36个国家，公司年度销售收入突破1亿元人民币，已经成为国内乃至全球知名的生物样品制处理设备研制专家。新芝生物30年风雨兼程，以新致心，将继续致力于为各行业客户提供优质的产品和贴心的服务！

昊诺斯第一期“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动成功开展4月6日下午，昊诺斯第一期“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动成功开展，活动受到了用户们的大力支持，虽然这一期“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动仅仅1个小时，但是丝毫没有影响用户们积极参与分享、讨论的热情，大家不仅根据我们活动的主题进行了探讨，而且还将自己实验中遇到的问题进行了交流，整个“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动过程可为全程高能！ 第一期“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动我们给大家提供了一个很经典的一个案例：人体内脏及肿瘤细胞用于提取RNA。 实验：人体内脏及肿瘤细胞用于提取RNA试用单位：北京某生物技术公司试用时间：2015.3.16-2015-3-17适配器选择：2.0ml试管适配架（2×28×2.0ml）研磨组织：人体肿瘤细胞，胰腺，前列腺，脂肪，肌肉（每个组织各研磨2个样本）操作过程：1、实验前准备：对不锈钢研磨钢珠进行高温灭菌预处理。2、研磨组织：将样本取出，切割成适于研磨的体积，将研磨钢珠加一颗到2ml圆底离心管(进口)，随后加入切好的待磨样本，最后再加入一颗预冷的研磨钢珠，盖好管盖放入取出的适配器中，按上述操作依次处理各样本，随后将适配器安装上机，设置频率，开始研磨，时间结束取出适配器加入裂解液。试用结果：结论研磨效果良好，提取的RNA跑出电泳图条带清晰可见，试用效果良好。提取的RNA电泳图案例中的公司是针对全国医院和公司人体样本测序服务的公司，他们的样本量十分大，而且种类多样！为此他们专门有一个提纯组，做样本提纯！因为样本量大且提纯的是相对难处理的RNA，所以非常有参考价值。 首先他们实验室的卫生级别很高，所有操作尽量保证在超净台中进行！其次，钢珠是经过他们提前的灭菌处理，清洗过程中几乎都是用的超纯水。最后，他们的2ml离心管也是很好的进口无菌无RNA霉的！这样最大可能的保证了我们的实验中外来因素对实验的影响。在这期“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动中，我们针对以上案例进行了简单讲解，让用户更加清楚，并针对该案例进行了问答互动，大家也都是积极参与：相信每一位参与“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动的用户都会有收获。最后，让我们共同期待第二期“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动吧！下周三，我们不见不散！对了，还有一件很重要的事儿没跟大家讲，就是我们的“组织研磨和样品处理分享、讨论”活动是在【昊诺斯鼎昊源组织研磨分享】微信群内开展的！如果您也想参与我们的活动，那么就找昊诺斯销售工程师拉您进群，或者回复昊诺斯微信公众号申请进群（申请时要注明所在单位名称+微信号）。扫码关注昊诺斯微信公众号

组织研磨机被广泛应用，它主要是应用于对生物样品的DNA提取实验分析，确保样品前处理的理想效果；同时它在种子纯度检测项目实验中的应用频率也较高，提高了对种子DNA的提取效果，同时也大大的提高了实验的工作效率。　　样品前处理设备主要是通过垂直振荡和振荡系统的高频往复运动，使离心管中的冷冻样品与磨珠的相互碰撞摩擦，所产生的研磨剪切力和冲击力来使样品组织被完全破碎，其可在几秒钟到几分钟内快速实现对生物样品组织的粉碎、混合和细胞破壁，进而获得良好的样品磨碎效果。　　组织研磨机是一款实验室样品制备的多面手仪器，不仅能够快速粉碎、均匀化处理硬、软、弹性等样品组织，还可满足理化实验分析的需求；不锈钢罐也配有不同的体积和材料，可用于样品干磨、湿磨和冷冻研磨，也可用于细胞破碎和DNA/RNA提取，还被广泛应用于生物医学、农业、食品等行业领域。　　组织研磨机的主要优点:　　1. 可快速高效地将样品磨碎,使其达到所需的粒度分布,满足后续实验要求，大大提高了工作效率。　　2. 可充分研磨样品,利于后续实验的提取和分析，确保实验结果准确性。　　3. 研磨结果均匀,保证实验结果的可靠性。　　4. 采用独立研磨管，防止样品交叉污染,保护样品。　　实验设备的使用注意事项还有注意这几点，仪器要放置在干燥通风的环境中进行使用；冷冻样品时，要注意避免液氮的溅出，做好防护，避免造成冻伤等事故；样品要对称分布在样品夹中，要确保样品夹的平衡；在关闭设备门之前，需要确认夹具是否已经完全固定，没有松动现象；在设置仪器程序参数时，对其设备的振荡频率参数设置不得超过设备的较大量程范围值。　　组织研磨机的样品前处理操作，不仅提高了实验效率，还为实验提供了可靠的分析基础，进而成为实验室中样品前处理制备的常备实验仪器。