人睾丸白膜上皮细胞
产品名称 | 人睾丸白膜上皮细胞 | 组织来源 | 睾丸组织 |
产品规格 | 5×105cells/T25细胞培养瓶 | 生长特性 | 贴壁 |
种属 | 人 | 细胞形态 | 铺路石样 多角形细胞 |
细胞特性:
1)组织来源于人的正常睾丸组织。
2)细胞鉴定:PCK免疫荧光染色为阳性。
3)经鉴定细胞纯度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌。
5)细胞生长方式:铺路石样,多角形细胞,贴壁培养。
推荐培养基:
我们推荐使用 Delf原代上皮细胞培养体系 作为体外培养的培养基。
细胞简介:
睾丸表面有一层坚厚的纤维膜,称为白膜。具有保护睾丸的作用。白膜增厚并向里面延伸,将睾丸分割成许多小室。
原代培养原理和应用:
一、细胞原代培养是通过特殊分离方法从胚胎、组织器官以及外周血中分离获得单细胞,置于合适的培养基中培养,在无菌、适当温度和一定条件下,使细胞生存、生长和繁殖的过程。原代培养的“代”并非细胞的代数,是指细胞培养的次数,从体内取出组织接种培养到第一次传代的阶段,都属原代培养,一般持续1-4周。常见的原代培养过程如图1所示。
二、原代培养细胞直接来源于活体组织,体外培养也尽量模拟体内环境,使得分离得到的细胞接近生物体内的生活状态,可作为研究生物体细胞的生产、代谢、繁殖、凋亡提供有力手段,亦可用于各种药理作用、药物开发研究和临床实践。
三、原代细胞的质量取决于多个因素:取材、培养条件的优化、无菌操作,特别是组织分离技术等。对于大多数研究者而言,想要获得高质量的原代培养细胞仍然比较困难。尽管原代培养技术已较普遍,但是有时仍会得到一些难以解释的结果。拥有行政许可的洁净级实验动物中心,已构建细胞培养和实验平台,可分离培养数百种人、大小鼠和大型动物的原代细胞,并在此基础上提供相关细胞实验服务,包括细胞培养、细胞转染以及细胞药物刺激后各种增殖、侵染和凋亡实验。
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贴壁细胞传代操作步骤:
用移液管或者巴氏吸管吸取培养液;
使用不含钙镁离子的平衡盐溶液(PBS)冲洗细胞1-2次;
弃PBS,加入胰蛋白酶-EDTA消化液(消化液浓度根据各细胞不同有调整),轻轻摇晃培养瓶,使胰酶与细胞表面充分接触,37 ℃孵育2-3 min,加入含血清完全培养基终止消化。
将细胞悬液移入离心管中,800 rpm-1000rpm离心5min,弃上清,加入预热的完全培养基重悬细胞,轻轻吸打混匀,吹打过程中尽量不要出现气泡。
细胞计数,根据细胞量选择合适的传代比例,最后转移置37 ℃细胞培养箱中进行培养。
悬浮细胞传代操作步骤:
悬浮细胞由于本身在生长培养基中悬浮,无需通过酶的作用使其从培养容器表面脱离,整个过程较为迅速,对细胞损伤较小。悬浮细胞传代,通常有两种方法,直接传代法和离心传代法。
(1)直接传代法
① 悬浮细胞长满至80%-90%左右(细胞悬液变黄,最大细胞密度随细胞系不同而有所差异),即可传代;
② 用吸管吸弃细胞悬液1/2~2/3;
③ 加入适量的新鲜培养基,继续培养。
(2)离心传代法
① 将细胞悬液转移到离心管内;
② 800 rpm-1000rpm离心5min,弃上清;
③ 使用新鲜的培养基重悬细胞;
④ 吸管吸取适量细胞悬液,装入新的培养瓶,再加入适量的新鲜培养基,继续培养。
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