细胞凋亡是细胞的基本特征之一,它在机体的胚胎发育、组织修复、内环境的稳定等方面起着十分重要的作用。 AnnexinV是一种分子量为35~36kD的Ca2+依赖性磷脂结合蛋白,能与细胞凋亡过程中翻转到膜外的磷脂酰丝氨酸(Phosphatidylserine,PS)高亲和力特异性结合。以标记了FITC的 AnnexinV作为荧光探针,利用流式细胞仪或荧光显微镜可检测细胞凋亡的发生。
Propidium iodide(PI)是一种核酸染料,它不能透过完整的细胞膜,但凋亡中晚期和死细胞由于细胞膜破裂,因此PI能够将细胞核染红。将AnnexinV与PI联合使用,可以区分活细胞(FITC/PI均为阴性)、凋亡早期 细胞(FITC阳性、PI均为阴性)、凋亡晚期或死细胞(FITC/PI均为阳性)。
本细胞凋亡检测试剂盒使用改进型的高纯度FITC染料,其在红色通道(690nm)无发射光,因此极大的减少了对红色通道的干扰。使用该试剂盒进行细胞凋亡检测时荧光相互干扰更小、检测更准确。
应用
细胞凋亡检测
储存
2~8℃,有效期1年。
注意事项
1. 整个操作过程动作要尽量轻柔,勿用力吹打细胞,尽量在4℃下操作。
2. 反应完毕后请尽快检测,反应1 小时后荧光强度就开始衰变。
3. Annexin V-FITC 和 Propidium iodide 是光敏物质,在操作时请注意避光。
4. 试验操作过程中佩戴手套等防护用品。
5. 试验开始前将一定量的 10×Annexin V Binding Buffer 用超纯水(1:9)稀释至 1×备用。
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