β-葡萄糖苷酶(β-GC)活性检测试剂盒 微量法

β-葡萄糖苷酶（β-GC)活性检测试剂盒说明书

微量法

规格：100T/48S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

溶液的配制：

1、试剂一：临用前每瓶加入 12 mL 双蒸水，充分溶解备用；用不完的试剂仍-20℃保存；

2、标准品：5 μmol/mL 的对硝基苯酚溶液。

产品说明：

β-GC（EC 3.2.1.21）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，催化β-糖苷键水解，具有多方面生理作用：在纤维素的糖化作用中，β-GC负责进一步水解纤维素二糖和纤维素寡糖生成葡萄糖；β-GC水解萜烯类香气前驱体，使糖苷键合态变成游离态。从而产生香味；β-GC能够水解植物体内野黑樱苷，释放HCN，从而防止昆虫取食。

β-GC分解对-硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷生成对-硝基苯酚，后者在400nm有最 大吸收峰，通过测定吸光值升高速率来计算β-GC活性。

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

1、细菌或培养细胞的处理：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每 1000 万细菌或细胞加入 1mL 提

取液，超声波破碎细菌或细胞（功率 20%，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次），15000g，4℃，离心 20min，取上清，置冰上待测。

2、组织的处理：称取约 0.2g 组织，加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆；15000g，4℃，离心 20min，取上清，置冰上待测。

二、测定步驟

1、 分光光度计或酶标仪预热30min以上，调节波长至400nm，蒸馏水调零。

2、 标准样本的准备：取100μL标准液，加入到400μL蒸馏水中，得到1μmol/mL标准液，再十倍稀释到100nmol/mL，用蒸馏水倍比稀释：50、25、12.5、6.25nmol/mL。100、50、25、12.5、6.25、0nmol/mL做标准液。

3、 加样表：

三、β- GC 活力单位的计算

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！