葡萄糖含量检测试剂盒微量法 微量法

葡萄糖含量检测试剂盒说明书

微量法

规格：100T/96S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

溶液的配制：

1、混合试剂的配制：使用前将试剂二和试剂三 1：1 等体积混合，用多少配多少；

2、试剂一：2μmol/mL 葡萄糖溶液。

产品说明：

葡萄糖不仅是细胞能量代谢的主要底物，而且其代谢中间产物是生物合成的重要底物。植物可通过光合作用产生葡萄糖。就哺乳动物而言，葡萄糖不仅是大脑神经系统、肌肉、脂肪组织等的唯 一能源，而且与还原性辅酶、乳糖和乳脂的合成密切相关。

葡萄糖氧化酶（Glucose Oxidase，GOD）催化葡萄糖氧化成葡萄糖酸，并产生过氧化氢；过氧化物酶（Peroxidase，POD）催化过氧化氢氧化 4-氨基安替比林偶联酚，生成有色化合物，在 505nm 有特征吸收峰。

技术指标：

最 低检出限：0.0188 μmol/mL

线性范围：0.125-8 μmol/mL

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/恒温培养箱、台式离心机、超声破碎仪、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵/匀浆器、蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

1. 组织的处理：按照组织质量（g）：蒸馏水体积（mL）为 1：5~10 的比例（建议称取约 0.1g 组织，加入 1mL蒸馏水），研磨成匀浆，置沸水浴中煮沸 10 min（盖紧，防止水分散失），冷却至室温后，8000g，25℃离心 10min，取上清液备用。

2. 细菌或细胞处理：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：蒸馏水体积（mL）为 500~1000：1 的比例（建议 500 万细菌或细胞加入 1mL 蒸馏水），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 20％或 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次），置沸水浴中煮沸 10min（盖紧，防止水分散失），冷却后，8000g，25℃离心 10min，取上清液备用。

二、测定步骤

1、 分光光度计或酶标仪预热 30min 以上，调节波长至 505nm，分光光度计用蒸馏水调零。

2、 样本测定（在 1.5mL EP 管或 96 孔板中依次加入下列试剂）：

三、葡萄糖含量计算

注意事项：

如果样本吸光值大于1.2，建议将样本用蒸馏水稀释后进行测定。计算公式中注意乘以稀释倍数。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！