谷氨酸(Glu)含量检测试剂盒 微量法

谷氨酸（Glu）含量检测试剂盒说明书

 微量法

规格：100T/96S

产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

溶液的配制：

1、 试剂三：临用前加入 20 mL 试剂一；

2、 试剂四：临用前加入 1.5 mL 试剂二；

3、 标准液：10 μmol/mL 谷氨酸标准品。

产品说明：

Glu广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，不仅是组成蛋白质的20种氨基酸之一，而且通过转氨基作用参与多种氨基酸合成，是生物体内主要氨基来源之一。此外，Glu还是味精的主要有效成分，常用做食品添加剂以及香料生产。

谷氨酸脱氢酶（GDH）催化谷氨酸和NAD生成α-酮戊二酸、NADH和NH4⁺，引起340nm处吸光度的上升，通过测定340nm吸光度的变化，计算谷氨酸含量。

技术指标：

最 低检出限：0.0037 μmol/mL

线性范围：0.0125-0.2 μmol/mL

注意：实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品：

紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔UV板、研钵/匀浆器、冰、蒸馏水。

操作步骤：

一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）

细菌、细胞：收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照每 1000 万细菌或细胞加入 1mL 试剂一，超声波破碎细菌或细胞（功率 20%，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次），10000rpm，常温离心 10min，取上清待测。

组织：称取约 0.1g 组织，加入 1mL 试剂一进行冰浴匀浆，10000rpm，常温离心 10min，取上清待测。

二、测定步骤

1. 分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。

2. 标准溶液的制备：将标准品分别稀释为0.2、0.1、0.05、0.025、0.0125μmol/mL的标准溶液。

3. 在有盖EP管中加入下列试剂：

(1) 标准管：在微量石英比色皿/96孔UV板中加入40μL标准溶液、160μL试剂三和10μL试剂四混匀，立即记录340nm处20s时的吸光值为A1和5min20s时的吸光值A2，计算?A=A2-A1。

(2) 测定管：在微量石英比色皿/96孔UV板中加入40μL样本、160μL试剂三和10μL试剂四混匀，立即记录340nm处20s时的吸光值为A1和5min20s时的吸光值A2，计算?A=A2-A1。

三、谷氨酸含量计算

注意事项：

如果测定吸光值超过线性范围吸光值，可以增加样本量或者稀释样本后再进行测定。

特别提示：本公司的所有产品仅可用于科研实验，严禁用于临床医疗及其他非科研用途！