【应用分享】茶叶中草甘膦、草铵膦、氨甲基膦酸的提取与检测

纳谱分析

2024/08/22 13:51

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草甘膦和草铵膦都是有机磷类的除草剂，草甘膦（PMG）以其广谱、高效、低毒、廉价的特点，被广泛应用在农业领域，草甘膦的主要代谢产物是氨甲基膦酸（AMPA）；草铵膦（GLU）可以去除耐草甘膦的杂草，具有环保易降解的优点。多项研究表明，草甘膦、草铵膦都具有生物毒性，对人体健康存在潜在危害，很多国家和地区对于草甘膦、草铵膦的残留量进行严格控制。SN/T 1923-2007标准中给出了提取与检测草甘膦、氨甲基膦酸的方法，但前处理方法较为繁琐、用时较长，样品提取液经过CAX小柱净化后，还需对净化液进行旋转蒸发浓缩、调节pH等步骤才能进行衍生化处理；使用纳谱分析优化后的前处理方法，将样品提取液使用SelectCore GLY草甘膦专用柱净化后即可进行后续的衍生化操作，这极大地提高了实验效率，并且可以同时进行草甘膦、草铵膦、氨甲基膦酸三种目标物的测定。

一、适用范围

本方法参照SN/T 1923-2007进出口食品中草甘膦残留量的检测方法液相色谱-质谱/质谱法，并对前处理方法加以优化，方法适用于茶叶中草甘膦、草铵膦及氨甲基膦酸的提取与检测。

二、实验步骤

2.1 样品制备

称取1 g茶叶（精确至0.01 g）至离心管中，加入20 mL水，浸泡0.5 h，加入10 mL二氯甲烷，振荡20 min，于4000 r/min离心10 min，取上层水溶液移至另一离心管中，残渣再加10 mL水复提一次，合并上层水溶液为待净化液。

2.2 样品前处理

SelectCore GLY草甘膦专用柱200mg/6mL：

（1）活化：依次使用5 mL甲醇、5 mL水活化SPE柱，活化后抽干SPE柱；

（2）上样及收集：吸取2 mL待净化液上到SPE柱上，弃去前1 mL流出液，收集剩余流出液；

（3）衍生化：吸取980 μL（2）中收集的流出液，加20 μL内标、400 μL的5%硼酸盐缓冲溶液（pH=9），3 mL 9-芴甲基三氯甲烷，混匀，室温下进行衍生化反应，反应1 h，加6 mL乙酸乙酯终止反应，摇匀，10000 r/min离心3 min。取下层衍生化后溶液通过0.45 μm滤膜，供液相色谱串联测定。

2.3 高效液相色谱仪器条件

Column：ChromCore C18 3μm, 2.1×100mm

Mobile Phase：

A）4 mmol/L乙酸铵+0.1%甲酸水

B）甲醇

Flow rate：0.3 mL/min

Temperature：40 °C

Injection：2 μL

Gradient：

t（min）	A（%）	B（%）
0	70	30
0.8	70	30
2.0	5	95
4.2	5	95
4.7	70	30
5.2	70	30

2.4 质谱条件

离子源：电喷雾离子源（ESI）正离子扫描

监测方式：多反应监测（MRM）

电离模式：ESI+

三、实验谱图及加标回收率数

1）实验谱图：

2）加标回收率数据：

项目	加标量（mg/kg）	平均回收率% （n=3）
草甘膦	0.10	85.1
草铵膦	0.10	110.0
氨甲基膦酸	0.10	80.0
草甘膦	3.0	95.5
草铵膦	3.0	109.2
氨甲基膦酸	3.0	90.2

四、实验结论

由实验谱图和回收数据可以看出，茶叶样品经过SelectCore GLY草甘膦专用柱净化后，不仅可以有效去除了样品基质干扰及杂质干扰，同时草甘膦、草铵膦、氨甲基膦酸这三种目标物的加标回收率均在80%以上，并且出峰良好。选择上述解决办法有效地解决了茶叶中草甘膦类农残检测中存在的问题，提高了实验效率，为其实验数据的稳定性和可靠性提供了良好的帮助。

相关产品货号信息

常规规格货号
产品描述	货号
ChromCore C18液相色谱柱 3μm, 2.1×100mm	A001-030018-02110S
SelectCore GLY草甘膦专用柱 200mg/6mL; 30/pkg	GLY060-060200-1