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纳谱分析技术(苏州)有限公司

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【应用分享】血浆中儿茶酚胺及其代谢物的提取与检测

纳谱分析

2024/08/22 13:30

阅读：4

儿茶酚胺类物质是一类结构式中同时含有邻苯二酚和胺基的化合物，包括：肾上腺素(E)、去甲肾上腺素(NE)、多巴胺(DA)，以及它们的代谢物：变肾上腺素(MN)、去甲变肾上腺素(NMN)、3-甲氧基酪胺(3-MT)。

儿茶酚胺是体内重要的神经递质，与多种生理、病理现象密切相关，检测血浆中儿茶酚胺浓度的变化可以辅助诊断高血压、心肌梗塞、低血压等疾病，但血浆中儿茶酚胺含量较低并且受血浆中其他物质干扰较大，极大地增加了临床检测难度。目前临床上常使用WCX的96孔板进行样本前处理，而市面上较多品牌的WCX孔板存在着针对儿茶酚胺的回收较差，孔与孔之间的差异性较大，造成检测灵敏度低，重现性不好的问题。因此，纳谱分析科研团队，凭借其深厚的色谱分析技术功底和持续的创新激情，历经精心雕琢与严苛品质把控，推出了全新96孔板产品——SelectCore WCX 96孔板，该产品是基于纳谱分析单分散聚合物基质所开发的弱阳离子交换填料的96孔萃取板，离子交换容量高，针对儿茶酚胺成分的选择性好。特别是3 mg的微孔板，采用独特的微孔板装填技术，不仅可以有效去除基质干扰，保证6种儿茶酚胺成分回收，孔与孔之间的RSD数据也在10%之内，提高了检测灵敏度和重现性。

SelectCore WCX 96孔板是基于纳谱分析单分散聚合物基质所开发的弱阳离子交换填料的96孔萃取板，具有良好的水可浸润性和化学稳定性，吸附能力大，样品容量高，回收率更稳定等特点。

特点

粒径分布窄，分离效率高
耐受pH范围广
良好的批次间一致性
离子交换容量高，针对强碱性化合物有着较佳的回收率

一、适用范围

适用于血浆中儿茶酚胺的提取与检测。

二、实验步骤

1、固相萃取方法

SelectCore WCX 96孔板25μm, 3mg

（1）准确移取200 μL甲醇于SelectCore WCX 96孔板中，经正压装置过滤，吹干；

（2）准确移取200 μL水于SelectCore WCX 96孔板中，经正压装置过滤，吹干；

（3）准确移取200 μL血浆样本至1.5 mL离心管中，加入200 μL 50 mM乙酸铵溶液，涡旋振荡1 min，于4 ℃条件下13000 rpm离心5 min；

（4）准确移取350 μL上述血浆稀释液于经活化过的SelectCore WCX 96孔板中，经正压装置过滤，吹干；

（5）准确移取200 μL 25mM乙酸铵水溶液于SelectCore WCX 96孔板中，经正压装置过滤，吹干；

（6）准确移取200 μL乙腈于SelectCore WCX 96孔板中，经正压装置过滤，吹干；

（7）准确移取70 μL 2%甲酸的乙腈/水（85/15，V/V）于SelectCore WCX 96孔板中，经正压装置过滤，用96孔收集板接收洗脱液；

（8）用氮气将96孔收集板的洗脱液吹干；

（9）准确移取40 μL 1%甲酸的乙腈/水（2/98，V/V）于96孔收集板中，混匀10 min，上机检测。

2、仪器条件

1）色谱条件：

仪器：Waters ACQUITY UPLC I-Class/Xevo TQ-S

色谱柱：ChromCore PFP, 1.8μm, 2.1×100mm（W-Port）；

流动相：

A：0.1%甲酸

B：乙腈

流速：0.4 mL/min

柱温：40 ℃

进样量：10 µL

梯度：

时间（min）	流动相A （%）	流动相B （%）
0	98	2
1	98	2
2.5	80	20
3	5	95
4	5	95
5	98	2

2）质谱条件：

电离模式：ESI+

监测方式：多反应监测（MRM）

毛细管电压：0.5 kV

脱溶剂气温度：600 ℃

脱溶剂气流量：1100 L/h

三、实验谱图、线性及加标回收率数据

1）实验谱图：

2）线性范围：

2）加标回收率数据：

由实验谱图和加标回收率数据可以看出，使用纳谱分析研发的SelectCore WCX 96孔板可以有效去除血浆样品中的干扰物质，保证测定结果的准确性和可靠性，即使血浆中儿茶酚胺含量较低或者在低浓度加标的情况下，含量测定或加标回收率结果都能有所保证。

相关产品货号信息

常规规格货号
产品描述	货号
ChromCore PFP 1.8μm, 2.1×100mm（W-Port）	A043-018012-02110S-W
SelectCore WCX 96孔板 25μm, 3mg; 1/pkg	WCX025-96WP03-1
SelectCore WCX 96孔板 25μm, 5mg; 1/pkg	WCX025-96WP05-1
SelectCore WCX 96孔板 25μm, 10mg; 1/pkg	WCX025-96WP10-1