细黄链霉菌：用于抑制阳性和阴性细菌及丝状真菌

                 细黄链霉菌：用于抑制阳性和阴性细菌及丝状真菌

细黄链霉菌是链霉菌属放线菌。其代谢产物中含有生长素、抗菌素、苯乙酸、琥珀酸及细胞分裂素等作物生长所必须的生长调节剂成分，具有转化土壤中氮、磷、钾，提高土壤肥力，减少化肥用量;抑制病菌繁殖，防病保苗;刺激细胞分裂，促进作物生根、发芽、成熟，提高作物产量;促进有效物质合成，显著提高农产品的品质等作用，达到“增产增收、保水养田、抑制病害、提高品质”四效合一的功效。

一、菌种简介

平台编号：Bio-17233

提供形式：冻干物

英文名称：Streptomyces microflavus

中文名称：细黄链霉菌

属名：Streptomyces

种名加词：microflavus

其它保藏中心编号：=AS 4.262

来源历史：←中国科学院微生物所

资源归类编码：15131517101

模式菌株：非模式菌株

主要用途：a:2:{i:0;s:4:分类;i:1;s:4:研究;}

具体用途：抑制阳性和阴性细菌及酵母及丝状真菌

生物危害程度：四类

致病对象：无

培养基编号1：0012

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保存方法：a:3:{i:0;s:14:真空冷冻干燥法;i:1;s:8:矿物油法;i:2;s:10:定期移植法;}

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用途：抑制阳性和阴性细菌及酵母及丝状真菌

注意事项：仅用于科学研究或者工业应用等非医疗目的不可用于人类或动物的临床诊断或治疗，非药用，非食用（产品信息以出库为准）               

二、培养方法

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

三、实验内容

1、称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查

2、干热灭菌:装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物

3、高压蒸汽灭菌:加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查

4、过滤除菌:组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

四、操作步骤

①将冻存管进行水浴（霉菌30℃，细菌37℃）溶解，快速振摇溶解；

②使用酒精棉擦拭冻存管外壁消毒，随后转移至安全柜操作；

③旋开管盖，将溶解液全部吸出，打入1-2个琼脂平板（每块平板约200μL，培养厌氧菌需将培养基提前置于厌氧环境中除氧24h）；

④涂布均匀后转移至上述培养条件下培养。

五、注意事项

1）冻干首次活化，干粉要全部用完，不能预留，用 0.1-0.2ml 的培养液或无菌水溶解，接种在 2 支斜面上，因冻干粉处于休眠状态，请勿接种多支斜面或平板，以避免因接种量不足而导致复苏不成功；如有不明白之处，请务必先咨询我单位技术人员，避免不必要的损失；

2）微生物菌种应保藏于低温、清洁干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；

3）菌种操作应在无菌条件下进行；转种完毕，应经灭菌再做丢弃处理；

4）应根据菌种状况及时转接，冻干菌种保藏时间通常为 2-25 年；

5）菌种使用过程中如出现杂菌污染或菌种生产性能下降，应及时和微生物菌种查询网联系。

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