摘要:本实验采用高效液相色谱法,使用 Venusil 5 µm HILIC 色谱柱,以 0.02 mol/L 磷酸二氢钾缓冲液与乙腈为流动相对氰乙酸等混合对照溶液进行测试,实验结果显示,混合对照溶液中氰乙酸、氰乙酸甲酯、2,4-二氨基-6-羟基-嘧啶、1-硝基-2-(2,6-二氨基-4(H)-4-氧代嘧啶)-4-(4-乙酯基苯基)丁烷峰分离度大于 2.0,可满足实验要求。
关键词:高效液相色谱法;氰乙酸;氰乙酸甲酯;2,4-二氨基-6-羟基-嘧啶;1-硝基-2-(2,6-二氨基-4(H)-4-氧代嘧啶)-4-(4-乙酯基苯基)丁烷;Venusil 5 µm HILIC 色谱柱;
样品信息
实验部分
仪器、试剂与材料
主要仪器设备
高效液相色谱仪,紫外检测器;
试剂材料
实验用水为屈臣氏蒸馏水,磷酸二氢钾为分析纯试剂,乙腈为色谱纯试剂;
混合对照溶液:取氰乙酸、氰乙酸甲酯等对照品,加流动相溶解并稀释制成每 1.0 mL 中约含氰乙酸 1 mg、氰乙酸甲酯 1 µL、2,4-二氨基-6-羟基-嘧啶 0.02 mg、1-硝基-2- (2,6-二氨基-4(H)-4-氧代嘧啶)-4-(4-乙酯基苯基)丁烷 0.02 mg 的溶液,摇匀,经 0.45 µm 微孔滤膜过滤,取续滤液作为混合对照溶液;
高效液相色谱柱:Venusil 5 µm HILIC,4.6 × 250 mm。
色谱条件
色谱柱:Venusil 5 µm HILIC,4.6 × 250 mm;
流动相:0.02 mol/L 磷酸二氢钾:乙腈=20:80(v/v);
流 速:1.0 mL/min;
柱 温:35℃;
进样量:5 µL;
波 长:210 nm。
实验结果
实验结论
使用 Venusil 5 µm HILIC 色谱柱,以 0.02 mol/L 磷酸二氢钾与乙腈为流动相对氰乙酸与氰乙酸甲酯等进行测试,结果表明,混合对照溶液中各化合物峰可实现有效分离,说明 Venusil 5 µm HILIC 色谱柱可用于氰乙酸与氰乙酸甲酯等物质的分离。
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