Agilent 1260 Infinity SFC 串联 Agilent 6490QQQ 质谱系统检测磺胺

摘要

本实验采用Agilent 1260 Infinity SFC 超临界色谱和配置iFunnel 技术的Agilent6490QQQ 质谱系统，Zorbax Rx-sil 亚二微米填料色谱柱快速分析了十四种磺胺，其中两组磺胺异构体得到了完全分离，可用于食品中磺胺的快速定性定量分析。用超临界色谱与串联四极杆质谱(SFC-MSMS) 对十四种磺胺进行分离检测，方法简便，分离度高，分析速度及色谱柱平衡更快速，可显著降低流动相成本，同时产生极少的废弃物，避免高昂的废弃物处置费用。

前言

在兽医临床治疗和疾病预防中，抗生素类药物起着不可替代的作用。磺胺类药物作为历史最悠久的抗生素类药物，被广泛用于预防和治疗食源性动物疾病，目前已经有数十个不同品种，然而过量使用这些抗生素会导致食用动物产品中有残留，影响人类的健康。欧盟已经规定动物源性食品中磺胺的最大残留量为100 μg/ kg。目前测定食品中磺胺类药物残留的分析方法有高效液相色谱法，液相色谱质谱，气相色谱质谱，毛细管电泳法，荧光胺衍生化薄层色谱法等。其中LC-MS/MS 法是检测动物源性食品中兽药残留的一种重要方法，这种方法灵敏度高,选择性和特异性好，能够对低浓度的样品进行很好的定性确认，因此是现在较普遍的测定磺胺残留的方法。但LC-MS/MS 法做到异构体完全分离时分析时间较长，通常需要十五至二十分钟，使用更多的有机溶剂，且在样品前处理后需要挥干有机相溶剂复溶，以减小溶剂效应影响。

采用SFC-MS/MS 法，使用Zorbax Rx-sil 亚二微米填料色谱柱，可以在短时间内对十四种磺胺进行分离，其中分子量同为310 的磺胺二甲氧嘧啶和磺胺多辛，以及分子量同为280 的磺胺甲氧哒嗪，磺胺对甲氧嘧啶和磺胺间甲氧嘧啶都能够达到完全分离，从而满足定量需求。此外，SFC 与LC 是完全正交的方法，对于磺胺的选择性完全不同。

与液态流动相相比，超临界流体先天具有一个巨大的优势，黏性极低，同时扩散性增大，因此具有更好的传质性能。如今，UHPLC 由于其更高的分离速度，以及在可接受的时间内能够提供以往难以实现的分离度而得到广泛接受。相比而言，超临界流动相的低黏度允许应用小粒径的色谱柱或超长色谱柱，而不会产生过高的背压。Agilent 1260 Infinity 分析型SFC 系统可以使用更长的和/或小粒径填料色谱柱在不超过600 bar 系统压力下工作，结合了UHPLC 和SFC 的各自优势，从而可获得更高的性能。

结论

采用超临界色谱法，使用Agilent 1260 Infinity Analytical SFC 系统，Agilent 6490 QQQ 质谱和 Zorbax Rx-sil3.0 × 100 mm，1.8 μm 色谱柱对十四种磺胺进行检测，方法相比常规LC-MS/MS 法更快速，5 分钟内可完成分离，且其中几种分子量相同的异构体均能分离。SFC 与常规LC 是完全正交的方法，选择性差异大，因此可用于LC 互补，解决LC 方法中的一些分离难题。SFC 作为质谱入口技术，与强有机相溶剂完全兼容，样品前处理之后可直接上样。且梯度方法平衡快速，提高了质谱通量。