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中药中齐墩果酸和熊果酸的准确定量分析
2018/08/21 12:59
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方案摘要：
产品配置单：
Agilent 1290 Infinity II 二维液相色谱解决方案
型号： 1290 2D-LC
产地： 德国
品牌： 安捷伦
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OpenLAB 软件
型号： OpenLAB
产地： 美国
品牌： 安捷伦
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Agilent 1290 Infinity II Multisampler
型号： 1290 Infinity II Multisampler
产地： 德国
品牌： 安捷伦
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方案详情：
摘要
质量控制是中药 (TCM) 行业中最重要的任务之一。在质量控制中，要求用 HPLC 方法测定 TCM 中主要化合物的含量。鉴于 TCM 样品的复杂性，目标化合物有可能与其他微量化合物在 HPLC 分离中发生共洗脱。二维液相色谱是一个采用正交色谱柱化学键合相和流动相的强大方法，该方法可分离复杂样品。本应用简报详述了如何开发用于翼首草 (Pterocephali Herbra) 中齐墩果酸和熊果酸定量分析的高分辨率采样二维液相色谱方法。
前言
中药 (TCM) 分析是一项极具挑战的任务，因为无论是一种草药还是复方制剂，含有的成分都非常复杂。为控制 TCM 的质量，需要使用《中国药典》(CHP) 中规定的 HPLC 方法测定其中主要化合物的含量。通常来说，其他化合物将与目标化合物发生共洗脱，从而影响定量准确度。在《中国药典》中，翼首草是一个需要用 HPLC 方法测定齐墩果酸和熊果酸两种目标化合物含量的示例。本研究发现，其他几种化合物会与齐墩果酸和熊果酸发生共洗脱，使现有方法不足以对这些化合物进行定量分析。
为实现正交分离，本应用简报使用两根选择性不同的 Agilent InfinityLab Poroshell 120 色谱柱（EC-C18 和 Phenyl-Hexyl），并在高分辨率采样二维液相色谱中采用了不同的流动相条件。在选定时间范围内收集几个涵盖一维色谱图中整个峰面积范围的小体积馏分，以此测定两个目标化合物。每次切割都驻留在采样环中，并在第二维中对所有切割进行连续分析。这一模式可确保所有选定化合物均转移至第二维，并在其中得到分析。因此，选定的共洗脱化合物都接受了高分辨率采样处理，以在第二维中得到分析。如之前出版的技术概述所示，这一操作可实现可靠的定量分析。
结论
本应用简报展示了用于复杂 TCM 分析的高分辨率采样 Agilent InfinityLab 二维液相色谱解决方案。高分辨率采样二维液相色谱可以良好分离第一维中的干扰化合物，实现对目标化合物可靠的定量分析。为了在二维分析的每个环节中实现所需的分离，Agilent InfinityLab Poroshell 120 色谱柱提供了最适合的填料粒径。为这款色谱柱还具有广泛的选择性，适用于不同有机相，可提供成功实现二维液相色谱分离所需的正交分离。本应用简报中开发的高分辨率采样二维液相色谱方法为复杂的 TCM 实现了可靠的定量分析。
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