使用高分辨率液质联用系统对潜在的遗传毒性化合物进行筛查、鉴定和定量分析——使用 Agilent 6545 精确质量数 Q-TOF 系统和 MassHunter Mass Profiler 软件对洗必泰原料药进行分析

摘要

本研究展示了如何通过对药物进行常规筛查，对潜在的遗传毒性化合物进行鉴定和定量分析。在本应用简报中，我们使用 Agilent 6545 Q-TOF 液质联用系统采集含洗必泰成分的药品样品的精确质量数据。利用 Agilent MassHunter Mass Profiler 软件挖掘数据并比较不同样品，以生成化合物差异列表。在精确质量数据库中根据差异列表搜索鉴定出的潜在遗传毒性化合物 4-氯苯胺。采用全离子 MS/MS 采集模式通过 MS/MS 谱库匹配确认 4-氯苯胺，并使用外标对该物质进行定量分析。该工作流程适用于批次间样品分析，可对已知的潜在遗传毒性化合物进行检测和定量分析。

前言

原料药在长期储存或储存不当时，可能产生潜在的遗传毒性化合物。对遗传毒性化合物进行检测、鉴定和定量分析是一个耗时的过程。监管机构要求对遗传毒性化合物的形成进行报告。软件工具经过最新升级后，支持对复杂样品中的潜在遗传毒性化合物进行快速的高性价比检测。Agilent MassHunter Mass Profiler (MP) 软件能够对两组样品进行比较，并测定它们之间的任何显著差异。MP 中的主成分分析 (PCA) 工具可根据鉴定出的差异标记物对化合物进行分类。差异标记物指的是与对照品相比，浓度超出指定值的化合物。定制的精确质量数据库可用于鉴定样品之间的差异。在本研究中，通过对降解和未降解洗必泰样品的 MP 分析，得到了样品间有统计学差异的化合物的列表。使用 MP 软件中的安捷伦 ID 浏览器功能，在包含潜在遗传毒性化合物的定制数据库中对这些化合物进行搜索。利用精确质量谱库匹配进一步确认这些化合物，然后对其进行定量分析。图 1 是本研究所采用的工作流程。

结论

本应用简报表明， 使用高分辨率 LC/MS 能够对潜在的遗传毒性化合物进行筛查、鉴定与定量分析。通过全离子 MS/MS 数据与 Agilent MassHunter Mass Profiler 软件（7.0 版）的结合，获得了简化的工作流程。自动化差异标记物分析显示样品与对照组之间存在显著差异。工作流程中还包括使用 PCDL 自动化检测和鉴定作为目标化合物的潜在遗传毒性杂质。利用全离

子 MS/MS 方法可用于同时生成定量离子和定性离子。这样能够对目标化合物进行定量分析。在利用这项技术处理的测试样品中测得 4-氯苯胺的浓度约为 29 ng/mL 或 0.02%（分析线性范围为 0.1-300 ng/mL）。该工作流程可作为一种常规药物样品分析方法，对潜在的遗传毒性化合物进行鉴定和报告。