HotStart Bst4.2 大规格(125ml包装酶)
商品属性:
货号 | 规格 | 产品名称 |
P-PR1244-100万U | 100万U | HotStart Bst4.2 大规格(125ml包装酶) |
产品介绍:
描述:
Bst4.2 DNA/RNA Polymerase 经酶电子重构架和进化筛选(in silico Design & invitro Evolution),其为Bst4.0 的升级品,通用于 DNA 或 RNA 的 LAMP 或RT-LAMP 扩增。
性能提升包括 :
(1 )Bst 4.2 全系包含 热启动Aptamer,该配体确保酶在<30℃时,酶活封闭效率>95%,在>60℃时 1min 内完全释放酶活。该特性利于室温建立反应体系,并大幅降低了低温条件下的非特异扩增;
(2)反应温度提升到 70℃,大幅降低引物 Dimer 的形成,提高扩增特异性,并使得粗样品核酸释放更加充分;
(3)全系包含 Helicaser,因此,允许在不使用 F3/B3 引物的情况下进行 LAMP 扩增(easy LAMP),并允许 FIP/BIP 的引物用量降低一倍。这将进一步降低非特异扩增,并使得扩增均一性大幅提升。
特殊说明:
注意: HotStart Bst 4.2 DNA/RNA Polymerase(8U/μl)不含有甘油,可用于冻干体系的建立。
储存:长期保存请置于-20℃以下(12 个月有效);制品反复冻融 10 次不影响性能,但应避免反复冻融;制品由于含有高浓度的糖组分,-20℃保存的酶制品,在融化时可能会有结晶物,此时在 30℃的温度下融化,过高的温度可能会导致热启动性能下降。一经融化推荐置于 2-8℃保存,在此条件下制品稳定储存 6 个月。
特殊说明:
(1) Bst4.2 DNA/RNA Polymerase 在用于 LAMP 扩增时的推荐反应温度为 65-70℃,最佳反应温度为 70℃。因此其可完全替代 的 Bst4.0 系列,用于标准 LAMP的扩增。
(2) 由于 Helicaser 的反应温度为 70℃,因此在进行eLAMP 扩增时,反应温度为 70℃。
1. 标准 LAMP 扩增
1.1 10xLAMP Primer Mix:FIP/BIP=16 μM each; LF/LB=4
μM each; F3/B3=2 μM each
1.2 配制 LAMP 反应体系
10xBst4.2 Buffer(Mg2+ free) 2.5 μl
100mM Mg2+
1.5 μl
dNTP Mixture(10 mM each) 3 μl
10xLAMP Primer Mix 2.5 μl
HotStart Bst 4.2(8U/μl) 1 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到总体积 25 μl
1.3 反应体系配好后,置于 65-70°C 反应 20~30min。
2. eLAMP 扩增
2.1 10xeLAMP Primer Mix : FIP/BIP=8 μM each;
LF/LB=4 μM each。
注意:eLAMP(easy LAMP)为去除 F3/B3 引物的方法,为 Bst4.2 系列专用的使用策略,对于大多数引物组,在Helicaser 的加持下,扩增速度几乎不受影响。如引物扩增效率低,可提高 FIP/BIP 浓度到 12~16uM。
2.2 配制 eLAMP 反应体系
10xBst4.2 Buffer(Mg2+ free) 2.5 μl
100mM Mg2+
1.5 μl
dNTP Mixture(10 mM each) 3 μl
10xeLAMP Primer Mix 2.5 μl
HotStart Bst 4.2(8U/μl) 1 μl
模板 DNA/RNA X μl
ddH2O 到总体积 25 μl
2.3 eLAMP 的扩增温度为 70°C,反应 20~30min。
注意事项:
(1) 制品中包含高浓度的盐组分,使用时做好个人防护,防止制品与皮肤、眼、鼻、呼吸道等接触和吸入,一旦接触或吸入,请用大量的清水冲洗。
(2) 防止气溶胶污染,尽可能进行分区操作。
![1.png 1.png](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/6c3845b4-40f6-4da9-9255-cd3d60482c38.jpg)
![5.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/e61abc57-2a7c-4156-9260-f14e6ba63934.jpg)
![6.png](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/62851bc5-3a8d-40e2-a984-d347a9c64d3e.jpg)
![7.png](https://img1.17img.cn/17img/images/202408/uepic/1321522b-6687-4131-a7b4-7a74974aa01c.jpg)
pcr相关试剂实验结果分析:
PCR实验结果的分析涉及多个方面,包括实验操作、试剂质量、实验条件等,这些因素都会影响PCR实验的成功率和结果的准确性。以下是对PCR实验结果分析的一些关键点:
循环次数过多:增加模板量减少循环次数,缩短退火时间及延伸时间,或改用两种温度的PCR循环,可以有效避免循环次数过多导致的问题。
退火温度过低:退火温度的适当调整对于PCR反应的成功至关重要,过低的退火温度可能导致非特异性扩增,影响结果的准确性1。
电泳体系问题:包括凝胶中缓冲液和电泳缓冲液浓度相差太大、凝胶没有凝固好、琼脂糖质量差等问题,这些都会影响DNA片段的分离效果。
试剂盒问题:运输储存不当可能引起试剂盒失效,试剂盒本身质量问题如引物选择、循环参数设置不当也可能导致实验失败1。
降解的陈旧模板:使用降解的陈旧模板进行扩增容易产生涂布,影响结果的解读1。
PCR假阴性结果:可能由引物长度不够、试剂浓度不标准、靶序列突变或缺失、循环参数设置错误、标本中有Taq酶抑制剂、PCR产物检测系统灵敏度不够等因素引起。
为了获得准确的PCR实验结果,需要注意以下几点:
确保PCR反应体系中各种试剂的配比和操作步骤的精准度。
在PCR反应过程中需要对PCR产物进行实时监测,以便及时对反应条件进行调整。
防止样本的污染和交叉感染,以免影响PCR反应的准确性和可靠性。
通过上述分析,可以更好地理解和控制PCR实验中的关键因素,从而提高实验结果的准确性和可靠性。
公司正在出售的产品:
内源性一氧化碳CO测试盒测组织 50T/48样 比色法 | 细胞血管紧张素Ⅰ转化酶2(ACE2)活性比色法定量检测试剂盒 |
大鼠糖原合成酶激酶(GSK)elisa检测试剂盒 | 人α酮戊二酸脱氢酶(α-KGDHC)elisa分析检测试剂盒 |
人甘油二酯(DAG)elisa检测试剂盒 | 大鼠白介素23(IL23)elisa检测试剂盒 |
无内小量质粒抽提试剂盒 | 转移相关蛋白2抗体 |
WB二抗稀释液 100ml | MTA2 |
小鼠甲基化酶(Methylase)elisa检测试剂盒 | 小鼠铜蓝蛋白(CP/CER)elisa检测试剂盒 |
BOLA2蛋白抗体 BOLA2 | FAM101B |
CD361抗体 CD361 | FAM101B蛋白抗体 |
微管蛋白β tubulin抗体 Tubulin β Anti-tubulin Beta | Rabbit Anti-Chicken IgM / Cy3 |
环指蛋白139抗体 Anti-RNF139 | 鞘氨醇激酶1抗体 Anti-SPHK1 |
膜相关蛋白Numb抗体 Anti-NUMB | Cy3标记的兔抗鸡IgM |
γ氨基丁酸转氨酶抗体 ABAT | 白介素-17E抗体 IL17E |
CAST1蛋白抗体 | 异常甲基化蛋白2抗体 HIC2 |
ERC2 | 干扰素α11抗体 Interferon alpha 11 |
中介素抗体 ADM2 | HotStart Bst4.2 大规格(125ml包装酶)线粒体内膜转位酶8A/耳聋/肌张力障碍肽抗体 TIMM8A |
构成激活过氧化酶活化增生受体γ样蛋白2抗体 FAM120C | 纤维蛋白原γ链抗体 Fibrinogen gamma chain |
HotStart Bst4.2 大规格(125ml包装酶)信息由上海博湖生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于HotStart Bst4.2 大规格(125ml包装酶)报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应HotStart Bst4.2 大规格(125ml包装酶)外,上海博湖生物科技有限公司还可为您提供sPfu DNA polymerase(2.5U/μl)高保真聚合酶、RnaseOUT-RNase Inhibitor(80U/ul), 无甘油、RNase Away 即用型强力 RNase 灭活剂等产品,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。