Taq DNA 连接酶是一种热稳定性连接酶,能够催化磷酸二酯键的形成,使与同一互补靶 DNA 链杂交的两条相邻寡核苷酸链的 5´-磷酸末端和 3´-羟基末端通过磷酸二酯键相连。该连接反应只有当两条寡核苷酸链与互补靶 DNA 完全配对,并且两条寡核苷酸链之间没有空隙的条件下才可发生(nicking DNA连接)。因此,可以用它来检测单碱基替换。在 45℃-70℃ 范围内,Taq DNA 连接酶均有活性。该酶经耐热性改造在95℃加热5min后仍然保留全部活性。
应用
双链DNA切刻的修复
用于Gibson组装方法的建立
具有极高的耐热性,适用LCR反应(Ligase Chain Reaction)
适用MLPA反应(Multiplex Ligation-dependent Probe Amplification)
活性定义
1单位指 20μl反应体系中,50℃条件下,15分钟内能使50%的1pmol的接头片段(12 bp 粘性末端)发生连接所需要的酶量。
储存
-20℃可保存两年。
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