银染清除剂
产品及特点 银染是目前最灵敏的非同位素蛋白质和核酸染色技术,对银染后的条带进行原位酶切(in-gel digestion)和后续 MS 分析是蛋白组学研究的重要手段。大量研究表明如果预先对银染条带进行去除银粒子的处理,则原位酶切更加有效,MS 灵敏度更高。目前最常用的脱银粒子清除方法(如铁氰酸钾/硫代硫酸钠法、硫酸铜/硫代硫酸钠法)的主要缺点是引入的金属离子会影响后续反应、有的成分还有毒性(如铁氰酸钾)、工作液极不稳定。为克服这些缺点,本公司开发了无毒环保的新型
银粒子清除剂,它具有下列特点:
1. 高效,5 分钟处理即可清除 PAGE 胶中银染留下的银粒子。
2. 成分不含金属离子,跟原位酶切和质谱分析(包括 MALDI-TOEMS)等后续反应高度兼容,脱银后 PAGE 胶还可以再次银染或考染。
3. 成分无毒环保,保障研究人员和环境的安全。
4. 既可用于蛋白质银染后的脱银,也可用于核酸银染后的脱银。
5. 即开即用,使用非常方便,不需要配制各种溶液。
规格及成分
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运输及保存 常温运输和保存,有效期一年。
使用方法
1. 银染后,切下含所需蛋白条带的 PAGE 胶条用自备的去离子水摇晃浸泡 2 次,每次 5 分钟以去除电泳缓冲液。注意:不要使用整块 PAGE 胶。
2. 用干净镊子将胶条转移到 5-10 mL 的容器中(如 5 mL 的塑料管或 10 mL 的细菌培养管),加入 1 mL 银染清除剂溶液 A,摇晃 5 分钟,去掉溶液 A。
3. 再加入 1 mL 银染清除剂溶液 A,摇晃 5 分钟,去掉溶液 A。
4. 加入 1mL 银染清除剂溶液 B 工作液,摇晃直到颜色脱去(一般不到 20 分钟)。溶液 B工作液配制方法:将 33uL 溶液 B 加入到 1mL 的溶液 A 中混合均应,现用现配。
5. 取出脱色后的胶条,在去离子水中摇晃浸泡二次,每次 5 分钟。
6. 胶条可以直接用于后续的再染色或质谱分析(需要先甲酸酸化和脱水处理)。
附:蛋白胶条质谱分析流程(仅仅供参考,本试剂盒不提供相关试剂)
1. 用 1%甲酸浸泡脱银后的胶条 2 次,每次 5 分钟。
2. 用水-乙腈-甲酸混合液(49.5:49.5:1)浸泡 5 分钟。
3. 用乙腈浸泡 5 分钟。真空干燥去除残留水分。
4. 将胶条置于含 8 ng/uL Trypsin 的 25 mM 碳酸铵溶液中浸泡 30 分钟。
5. 去除多余溶液,加入 20 uL 25 mM 碳酸铵溶液,37℃保温 8 小时。
6. 加 10 uL 10%甲酸终止反应。收集溶液(含有酶解的蛋白产物)。
7. 用水-乙腈-甲酸混合液(49.5:49.5:1)浸泡 10 分钟,收集溶液。
8. 用乙腈浸泡 10 分钟,收集溶液。汇集上面三步收集的溶液,真空干燥。
9. 将干燥的多肽溶解于水-乙腈-甲酸混合液(49.5:49.5:1)中,并 1:1 与10mg/mL 的α-氰基-4-羟基肉桂酸溶液(α-Cyano-4-hydroxycinnamicacid)混合,此溶液溶剂为水-乙腈-甲酸混合液(49.5:49.5:1),然后直接用于 MALDI-TOFMS 分析。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
银染清除剂信息由上海博尔森生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于银染清除剂报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应银染清除剂外,上海博尔森生物科技有限公司还可为您提供预染蛋白质电泳分子量标准(蛋白Marker范围11-180 kDa)、β-gal半乳糖苷酶检测试剂盒、一站式Western印迹套装--洗膜液等产品,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。