土壤 N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(S-NAG)活性检测试剂盒说明书
微量法
注意:本产品试剂有所变动,请注意并严格按照该说明书操作。
规格:100T/48S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致
![QQ截图20220615142154.jpg QQ截图20220615142154.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/202206/uepic/6739c954-e74b-464f-b2c5-8a177d98cd95.jpg)
溶液的配制:
1. 试剂二:临用前取1瓶加入2.5 mL蒸馏水溶解,用不完的试剂-20℃分装保存4周;
2. 标准品:5 mmol/L的对硝基苯酚溶液。
产品说明:
![QQ截图20220615142154.jpg QQ截图20220615142154.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/202206/uepic/6937422b-6fa2-4240-914a-3755dcb91159.jpg)
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰、30-50目筛、蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
新鲜土样自然风干或37℃烘箱风干,过30-50目筛。
二、测定步骤
1、 分光光度计/酶标仪预热30min,波长调至400nm,分光光度计蒸馏水调零。
2、 标准溶液的稀释:临用前取20μL 5 mmol/L的对硝基苯酚溶液,加入980μL试剂一,充分混匀,配制成100 μmol/L标准液使用,现用现配。(实验中每管需要100μL,为减小实验误差,故配制大体积。)
3、 加样表:
![QQ截图20220615142154.jpg QQ截图20220615142154.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/202206/uepic/8b286034-6f36-486e-a3e4-1b6bbec788eb.jpg)
三、S-NAG 活力计算
![QQ截图20220615142154.jpg QQ截图20220615142154.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/202206/uepic/0bc1b60f-8695-4301-a60e-a2c133bd66d9.jpg)
注意事项:
当ΔA大于1时,建议将上清液稀释后进行测定;当ΔA小于0.02时,建议延长反应时间。计算公式中注意乘以稀释倍数或注意反应时间变化。
实验实例:
1、 取两管 0.03g 土样,即为测定管和对照管,按照测定步骤操作,记为 A 测定管、A 对照管。用 96 孔板测得计算ΔA 测定=A 测定管-A 对照管=0.305-0.271=0.034,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管=0.412-0.046=0.366,计算酶
活得:S-NAG 活力(U/g 土样)=0.432×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W=0.432×0.034÷0.366÷0.03=1.3377U/g 土样。
2、 取两管 0.03g 林土样,即为测定管和对照管,按照测定步骤操作,记为 A 测定管、A 对照管。用 96 孔板测得计算ΔA 测定=A 测定管-A 对照管=0.325-0.278=0.047,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管=0.412-0.046=0.366,计算
酶活得:S-NAG 活力(U/g 土样)=0.432×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W=0.432×0.047÷0.366÷0.03=1.8492U/g 土样。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
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