土壤芳基硫酸酯酶(S-ASF)活性检测试剂盒说明书
可见分光光度法
规格:50T/24S
产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致,
![QQ截图20220615142154.jpg QQ截图20220615142154.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/202206/uepic/69493a87-6bb6-4d55-8260-5fe1f0390ac0.jpg)
溶液的配制:
1、 试剂一:甲苯自备;
2、 试剂三:临用前取 1 瓶加入 10mL 蒸馏水,充分溶解备用,用不完的试剂-20℃分装保存一周,避免反复冻融;
3、 标准品:5mmol/L 的对硝基苯酚溶液。临用前用试剂二将标准品稀释 50 倍得 100μmol/L 的标准溶液。(具体稀释过程见操作步骤)
产品说明:
土壤芳基硫酸酯酶来自于土壤微生物,能酶促土壤有机硫化物转化为植物可吸收的无机态硫,在硫素的生物化学循环和植物的硫营养代谢中具有重要的作用,是反映土壤质量的一个重要生物学指标。
S-ASF能够催化对-硝基苯硫酸钾生成对-硝基苯酚,后者在410nm有特征光吸收。
![QQ截图20220615142154.jpg QQ截图20220615142154.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/202206/uepic/6ea7b7a7-4789-4b82-a5de-b1d0c0ed55dc.jpg)
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计、1mL玻璃比色皿、台式离心机、恒温水浴锅/恒温培养箱、可调式移液器、研钵、冰、30-50目筛、甲苯(不允许快递)和蒸馏水。
操作步骤:
一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
新鲜土样自然风干或 37℃烘箱风干,过 30-50 目筛。
二、测定步骤
1、 分光光度计预热30min,波长调至410nm,蒸馏水调零。
2、 标准溶液的稀释:取20μL 5mmol/L的对硝基苯酚溶液,加入980μL试剂二,充分混匀,配制成100μmol/L标准液待测,现用现配。(实验中每管需要500μL,为减小实验误差,故配制大体积。)
3、 加样表:
![QQ截图20220615142154.jpg QQ截图20220615142154.jpg](https://img1.17img.cn/17img/images/202206/uepic/e80c40d6-e05e-4635-b220-048acff1baf7.jpg)
三、S-ASF活力计算
单位的定义:每天每g土样中产生1μmol对-硝基苯酚定义为一个酶活力单位。
S-ASF活力(U/g 土样)=ΔA测定÷ (ΔA标准÷C标准)×V反总÷W÷T=2.28×ΔA测定÷ΔA标准÷W
T:反应时间,1h=1/24d;V反总:反应体系总体积:9.5×10-4L;C标准:标准溶液浓度,100μmol/L;W:样本质量,g。
实验实例:
1、 分别称取两管 0.1g 三叶草土样,分别记为测定管和对照管,按照测定步骤操作,用 1mL 玻璃比色皿测得计算ΔA 测定=A 测定管-A 对照管=0.627-0.108=0.519,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管=0.568-0.002=0.566,计算酶活得:
S-ASF 活力(U/g 土样) =0.456×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W=2.28×0.519÷0.566÷0.1=20.9067 U/g 土样。
2、 分别称取两管 0.1g 土样,分别记为测定管和对照管,按照测定步骤操作,用 1mL 玻璃比色皿测得计算ΔA 测定=A 测定管-A 对照管=0.442-0.102=0.34,ΔA 标准=A 标准管-A 空白管=0.568-0.002=0.566,计算酶活得:
S-ASF 活力(U/g 土样) =0.456×ΔA 测定÷ΔA 标准÷W=2.28×0.34÷0.566÷0.1=13.69611 U/g 土样。
特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!
土壤芳基硫酸酯酶活性检测试剂盒 可见分光光度法信息由上海博尔森生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于土壤芳基硫酸酯酶活性检测试剂盒 可见分光光度法报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。除供应土壤芳基硫酸酯酶活性检测试剂盒 可见分光光度法外,上海博尔森生物科技有限公司还可为您提供羧酸酯酶(CarE)活性检测试剂盒 微量法、几丁质酶活性检测试剂盒微量法 微量法、乙醛脱氢酶(ALDH)活性检测试剂盒 微量法等产品,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴。