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  • 单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)活性检测试剂盒 微量法
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单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)活性检测试剂盒 微量法

供货周期: 7天
品牌: 博尔森
型号: 100T/96S
货号: BES-2297BTK
报价: ¥1900
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产品介绍

单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)活性检测试剂盒说明书

 微量法

规格:100T/96S

产品组成:使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致

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溶液的配制:

1、试剂二:临用前加入 2 mL 蒸馏水充分溶解,4℃保存;

2、试剂三:临用前加入 3.33 mL 蒸馏水充分溶解待用,可溶解后分装-20℃保存,避免反复冻融;

3、试剂四:液体置于试剂瓶内 EP 管中。临用前加 2 mL 试剂一充分溶解,可溶解后分装-20℃保存,避免反复冻融。

产品说明:

MDHAR催化MDHA还原生成AsA,在抗坏血酸氧化还原代谢中具有重要作用。

MDHAR催化NADH还原MDHA生成AsA和NAD+,NADH在340 nm有特征吸收峰,但是NAD+没有。通过测定340nm光吸收下降速率,来计算出MDHAR活性。

注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。

需自备的仪器和用品:

研钵/匀浆器、冰、台式离心机、紫外分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪和双蒸水。

操作步骤:

一、样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)

1、组织:按照组织质量(g):提取液体积(mL)1:5-10 的比例(建议称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液)进行冰浴匀浆。10000rpm,4℃离心 10min,取上清置冰上待测。

2、细菌、细胞:按照细胞数量(104个):提取液体积(mL)为 500-1000:1 的比例(建议 500 万细胞加入 1mL提取液),冰浴超声破碎细胞(功率 300w,超声 3s,间隔 7s,总时间 3min);然后 10000rpm,4℃,离心 10min,取上清置于冰上待测。

二、测定步骤

1、 分光光度计/酶标仪预热30min,调节波长到340nm,蒸馏水调零。

2、 试剂一在25℃水浴锅中预热30min。

3、 依次在微量石英比色皿/96孔UV板中加入下列试剂

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三、MDHAR 活性计算

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实验实例:

1、 取 0.1g 橙子果肉加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆。10000rpm,4℃离心 10min,取上清置冰上,按照测定步骤操作,用微量石英比色皿测得计算 ΔA 测定管=A1 测定-A2 测定=0.8701-0.8396=0.0305,ΔA 空白管=A1 空白-A2空白=0.5515-0.5474=0.0041,按样本质量计算酶活得:

MDHAR (U/g 质量) =0.268×(ΔA 测定管-ΔA 空白管)÷W=0.268×(0.0305-0.0041)÷0.1=0.070752 U/g 质量。

注意事项:

1. 当 ΔA 测定大于 0.3 时(96 孔板 ΔA 测定大于 0.2),建议客户稀释样本或者调整试剂一和上清液的比例(如将 400μL 试剂一+300μL 上清液改为 600μL 试剂一+100μL 上清液)后进行测定。

2. 当 ΔA 测定过小时,建议客户提高样本量或者调整试剂一和上清液的比例(如将 400μL 试剂一+300μL 上清液改为 200μL 试剂一+500μL 上清液)。

3. 当 A1 大于 1.5 时(酶标仪测定时 A1 大于 2 时),建议将样本稀释进行测定。

4. 空白管为检测各管试剂组份的检测孔,正常情况下,其 OD 值在 0.5 左右(96 孔板在 0.3 左右),变化不超过 0.01。

5. 由于提取液中含有一定浓度的蛋白(约 1mg/mL),所以在测定样品蛋白浓度时需要减去提取液本身的蛋白含量。

特别提示:本公司的所有产品仅可用于科研实验,严禁用于临床医疗及其他非科研用途!

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工商信息

企业名称

上海博尔森生物科技有限公司

企业信息已认证

企业类型

信用代码

91310117MA1J4K3L3L

成立日期

2020-09-02

注册资本

100

经营范围

一般项目:从事生物科技、医药科技领域內的技术开发、技术咨询、技术服务;仪器仪表、实验室设备及耗材、玻璃制品、电子产品、第一类医疗器械、化工原料及产品(除危险化学品、监控化学品、烟花爆竹、民用爆炸物品、易制毒化学品)销售;货物或技术进出口(国家禁止或涉及行政审批的货物和技术进出口除外)

联系方式
单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)活性检测试剂盒 微量法由上海博尔森生物科技有限公司为您提供,货号BES-2297BTK,规格:100T/96S,CAS号:,如您想了解更多关于单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)活性检测试剂盒 微量法价格、单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)活性检测试剂盒 微量法结构式、批发、用途等信息,欢迎咨询。除供应单脱氢抗坏血酸还原酶(MDHAR)活性检测试剂盒 微量法外,还可为您提供ADPG焦磷酸化酶(AGP)活性检测试剂盒 微量法、乙酰辅酶A羧化酶试剂盒微量法 微量法、胞浆异柠檬酸脱氢酶(ICDHc)活性检测试剂盒 微量法等试剂,公司有专业的客户服务团队,是您值得信赖的合作伙伴,博尔森生物客户服务电话400-860-5168转4928,售前、售后均可联系。

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