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北京桑翌实验仪器研究所

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解决方案

原代细胞和传代细胞培养有哪些区别

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生物产业

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原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养,也称初代培养。原代培养是将培养物放置在体外生长环境中持续培养,中途不分割培养物的培养过程。 传代培养是指需要将培养物分割成小的部分,重新接种到另外的培养器皿(瓶)内,再进行培养的过程。

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INFORS Celltron CO2培养箱专用振荡器

Celltron

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摇床振幅如何正确选择?

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生物产业

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摇床的振幅指托盘在做圆周运动时候的直径,有时候我们也叫“振荡直径”或“轨道直径”符号:Ø。作为标准,Infors提供振幅为3mm,25mm和50mm的摇床。

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INFORS Minifors 实验室台式标准发酵罐

Minifors

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细胞培养中的常见问题及解决方法

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生物产业

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细胞培养也叫细胞克隆技术,指的是细胞在体外条件下的生长,在培养的过程中细胞不再形成组织,培养物是单个细胞或细胞群。细胞在培养时都要生活在人工环境中,由于环境的改变,细胞可能会受一些其他因素的影响,从而导致在细胞培养过程中出现各种各样的问题,常见问题有哪些呢?

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INFORS Multitron Standard 标准振荡培养箱

Multitron Standard

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细胞培养的步骤和注意事项

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将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。将融化的细胞移入离心管中,加入37℃预热的DMEM完全培养基中,轻轻吹匀,离心,弃上清液。 加入DMEM完全培养基清洗,弃上清液。加入DMEM完全培养基,轻轻吹打混匀,制成细胞悬液,接种于培养皿/瓶中,在含5% CO2的细胞培养箱中培养。

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INFORS Labfors Lux 平板LED光照发酵罐

Labfors Lux LED Flat Panel

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为什么细胞培养需要二氧化碳?

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CO2既是细胞代谢产物,也是细胞所需成分,它主要与维持培养液的pH有直接关系。动物细胞多数需要微碱性环境,pH为7.2~7.4,以不超出6.8~7.6为宜。在细胞培养过程中,随着CO2释放量的增多,培养基会变酸,因此常加入NaHCO3(与CO2溶于水后所形成的H2CO3构成一个缓冲对)来调节pH,以保持培养液中溶解的二氧化碳的浓度。同时细胞培养的器皿需要一定程度的透气,以便于气体的交换。

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INFORS Multifors平行生物反应器

Multifors

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贴壁细胞培养与悬浮细胞培养的区别

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来自脊椎动物的大多数细胞,除了造血细胞系和少数其他细胞系,都是贴壁依赖性的,必须在经过专门处理以允许细胞粘附和扩散的合适基质上培养。然而,许多细胞系也适用于悬浮培养。同样,大多数昆虫细胞系在贴壁培养或悬浮培养中生长良好。

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INFORS Minifors Cell实验室台式生物反应器

Minifors Cell

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使用二氧化碳培养箱如何有效控制污染?

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污染是细胞培养失败的主要原因之一。CO2培养箱应具备良好的污染控制放置培养过程中的细胞污染。 污染源可分为直接或间接来源。直接来源是受污染的试剂、培养基或种子培养物。间接污染源包括实验室表面、设备和人员。细菌主要通过交叉污染传播。这可以通过良好的无菌技术、定期清洁和严格遵守设备定期维护计划来防止。良好的设备功能设计和定期使用自动自净化程序可进一步帮助减少污染。

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INFORS Multifors平行生物反应器

Multifors

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湿度控制在摇床培养中的应用

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细胞培养中培养箱内的相对湿度控制是非常重要的,通常对于细胞培养体积较小、培养时间较长的情况下,需要进行湿度控制,饱和的湿度环境可以避免培养液中二氧化碳逃离,保持pH值稳定,也能防止由于干燥使培养液中水分蒸发,渗透压升高,导致细胞培养失败。

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INFORS Minifors Cell实验室台式生物反应器

Minifors Cell

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如何正确使用二氧化碳培养箱?

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二氧化碳培养箱,作为生物工程所需要的设备,是细胞、组织、细菌培养的关键设备。而作为重中之重的细胞培养,二氧化碳培养箱需要严格密封,并准确控制腔体内部的参数如:温度、样品的pH以及相对湿度等。

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INFORS Multifors平行生物反应器

Multifors

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如何在恒温摇床中培养细胞

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为了在恒温摇床中成功培养细胞培养物,需要温和的混合、主动和卫生的加湿,以避免蒸发和精确的 CO2调节,从而使培养基中的 pH 值更稳定。此外,无菌在防止较长过程中的污染方面起着重要作用。

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INFORS Minifors Cell实验室台式生物反应器

Minifors Cell

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二氧化碳培养箱如何进行清洁及消毒灭菌

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清洁是指去除灰尘、污垢和有机污渍。清洁方法包括刷、吸、干擦、洗涤或用浸泡肥皂水或清洁剂的湿布拖擦。粉尘、污物以及有机物是微生物的栖身之所,并可能影响除污染剂(抗菌剂、化学杀菌剂以及消毒剂)的作用。

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INFORS Multitron 振荡培养箱(细胞工厂)

Multitron Cell

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Multitron CHO 细胞培养

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摇瓶的使用对动物细胞的培养越来越重要。以下各种摇瓶中培养CHO(中国仓鼠卵巢)细胞的示例表明,Multitron细胞培养摇床(INFORS HT,CH Bottmingen)非常适合种子液的生产。

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INFORS Minifors Cell实验室台式生物反应器

Minifors Cell

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发酵罐的安全使用

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生物发酵

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微生物
发酵罐的安全使用

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INFORS Labfors 5 台式发酵罐

Labfors 5

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细胞培养系统:杂交瘤细胞

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杂交瘤抗体技术的基本原理是通过融合两种细胞而同时保持两者的主要特征。而这两种细胞分贝是经抗原免疫的小鼠细胞与小鼠骨髓瘤细胞。脾淋巴细胞的主要特征是他的抗体分泌功能和能够在选择培养基中生长,小鼠骨髓瘤细胞则可在培养条件下无限分裂、增殖,即所谓永生性。在选择培养基的作用下,只有b细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交细胞才是具有持续增殖能力,形成同时具备抗体分泌功能和保持细胞永生性两种特征的细胞。

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INFORS Ecotron振荡培养箱

Ecotron

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发酵系统在曲霉菌培养中的应用

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曲霉菌在自然界广泛分布,可感染动物,也可寄生于饲料、粮食中引起动物中毒。常见有烟曲霉、黄曲霉、寄生曲霉、棕曲霉、杂色曲霉、构巢曲霉、白曲霉以及黑曲霉等,其中以烟曲霉感染致病为主,同时也可产生毒素,黄曲霉、寄生曲霉、棕曲霉、杂色曲霉等主要均以所产毒素而致病。

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INFORS Labfors 5 台式发酵罐

Labfors 5

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发酵罐在链霉菌培养中的应用

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链霉菌可以产生多种二次代谢物,包括各种物质的分解酵素及抗生物质。这些代谢产物除了可用在人体的医药以及当成家畜饲料的添加物外,在农作物生产方面,也可作为植物保护之用。链霉菌是已知放线菌中最大的族群,可产生高达一千多种的抗生物质,许多重要的抗生素如放线菌、链霉菌、四环霉素、保米霉素、维利霉素、嘉赐霉素及康霉素等,都可由链霉菌生产。一般而言,农用抗生素具有较低毒性及残留性质,可以抑制病原微生物的生长和繁殖,或者能改变病原菌的形态而达到保护作物的效果。

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INFORS Labfors Lux 平板LED光照发酵罐

Labfors Lux LED Flat Panel

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发酵罐在毕节酵母菌培养中的应用

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酵母菌是一种单细胞的真核微生物。酵母菌是个通俗名称,是以芽殖或裂殖来进行无性繁殖的单细胞真菌的统称,与以霉菌区分开。极少数种可以产生子囊孢子进行有性繁殖。酵母菌主要分布在含糖质较高的偏酸性环境,如各种水果的表皮、发酵的果汁、蔬菜、花蜜、植物叶面、菜园果园土壤和酒曲中。他们多为腐生菌,少数为寄生菌,能引起人和植物的病害,有的酵母菌可与昆虫共生。

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INFORS Minifors Cell实验室台式生物反应器

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发酵罐在酵母菌的分批培养中的应用

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分批反应操作是指基质灭菌、接种以后,除了好氧反应需要在反应过程中通入无菌空气、消除泡沫所用的消泡剂以及维持一定pH值所用酸碱之外,反应过程中不再加入反应基质。 基质浓度、产物浓度以及细胞浓度均随反应进行的时间而变化,尤其是菌体本身将经历不同的生长阶段(在培养的过程中,微生物的生长可分为迟缓期、对数生长期、减速期、静止期),显示出不同的催化活力。 基本特征是:反应物料一次加入一次卸出;反应器物系的组成仅随时间而变化,即随着培养的进行,基质的浓度下降,菌体量增加,产物增加。因此属于一非稳态过程。

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INFORS Multitron Standard 标准振荡培养箱

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发酵罐在大肠杆菌培养中的应用

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大肠杆菌是基因工程中常用的宿主菌,许多有价值的多肽和蛋白在大肠杆菌中已成功地进行了表达,表达水平有些高达细胞总蛋白的30%以上,大肠杆菌作为外源基因表达的宿主,由于具有遗传背景清楚、目的基因表达水平高,技术操作、培养条件简单,抗污染能力强,大规模发酵经济等优点,倍受遗传工程专家重视,是目前应用最广泛,最成功的表达体系。

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INFORS Labfors Lux 平板LED光照发酵罐

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发酵罐在乳酸菌培养中的应用

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乳酸菌是一种较为常用的发酵菌种,在食品发酵中能够改善风味,同时还具有延长保质期的优势。另外,乳酸菌能将食品风味不断丰富,进而给人增强一定的味觉享受。

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INFORS Minifors Cell实验室台式生物反应器

Minifors Cell

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培养细胞中的线粒体提取

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生物农业

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分离线粒体的原理:从组织或细胞中分离线粒体的关键步骤,大致相同:(1)通过机械和/或化学手段使细胞破裂,(2)低速离心以除去杂质和较大的细胞器,随后以较高的速度离心,以分离收集的线粒体。 此种线粒体分离方法可以满足大多数应用。 下述步骤详述提取步骤,旨在提供能够获得尽可能高产量和酶活性的线粒体。

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INFORS Multitron 振荡培养箱(细胞工厂)

Multitron Cell

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如何正确的选择摇床振幅

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摇床的振幅指托盘在做圆周运动时候的直径,有时候我们也叫“振荡直径”或“轨道直径”

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INFORS Multitron 振荡培养箱(细胞工厂)

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细胞培养体系与培养条件的研究

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生物发酵

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细胞培养也叫细胞克隆技术,在整个生物工程技术领域,细胞培养都是一个必不可少的过程。 目前主要有两种基本的细胞培养体系,一种是细胞在人工基质上单层生长(贴壁培养),另一种是细胞在培养基中自由漂浮生长(悬浮培养)。贴壁培养和悬浮培养的细胞无论在细胞形态和培养条件上有诸多不同。

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INFORS Minitron Cell CO2振荡培养箱

Minitron Cell

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Labfors Lux生物反应器藻类培养与研究

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藻类是原生生物界一类真核生物(有些也为原核生物,如蓝藻门的藻类),主要水生,无维管束,能进行光合作用。

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