振荡在生物培养中的作用生物培养分为静态培养和振荡培养。振荡培养，亦称悬浮培养，是指把微生物细胞接种于液体培养基中，并放置在摇床或振荡器上不停振荡的一种培养方法。广泛应用于菌种筛选和微生物扩大培养，是微生物生理、生化、发酵和其他生命科学研究领域中常用的培养方式。振荡培养不适用于含有易挥发性化学溶剂，低浓度爆炸气体和低燃点气体的物质以及有毒物质的培养。那静态培养与振荡培养有什么区别呢？CO2培养箱为细胞培养模拟了一个适宜的培养环境，包括温度，CO2浓度和湿度等外部条件。如干细胞在静态培养条件下，细胞贴附在底部瓶壁，溶解氧和营养物质会形成浓度梯度。然而悬浮细胞在温和的振荡培养条件下，消除了浓度梯度，增加了溶解氧浓度，更有利于生长。在细菌和细胞培养时，振荡培养可改善与培养基成分的接触和氧的供应，特别是对真菌的培养，不会形成菌膜或者菌团。霉菌静置培养得到的菌体能明显看到是有菌丝的，形态与平板上生长状态有些类似；而摇床培养得到的菌体是球形的，即菌丝聚集成团。所以在微生物工业上与振荡培养具有同样效果的搅拌培养也已被广泛应用。组织培养中的旋转培养法也是振荡培养的一种。摇床振荡培养的作用：1、传质，就是底物或代谢产物更好在体系内转移和发挥作用。2、溶氧，在好氧培养过程中，空气是滤过开放的，所以通过振荡可以让更多空气中氧气溶解于培养基中。3、体系均一，有利于对不同参数的取样测定。

原代细胞和传代细胞培养有哪些区别原代细胞和传代细胞培养有含义、培养过程、培养结果和应用四个方面区别：01 含义不同原代培养是直接从生物体获取组织或器官的一部分进行培养，也称初代培养。原代培养是将培养物放置在体外生长环境中持续培养，中途不分割培养物的培养过程。传代培养是指需要将培养物分割成小的部分，重新接种到另外的培养器皿（瓶）内，再进行培养的过程。02 培养过程不同原代培养将动物组织从机体中取出离散成单个细胞(常用胰蛋白酶)，置合适的培养基中培养，使细胞得以生存、生长和繁殖。培养过程相对复杂，培养条件要求也高，在所有的操作过程中，都必须保持培养物及生长环境的无菌。传代培养是在原代细胞基础上通过胰酶等物质消化后继续用于细胞培养的细胞，它与原代细胞具有相同核型。这类细胞在体外可以无限制分裂。一般普通培养条件下都容易生存，传代细胞容易增殖。但也要注意无菌操作并防止细胞之间的交叉污染，所有操作要尽量靠近酒精灯火焰。每次最好只进行一种细胞的操作。03 培养结果不同原代培养细胞会分裂。原代培养的细胞一般传至10代左右就不容易传下去了，细胞的生长就会出现停滞，大部分细胞衰老死亡。细胞接种后一般几小时内就能贴壁，并开始生长，如接种的细胞密度适宜，5天到一周即可形成单层。传代培养一般传到40到50代。一般情况，传代后的细胞在2小时左右就能附着在培养瓶壁上，2到4天就可在瓶内形成单层，需要再次进行传代。04 应用不同原代细胞培养为研究生物体细胞的生长、代谢、繁殖提供有力的手段，同时也为以后传代培养创造条件。利用此方法还可直接服务于临床实践。例如，用从手术中切除的肿瘤细胞进行原代培养，然后用该培养细胞进行抗癌药物的筛选，来帮助选择最有效的化疗方案。传代培养主要应用在医学领域，如口腔医学领域重新构建结构复杂的牙根，还有改良羊水细胞培养技术，可多次获得有效地细胞克隆，大大提高培养成功率，增加了可分析核型数量，提高了产前诊断工作的质量和效益。

摇床高通量培养高通量培养技术增加了人们对微生物及细胞在快速培养过程中行为的了解。目前，大部分高通量培养技术主要通过缩小培养体积，过程中微型化在线监测， 以及系统全自动化来实现的。主要用于菌种筛选、哺乳动物细胞系监控、微生物蛋白表达重组子的筛选、分子进化过程中的突变筛选等。近年来，微量高通量微生物筛选法已在欧洲等实验室采用。其基本方法是以96孔微孔板作大量培养的容器，每孔可先加入一定量的培养液，再用多点（12点）接种器快速接种纯菌株，每小时约可接40000个不同变异株，每天可筛选2万~3万株，经适当培养后，可快速对每孔中的代谢产物进行自动检测，工效极高。如何在摇床上培养？使用深孔板或微孔板，可以获得足够数量的蛋白质，用于后续平行批次的分析，并且可以减少最终流程之前的步骤数量。1、3mm振幅结合高搅拌（振荡）速度即使在小型培养容器中，为了实现最大的氧化和最佳混合，需要一个适合此要求的小振幅，以及高达1000 min-1的搅拌速度。同时，所需的液体体积较小，从而降低了培养基的成本。2、大容量培养摇床为了尽可能有效地利用有限的实验室空间进行筛选应用，可以使用多个叠加摇床。向下打开箱门大大节省了空间，并且几乎不需要额外的空间用于连接、通风和维护。3、配备适当的摇床只有在适宜的培养条件下，高效筛选才能成功。其中包括温度均匀性、精确的CO2调节和冷却以及无冷凝水加湿。这可以防止液体通过蒸发而损失，这就是它必不可少的原因，特别是在小体积的微孔板和深孔板的情况下。在筛选细胞培养物时，还建议考虑摇床的卫生设计，例如抗菌表面，可以防止污染。4、与自动化处理解决方案兼容孔板培养可借助液体处理设备进行自动处理，然后在孔板评估分析设备的帮助下对其进行分析结果。可以节省时间、体力、也可以节省成本。

箱体分舱段，培养条件更稳定二氧化碳培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境，培养箱要求稳定的温度（比如哺乳动物为37°C）、稳定的CO2水平（一般为5-7%）、恒定的酸碱值（pH值一般为7.2-7.4）、较高的湿度，是细胞、组织、细菌培养的一种仪器，是开展免疫学、肿瘤学、遗传学及生物工程所必须的关键设备。CO2培养箱频繁开门存在的弊端：CO2培养箱的开门情况是影响细胞培养稳定环境的关键因素之一。CO2培养箱门打开的时间越长、次数越多，内部温度、CO2和湿度恢复到设定值所需的时间就越长。在实验室中，如果多人共用一台二氧化碳培养箱，存在频繁开关培养箱门的情况。每次开关培养箱门，培养箱内原有的的温度，二氧化碳浓度，湿度等条件，都会经历一次巨大的变化。一次约为30秒的开箱门，二氧化碳浓度会直接归零，温度会下降12度以上（设置37度，室温20度），湿度下降到环境湿度。全部条件再恢复的时间往往要15分钟以上。培养的样品，会因为多次开关门造成的培养环境频繁波动，难以达到预期最佳培养效果。频繁开关门，同步伴随的还有二氧化碳过量的消耗。同时，培养箱门打开后，敞开面积大小也会对细胞培养造成影响，因为它决定了内部环境与外部环境气体交换的程度。基于以上情况，如果我们在培养敏感型细胞，如人内皮细胞、HEK细胞、干细胞等，选择配置有分割腔体的CO2培养箱能够有效帮助我们避免细胞培养条件受到干扰，从而提高培养结果的可重复性。分割腔体的优势和作用：在培养箱中，将内部整个空间分为若干个独立的小腔体，每个腔体都有独立密封门。优势如下：1. 多人共用培养箱时，只需要在每个分割门上做好标记，每次取样品时，只需要打开独立的分割箱门，即可获得需要的样品，方便了样品分类。2. 分割门的打开，对整个箱体内部培养环境影响很小，大大减少了供应气体消耗和热量流失，同时降低了CO2培养箱内受污染的风险。3. 关上箱门后，往往在几分钟内就可以恢复到培养环境的原设定值。4. 培养条件的相对稳定，就意味着更容易或者良好的培养结果。

微生物、植物细胞、动物细胞培养的区别1、 微生物培养微生物培养，是指借助人工配制的培养基和人为创造的培养条件(如培养温度等)，使某种微生物快速生长繁殖，称为微生物培养。包括细菌培养、霉菌培养和酵母培养。这些菌种的周期非常短，如细菌每20-30min增殖1次。1） 培养类型根据培养基物理性状的差异，分为3种类型：①液体培养，用于增菌培养、鉴别培养等目的；②固体培养，这种培养的目的有增菌、分离、鉴别、保藏等；③半固体培养，一般用于鉴别和增菌目的。2） 培养仪器生物培养所用的培养箱可用于好氧菌培养，也可用于厌氧菌培养，厌氧培养需要钢瓶提供食品级氮气。霉菌培养箱用于霉菌培养，能提供较高的相对湿度，气密性也比较高。2、 植物组织细胞培养植物组织培养是指通过无菌操作分离植物体的一部分，即外植体，接种到培养基上，在人工控制的条件下进行培养，使其产生完整植株的过程。植物组织培养主要有原生质体培养、悬浮细胞培养、花药培养、组织培养、器官培养等形式，其中最常见的是愈伤组织培养。1） 培养类型根据培养类型，可分为：植物原生质体培养、植物组织培养、悬浮植物细胞培养、花药培养和植物器官培养。2） 培养仪器植物组织细胞培养需要光照、温度、湿度等条件，满足此类条件的培养箱是光照培养箱或植物生物反应器等。3、 动物细胞培养动物组织细胞培养包括接种单细胞悬液进行的培养、接种组织块进行的培养。传代细胞如细胞株、细胞系，通常采用接种单细胞悬液进行的培养，是动物细胞培养常见的方式。原代细胞是指来源于动物组织的细胞团块，往往包含多种细胞类型，并且细胞与细胞之间的细胞质膜有紧密联系。如果培养时不需分离组织中的细胞，直接用组织块进行的培养就是组织培养。如果需要制备成单细胞悬浮液，再接种培养，则属于原代细胞培养。1） 培养类型根据培养细胞来源动物分为无脊椎动物细胞培养和脊椎动物细胞培养。根据细胞生长特性一般分为贴壁培养和悬浮培养。根据培养目的分为原代培养、传代培养、克隆化培养、扩大培养等。2）培养仪器开放性的培养使用专用的CO2培养箱，为动物细胞的生长提供温度、湿度与pH保证，其中，CO2浓度的恒定对稳定培养液的pH至关重要。除常用的CO2培养箱以外，生产中还需要动物细胞生物反应器、细胞工厂或滚瓶机等仪器。

湿度控制在摇床培养中的应用细胞培养中培养箱内的相对湿度控制是非常重要的，通常对于细胞培养体积较小、培养时间较长的情况下，需要进行湿度控制，饱和的湿度环境可以避免培养液中二氧化碳逃离，保持pH值稳定，也能防止由于干燥使培养液中水分蒸发，渗透压升高，导致细胞培养失败。培养箱可以通过不同的加湿方式进行湿度控制，从而保证所有的培养物处于良好的稳定性和均匀性的生长环境。常见的箱体加湿方式有以下几种：1、 水盘加湿优点：成本较低；水分迅速雾化，稳定以后湿度变化很小，保证了培养物所需的饱和水分。缺点：无法精确控制所需要额度湿度；在加湿的同时，高湿度条件下，放置在箱体内部的水盘由于长时间未清理，很容易滋生杂菌，产生污染，需要定期进行水盘清理。2、超声加湿通过振荡电路转换冷能，使得振动片自己产生了一种超声频机械的振动，传导在水中，使得里面的水变成雾化喷射出来。优点：加湿速度快：加湿效率接近100%，加湿强度大，产生的雾粒小而均匀，单位时间内可迅速达到要求的相对湿度，节约水源；成本较低，具有很好的湿度保持效果。缺点：在加湿的同时，也给细菌的滋生和大量繁殖提供了生长环境，从而造成环境污染；由于加湿速度快，造成仪器频繁启动，耗水量比较大，容易在箱体内产生冷凝。3、直接蒸汽洁净加湿系统的优势INFORS湿度控制套件，采用准确控温的不锈钢加热盘加湿，可以保证湿度控制稳定可靠，最大限度地避免传统加湿方法的弊端；如果需要加湿，控制进水电磁阀将自动打开，水滴将滴落在 140℃的 316L不锈钢加热板上，高温加热板在杀菌的同时将水快速汽化成分子水汽，利用自身体积膨胀进入培养箱，随培养箱的内部循环系统，迅速扩散到整个培养箱；由于高温下液体水全部汽化为游离的分子水，所以水汽不易在培养箱中冷凝，可以达到很好的加湿效果，最大限度地避免了传统的超声波加湿水汽容易二次冷凝的弊端；高温加湿同时起杀菌作用，避免传统加湿容易在储槽内生长杂菌从而造成染菌的弊端；水汽自身膨胀可以传输距离达 2m以上。

生物燃料研究的理想选择——光照发酵罐随着全球传统化石燃料供应量的减少，人们对可持续燃料的生产需求日渐增长。为降低对进口石油的依赖，减少温室气体的排放，人们迫切需要一种更清洁，更易得的能源物质。而微藻类因其繁殖快、培养周期短、无需耕地和耗水量少等优势成为了首选的生物能源给料。微藻类能将60％以上的重量转化为脂类。据估计，在相同的土地面积上，微藻类生产的脂类约是其他作物的15-300倍。 那么，我们一起看看常见水藻产脂类能力吧~                           Table 1.常见水藻产脂类能力汇总表种名脂含量  （% 生物质干重）脂生产能力  （mg/L/d）生物质体积生产能力  （g/L/d）生物质面积生产能力  （g/m3/d）纤维藻24.0-31.011.5-17.4布朗葡萄藻25.0-75.00.023.0牟勒氏角毛藻33.621.80.07普通小球藻5.0-58.011.2-40.00.02-0.200.57-0.95小球藻18.0-57.018.73.50-13.90绿球藻19.353.70.28寇氏隐甲藻20.0-51.110盐生杜氏藻6.0-25.0116.00.22–0.341.6–3.5/   20–38后棘藻27.447.30.17纤细裸藻14.0-20.07.70等鞭金藻7.1-3337.80.08-0.17微球藻20.0-56.060.9-76.50.17-0.51微拟球藻12.0-53.037.6-90.00.17-1.431.9-5.3富油新绿藻29.0-65.090.0-134.0三角褐指藻18.0-57.044.80.003-1.92.4-21斜生栅藻11.0-55.00.004-0.74中肋骨条藻13.5-51.317.40.08四列藻12.6-14.743.40.30INFORS推出专为光照培养设计的光照发酵罐，适用于藻类和光合细菌的培养，是用于绿藻培养，生物柴油研究的理想选择。 一、发酵培养二、生物柴油转化几乎所有的水藻都能产生脂类，占生物质重量的1%－85%。在低氮条件下，一个“脂触发”过程让某些藻类开始在细胞内积聚脂类。这种现象倾向于在低氮条件下发生，此时营养物质被耗尽，细胞停止分裂。微藻类产生的脂类通常为三酰甘油，又称TAG。TAG被转化为脂肪酸甲酯（FAME），即生物柴油。生产可使用生物柴油的最后一步是除去副产物甘油，及任何其他可能存在的污染物。甘油的密度大约为1050 kg/m3，而生物柴油的密度为880 kg/m3，因此，可以用重力沉降或离心的方法除去甘油。通常会通过加入蒸馏水除去大多数的污染物，包括肥皂、残留的催化剂以及甲醇。烷基酯用于干燥生物柴油和除去多余的水份，酸中和催化剂和可能形成的肥皂，然后用水冲洗。生物柴油可以用10% H3PO4 冲洗，再用水冲洗。硅胶和酸式硅酸镁可用于吸附污染物，污染物可以用膜除去。海洋生物尤其是微藻和大型藻类的细胞和组织培养是世界研究领域中的热点之一，其中有些次生代谢产物如卤代萜类是研究较为广泛的次生代谢产物。INFORS 已经在光培养与光反应领域有近二十年的研究经验，光照发酵罐就是这些研究经验的结晶，对于光照培养过程的所有参数都可以进行良好的控制。更多详细资料，请留言或电话咨询~

如何在恒温摇床中培养细胞为了在恒温摇床中成功培养细胞培养物，需要温和的混合、主动和卫生的加湿，以避免蒸发和精确的 CO2调节，从而使培养基中的 pH 值更稳定。此外，无菌在防止较长过程中的污染方面起着重要作用。01 稳定和均匀的条件为了从细胞培养中获得可重复的结果，在整个生物过程中必须有最佳的培养条件。因此，针对细胞培养优化的培养箱摇床提供了精确调节 CO2供应和空气湿度的选项。加湿必须没有冷凝水，以避免摇床损坏和污染。可靠且高度的温度均匀性也很重要。02 通过温和混合实现最佳氧合与静态培养箱不同，培养箱摇床确保细胞培养物的理想混合，从而为它们提供足够的氧气。具有低搅拌速度的相应温和驱动确保氧气可用于对剪切敏感的细胞培养物。03 细胞培养的卫生环境细胞培养中的污染会耗费大量时间和金钱。因此，用于细胞培养的培养箱具有特殊功能，可将污染风险降至最低。理想情况下，摇床配备额外的卫生功能、抗菌涂层和紫外线辐射。选择恒温摇床时，请确保它可以快速彻底地清洁及包含泄漏到内部的液体。04 智能设计缩短培养中断时间即使是最轻微的条件变化也会损坏细胞。在实践中，这意味着尽可能少地打开恒温摇床的门，并尽可能缩短必要的中断时间。因此，可以快速操作的门结构以及快速的自动启停是重要的功能。此外，用户应该能够轻松操作，且符合人体工程学。05 符合 GMP 的文档和全面的报告恒温摇床可根据客户要求进行鉴定：工厂验收测试 (FAT) 和现场验收测试 (SAT)、安装验证 (IQ) 和操作验证 (OQ)。一个生物过程软件记录了整个培养过程，此外还可以在较长时间内进行自动监控和调节。

二碳箱气套式与水套式加热该如何选择？细胞生长需要适宜的温度。哺乳动物细胞培养温度一般为36.5±0.5℃，偏离这一温度范围，细胞的正常代谢会受到影响，甚至死亡。总的来说，培养细胞对低温的耐受力比对高温强。温度上升不超过39℃，细胞代谢强度与温度成正比。39-40℃培养1h，细胞受到一定损伤但仍可能恢复；41-42℃培养 1h，细胞受到严重损伤，但不致全被杀死，个别仍可能恢复；43℃以上培养1h，细胞将被杀死。相反，温度不低于0度，对细胞代谢虽有影响，但并无伤害作用；把细胞置于25-35℃，细胞仍能生存和生长，但速度减缓；放在4℃数小时后，再回到37℃，细胞仍能继续生长。细胞代谢随温度降低而缓慢，温度降至冰点以下，细胞可因胞质结冰受损而死亡。温度控制对培养细胞的健康和生长非常关键。CO2培养箱能够对温度提供精准稳定的控制，主要有两种温控类型：水套式和气套式。它们的区别主要在它的加热方式上，其实气套式与水套式这两种加热方式对实验结果影响不大、都能够达到可靠的效果，只是在温度恒定和加热快慢上有所区别，所以用户可根据自身的实验环境和实验室条件来选择。1、水套式加热水套式加热方式是通过一个独立的水套层包围内部的箱体来维持温度恒定的，其主要优点是：水是一种很好的绝热物质，当遇到断电的时候，水套式系统就可以较长时间保持培养箱内的温度准确性和稳定性。但水套式需要对水箱进行定期加水、清空和清洗，并要经常监控水箱运作的情况，若清理不及时可能会有潜在的污染隐患。2、气套式加热气套式加热主要是通过设置在箱体气套层内的加热器直接对内箱体进行加热的，也叫六面直接加热；气套式和水套式相比较，加热速度更快。为了不影响培养，培养箱应在培养区域外安装一个风扇，可以帮助培养室内的空气循环，而不会干扰细胞培养；当箱门开启或关闭时，这种温和的空气循环可以加快内部温度，CO2浓度和湿度的恢复。此加热方式特别适用于短期培养以及需要箱门频繁开关取放样的实验。另外，对于用户来说气套式设计比水套式更简单化。

30 Years of Multitron1991年，INFORS推出第一代多功能振荡培养箱Multitron，至今已有30年历史。它是具有55 年专业生物培养设备设计制造经验的 INFORS 瑞士研发团队和其在欧洲生物谷的专业客户 (Roche, Novatis 等) 集体智慧的结晶。INFORS Multitron为客户提供更多的扩展功能帮助，满足客户的复杂培养需求：温度、转速、CO2浓度、湿度、光照强度、紫外灭菌等，随时准备满足用户的各类应用。Multitron多功能应用：1. 细胞培养：可选 CO2 控制，直接洁净加湿系统，无冷凝水；可选带抗菌涂层的外壳；满足细胞培养所需要的温和条件；2. 微生物培养：25 或 50mm 振幅可选，适用于试管到 5L摇瓶，可用于细菌、真菌、酵母等微生物的剧烈振荡培养；3. 96孔板培养：可同时进行 7,000 多次平行实验。通过实验证明，3mm 振幅 /1000rpm 转速的培养条件与传统的方法相比可以提高产量。结合直接洁净加湿系统降低蒸发损失；4. 光合生物：LED光照控制套件，节能，光照均匀分布；结合EVE 软件可模拟昼夜循环或选择性诱导。