裂解法包括化学裂解、酶裂解和机械裂解.化学裂解和酶裂解通常是比较温和的方法,通常会很少使DNA 断裂。
化学裂解和酶裂解法主要是裂解液处理法,主要根据不同的目的,裂解液的组成有所不同,主要有提取核酸和蛋白两中.在提取RNA或DNA时,我们主要是要充分裂解细胞,得到更多的核酸;如果我们的目的是蛋白,那要根据蛋白的位置、特性等因素考虑裂解液。
蛋白定位 | 裂解液种类 |
全细胞 | NP-40 或RIPA |
细胞质(可溶性蛋白) | Tris-HCL |
细胞质(细胞骨架等不溶性蛋白) | Tris-Triton |
细胞膜 | NP-40 或RIPA |
细胞核 | RIPA |
线粒体 | RIPA |
1、去垢剂
SDS,NP-40,TritonX-100这三种去垢剂的作用强弱是不同的。
SDS属于离子型去垢剂,最厉害,基本可以把细胞完全破掉,DNA会释放出来,裂解液变得很粘稠。
NP-40是很温和的去垢剂,1%浓度的基本可以破坏掉胞膜,而对核膜破坏的作用弱,结合特定的buffer可以获得胞浆蛋白。
TritonX-100的能力介于NP40和SDS 之间,偏向于NP40,也是常用的细胞裂解液成分之一,在保护蛋白活性方面有一定作用(SDS基本会使蛋白变性失活)。
货号 | 产品名称 | 规格 |
abs9160 | NP-40裂解液 | 100ml |
abs9117 | SDS裂解液 | 100ml |
abs9149 | Triton X-100 | 100ml/500ml |
2、RIPA裂解液
RIPA裂解液(RIPA Lysis Buffer),是一种传统的细胞组织快速裂解液,对组织和细胞都有较好的裂解作用,主要是从动物组织和动物细胞中抽取的可溶性蛋白。RIPA的配方有很多种,根据其裂解强度的不同,大致可分为强、中、弱三类,应用上会有一些差异。
产品货号 | abs9229 | abs9231 | abs9228 | abs9230 |
产品名称 | RIPA裂解液(强) | RIPA裂解液(强)(不含抑制剂) | RIPA裂解液(中) | RIPA裂解液(弱) |
有效成分 | 1% Triton X-100,1%脱氧胆酸钠,0.1% SDS | 1% Triton X-100,1%脱氧胆酸钠,0.1% SDS | 1% NP-40,0.5%脱氧胆酸钠,0.1% SDS | 1% NP-40,0.25%脱氧胆酸钠 |
裂解强度 | 强 | 强 | 中 | 温和 |
对膜蛋白的提取 | 优秀 | 优秀 | 良好 | 一般 |
对胞浆蛋白的提取 | 优秀 | 优秀 | 优秀 | 优秀 |
对核蛋白的提取 | 优秀 | 优秀 | 良好 | 较好 |
胞浆磷酸化蛋白的提取 | 优秀 | 优秀 | 优秀 | 优秀 |
核转录因子的提取 | 优秀 | 优秀 | 优秀 | 优秀 |
蛋白酶抑制剂 | 含有 | 不含 | 含有 | 含有 |
磷酸酶抑制剂 | 含有 | 不含 | 含有 | 含有 |
主要用途 | WB,IP | WB,IP | WB,IP | WB,IP,Co-IP |
货号 | 产品名称 | 规格 |
abs9228 | RIPA裂解液(中) | 100ml |
abs9230 | RIPA裂解液(弱) | 100ml |
abs9229 | RIPA裂解液(强) | 100ml |
abs9231 | RIPA裂解液(强)(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂) | 100ml |
3、红细胞裂解液
红细胞裂解液是一种去除红细胞最简便易行的方法,即用裂解液裂解红细胞,利用细胞内外存在盐离子浓度差而导致细胞膜胀破的原理来裂解无核红细胞的,既不损伤有核细胞又能充分的去除红细胞。主要用于经酶消化分散的组织细胞的分离纯化,淋巴细胞的分离纯化以及组织细胞蛋白与核酸提取等实验中红细胞的去除。
货号 | 产品名称 | 规格 |
abs9101 | 红细胞裂解液 | 100ml/500ml |
abs9241 | 红细胞裂解液,10X | 100ml |
abs9225 | 组织/细胞裂解液 (多因子检测) | 100ml/500ml |
4、WB/IP 裂解液
免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液(Lysis Buffer for WB/IP Assays)是在非变性环境内裂解细胞的一款裂解液,适用于 PAGE,蛋白免疫印迹(Western Blot),免疫沉淀(IP),免疫共沉淀,ELISA 等实验。经本品裂解收集的蛋白样品,可使用增强型 BCA 蛋白浓度测定试剂盒测定总蛋白浓度。由于本品含有较高浓度的去垢剂等干扰物质,不适合用 Bradford法来测定总蛋白浓度。
货号 | 产品名称 | 规格 |
abs9116 | 免疫印迹及免疫沉淀用(WB/IP)裂解液 | 100ml |
abs9239 | 免疫印迹及免疫沉淀用裂解液(不含蛋白酶/磷酸酶抑制剂) | 100ml |
Absin特色产品线(全部现货): |
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