石蜡包埋制片术是组织切片制作最常用的一种技术。其基本步骤包括取材、固定、脱水、浸蜡、包埋、切片、染色和封片等,其中切片是最重要的环节。我们在工作实践中发现,切片制作过程中常常由于多方面的原因在切片这一环节中遇到困难,甚至导致制片失败。针对切片过程中出现的问题,我们积极寻找原因,探究解决问题的方法。现以问题一原因一解决方法的模式,推送如下。
问题 | 原因 | 补救方法 |
石蜡带弯曲不直 | 石蜡块上下两边不平行 | 取下台木,将两边修干 |
石蜡块的上下两边不和刀口平行 | 调节标本台,使两者平行 | |
刀口锋利不一,局部产生差异 | 移动刀片,改用新的刀口 | |
蜡块的一边较另一边为软,或两边的硬度不一致 | 待蜡块冷却后再切,或重新包埋 | |
材料未居蜡块正中央 | 用刀片切去部分石蜡,使材料居中 | |
材料大而形不正 | 在大的一边切去少许石蜡 | |
切片分离、不能连成带状 | 室温过低 | 在切片机上方开一电灯或提高室温 |
石蜡过硬 | 在蜡块面加一层45℃的软蜡或用手指蜡摩擦块面 | |
材料边缘留蜡太少 | 重新包埋 | |
刀的角度不适合 | 矫正刀的角度 | |
切片卷起呈圆筒状 | 室温过低 | 提高室温 |
石蜡过硬 | 加软蜡 | |
刀口太钝 | 用毛笔将蜡片摊开压住,切2—3片即成带 | |
刀的倾角太大 | 减小倾角 | |
切片纵裂 | 刀有缺口 | 可移动刀口 |
石蜡块中含有颗粒、杂质 | 将颗粒拽去 | |
刀口留有碎屑或细丝 | 清洁刀口 | |
组织太硬 | 让包埋块在水中浸泡 | |
切片有横纹 | 刀和台木的固定螺丝太松 | 旋紧螺旋 |
刀口倾斜度太大 | 可放平1—2。后再切 | |
刀口有石蜡屑 | 用氯仿拭去 | |
切片厚薄不匀原因 | 切片机有毛病 | 矫正切片机装置 |
夹刀不当 | 对症治疗 | |
未旋紧标本台螺旋 | 旋紧螺旋 | |
石蜡块过硬 | 将石蜡块在水中浸泡 | |
材料发生裂隙破碎或脱落 | 脱水不干净 | 无法弥补 |
有透明剂残留 | 增加浸蜡时间,重新包埋 | |
石蜡透入时,温度过高或时间过长 | 无法补救 | |
由于脱水剂和透明剂的影响,使组织变硬发脆 | 用正丁醇、叔丁醇和二氧六环等进行脱水和透明 | |
材料太硬或太粗 | 在蜡块表面涂一薄层火棉胶溶液 | |
切片时发生沙沙声 | 组织块过硬 | 浸泡水中软化 |
包埋温度过高 | 无法补救 | |
材料内留有结晶体 | 无法补救 | |
石蜡块将蜡带抬起 | 由于摩擦而产生静电荷所致 | 提高室温 |
石蜡块上面附有石蜡碎屑 | 用刀片将碎屑清除 | |
刀口上附有石蜡碎屑 | 用二甲苯或氧化清除 |
实验步骤 | 推荐指数 | 货号 | 产品名称 | 规格 | 分类 |
样本制备 | ★★★★★ | abs9179 | 4%多聚甲醛/通用型组织固定液 | 500ml | 固定液 |
★★★ | abs9131 | Chromium(III) potassium sulfate dodecahydrate | 5g,100g | 处理玻片防脱片 | |
★★★ | abs9172 | Poly-D-lysine (Mw 150,000-300,000) | 25mg | 处理玻片防脱片 | |
★★★ | abs9135 | Gelatin | 100g,500g | 处理玻片防脱片 | |
辅助试剂 | abs9256 | 10×TBS | 500ml | 缓冲液 | |
abs952 | 10*TBST | 100ml,1L | 缓冲液 | ||
abs961 | 10×PBS缓冲液 | 500ml,500ml*10 | 缓冲液 | ||
abs962 | 1×PBS缓冲液 | 500ml,500ml*10 | 缓冲液 | ||
abs9149 | Triton X-100/曲拉通X-100 | 100ml,500ml | 缓冲液 | ||
抗原修复 | abs9145 | Pepsin(1:3000) | 50g,100g | 抗原修复液 | |
abs9118 | Proteinase K | 100mg,1g | 抗原修复液 | ||
★★★ | abs9247 | EDTA抗原修复液(50×) | 100ml | 抗原修复液 | |
★★★ | abs9207 | 冰冻切片快速抗原修复液(5×) | 100ml | 抗原修复液 | |
★★★ | abs9249 | 柠檬酸钠-EDTA抗原修复液(40×) | 100ml | 抗原修复液 | |
★★★ | abs9248 | 柠檬酸钠抗原修复液(50×) | 100ml | 抗原修复液 | |
★★★ | abs9208 | 细胞爬片抗原修复液(1X) | 100ml,500ml | 抗原修复液 | |
封闭 | abs933 | Goat serum | 10ml,50ml | 封闭血清 | |
abs936 | Horse serum | 200ml(2*100ml) | 封闭血清 | ||
abs939 | Normal Monkey serum | 100ml | 封闭血清 | ||
abs937 | Normal mouse serum | 100ml | 封闭血清 | ||
abs946 | Rabbit serum | 10ml,50ml | 封闭血清 | ||
abs947 | Rat serum | 100ml | 封闭血清 | ||
abs935 | The ass/donkey serum | 10ml,50ml | 封闭血清 | ||
abs9155 | 牛血清白蛋白(BSA) | 50g,100g | 封闭液 | ||
抗体孵育 | ★★★★★ | abs957 | 即用型高效免疫组化二抗试剂盒 | 5ml | 二抗试剂盒 |
★★★★★ | abs929 | PAP Pen 组化笔 | 1支 | 组化笔 | |
显色/复染 | ★★★★★ | abs9210 | DAB 显色试剂盒(棕黄色,IHC) | 1kit | 显色试剂 |
★★★ | abs47047616 | DAPI染色液 | 10ml,50ml | 荧光染料 | |
abs9105 | Propidium Iodide | 5mg,10mg | 荧光染料 | ||
abs9140 | Methyl Green, 0.1% w/v aq. soln. | 100ml | 荧光染料 | ||
abs9142 | Nuclear Fast Red | 5g | 荧光染料 | ||
★★★★ | abs9217 | 苏木素-伊红(HE)染色试剂盒 | 10g,25g | 荧光染料 | |
封片 | abs9177 | 中性树胶(镜检用永久封片剂) | 100ml | ||
abs9234 | 抗荧光淬灭封片液 | 5ml | |||
abs9235 | 抗荧光淬灭封片液(含DAPI) | 5ml,25ml | |||
abs9236 | 抗荧光淬灭封片液(含PI) | 1ml |
Absin特色产品线(全部现货): |
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