关注
已关注
已认证
粉丝量 0
400-859-7787
仪器信息网认证电话，请放心拨打
如何使用AzureRed进行总蛋白定量
2020/04/01 10:52
阅读：418
分享：
免费下载
方案摘要：
方案详情：
如何使用 AzureRed 进行 western blot 总蛋白归一化
“总蛋白归一化”或 TPN变得越来越流行，可以避免依赖看家蛋白进行归一化的许多缺点。不易受样品之间蛋白变化的影响，不是观察一种蛋白的强度，而是每条泳道的总灰度值。由于 TPN 技术消除了许多与信号归一化相关问题， 因此发表文章越来越多地要求使用总蛋白信号进行归一化。
AzureRed 荧光蛋白染色是一种用于凝胶和印迹膜定量总蛋白染色试剂，与 western blot 下游蛋白分析兼容。AzureRed 是全蛋白定量的理想选择，包括转印后染色以确认从凝胶到膜的蛋白转印情况，以及定量蛋白等。
图1
通过聚丙烯酰胺凝胶电泳分离 HeLa 细胞裂解物，并将蛋白从凝胶转印至低荧光 PVDF 膜。蛋白转印后，用 AzureRed 荧光蛋白染色剂（Azure Biosystems 产品 AC2124）染色印迹膜。30 分钟后，使用 Azure Fluorescent Blot Blocking Buffer 封闭膜，之后进行抗体孵育。
表1
使用 Sapphire 双模式多光谱激光成像系统四种激光同时扫描印迹膜成像。如表 1 所示， 使用 520nm 激光检测 AzureRed 染色的总蛋白，使用 AzureSpot 软件分析图像。
在 Sapphire 系统上同时扫描膜上 AzureRed 染色的总蛋白和三个靶标蛋白，得到一张四通道图片（图 1）。所有四个通道都作为图像捕获的一部分进行成像和对齐，图像无需在后期进行位置对齐，也无需在工作流程中添加任何其它成像步骤。叠加图像容易将三种蛋白与总蛋白进行比较。
AzureRed 荧光蛋白染色是荧光 Westernblot 全蛋白定量的理想选择。宽广的线性动态范围确保 AzureRed 成为解决蛋白上样变化的有效标准。AzureRed 的一个关键特性是将其融入现有 Western blot 工作流程的简单性（图 4）。AzureRed 染料可与常用荧光抗体同时检测，无干扰，允许在一张印迹膜上检测多种蛋白质。
下载本篇解决方案：
更多
qPCR技术在动物育种中的应用
盘古实时荧光定量PCR系统是基于高质量元件和高效的设计，结合智能、多功能分析软件，为动物育种科学研究提供高精准度、高灵敏度和高可靠性的实验结果。
农/林/牧/渔
2024/04/12
动物健康，盘古 Super 8全力守护
开展动物疫病检测，有利于及时明确动物病因及根源所在，降低疫病发生率，提高治疗效果，促进养殖业可持续发展。可以对动物疫病起到预防作用，真正准确分析当前动物疫病的流行特征及其可能对周边造成的危害。提高动物产品质量，使人们的食品安全得到尽可能的保障。 盘古 Super 8，全球首款使用通用耗材20min可得到结果，以它的快速、便携、简单、免校准和多机连用等优点全方位助力动物疫病检测。
农/林/牧/渔
2023/07/31
动物疫病早知道，盘古速8解烦恼
检测不及时？发现的时候已经开始死亡？动物死亡率高？你是否还在为动物疫病造成的经济损失而苦恼。究其原因是我们没有及时发现问题，提前采取措施。对动物疫病的检测，艾普拜公司提供全流程解决方案，从快速核酸提取到出检测结果，一站式解决，最快20分钟完成诊断，直接用药，极大的缩短了窗口期，及时用药治疗，减少死亡。
农/林/牧/渔
2023/07/10
公司名称： 艾普拜生物科技（苏州）有限公司
公司地址： 苏州高新区锦峰路8号 联系人： 艾普拜 邮编： 215163 联系电话： 400-859-7787
仪器信息网APP
展位手机站