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植物elisa试剂盒及其耐盐胁迫机制研究新发现

植物elisa试剂盒盐胁迫给农业的生产带来严重危害,因此研究植物的抗盐机制尤为重要。近日由谢旗教授领导的中国科学院遗传与发育生物学研究所的研究人员在ERAD介导的植物激素及非生物胁迫机制研究中取得重要进展,为从基因水平上改造农作物,ELISA试剂盒提高农作物的产量提供很好的理论依据。相关研究成果在线发表在国际植物学领域著名杂志《The Plant Cell》杂志上。植物elisa试剂盒研究发现泛素/26S蛋白酶体系统(ubiquitin/26S proteasome system, UPS)在植物的抗逆过程中起重要的调节作用,很多重要的胁迫响应因子被证明受到E3泛素连接酶调控。近期的研究逐渐把植物对逆境胁迫反应与ER质量检测系统(Endoplasmic Reticulum Quality Control, ERQC)联系起来。在ERQC中包含一种特殊的UPS机制,称为ER相关的蛋白降解机制(ER Associated protein Degradation, ERAD)。ERAD特异性地降解ER中错误折叠的蛋白。在酵母和哺乳动物细胞中对于ERAD机制的研究已经比较透彻并且发现该机制参与了生物体的抗病及抗胁迫过程。但植物中ERAD的关键性组分蛋白迄今了解甚少,ELISA试剂盒这项研究是继该研究组去年解析的ERAD 的HRD复合体后的又一重要发现。揭示了植物和其它真核生物细胞中ER蛋白质量检控系统的共性及植物特有环境互作中特异调控机制,有助ERAD参与植物生长及环境胁迫响应的研究进程。植物elisa试剂盒文章的通讯作者是中科院遗传与发育生物学研究所的谢旗教授,博士生崔凤和刘利静为该论文的共同第一作者。该项研究得到了国家自然科学基金委和国家蛋白研究计划项目的资助。在这篇文章中,研究人员在系统研究泛素/26S蛋白酶体系中泛素蛋白结合酶的基础上发现了一个特异的含有跨膜区的UBC32的基因表达受多种非生物胁迫的诱导。结合细胞生物学、分子生物学和遗传学的方法发现UBC32是一个ER定位的具有生化活性的泛素蛋白结合酶,ELISA试剂盒是植物ERAD复合物之一DOA10复合体中一个不可缺少的组分。并且发现DOA10-UBC32参与了植物激素油菜素内酯介导的植物耐逆的新机制,研究结果为农业生产中应用油菜素内酯提高植物耐逆性提供了理论依据。

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2016.07.22

ELISA试剂盒处理和保存方面考虑以下几个方面

ELISA试剂盒在处理和保存方面要考虑以下几个方面:(1)要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。(2)ELISA试剂盒样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染,人ELISA试剂盒一则细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。(3)血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长时间保存,应在-70℃以下。(4)冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。人ELISA试剂盒标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用,从而引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振荡,反复颠倒混匀即可。(5)ELISA试剂盒标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。至今我们拥有了一支由销售、技术服务、化学市等人员构成的人ELISA试剂盒精英团队,随时为中国客户提供最优质的服务!

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2016.07.22

霉菌毒素ELISA试剂盒新技术研发

ELISA试剂盒根据酶联免疫的原理与研究现状,从人工抗原合成、单克隆抗体制备、试剂盒的反应条件优化、试剂盒技术参数的研究和试剂盒的组装等方面讨论研究过程中的基本操作及存在的题目,为广大科研工作者提供一些理论参考,所以,研制对霉菌毒素快速、高灵敏、高特异性的检测方法显得尤为重要。高效液相色谱、质谱检测法,可做出精确定性定量测定,运用恰当甚至可测到各组分的含量,它们灵敏度高、选择性强,有极好的发展前景,但是样品前处理要求严格,标准品纯度有一定的要求,而且仪器昂贵,测试人员往往还要进行专门的培训,因此成本较高。   ELISA试剂盒饲料中霉菌毒素污染、肉类食品中抗生素和添加剂残留、农产品中农药残留等会给人畜健康带来严重的危害,因此引起了人们的高度重视。黄曲霉毒素污染造成经济损失包括它能使动物生长受阻、 饲料适口性降低、食欲减退、饲料转化效率下降、死亡率增加、降低繁殖性能、蛋鸡产蛋量减少、 肉鸡腿病和胴体污染、内脏出血、肝脏受损、胚胎中毒和对环境应激和病原微生物的抵抗力下降等等。免疫学检测方法尤其是酶联免疫吸附法具有灵敏度高,干扰少,测定步骤简便、快速,操作安全,设备投资少,测定结果准确可靠等特点。   ELISA试剂盒霉菌及其代谢产物(主要是霉菌毒素)在动物性食品中残留可通过食物链而对人类健康构成潜在危害。所以,仅适合大型企业或对检测灵敏度要求较高的科研院校、检测机构等单位使用。存在于动物的乳汁、肝、蛋类等可食部分,常见于乳汁中,它有很强的毒性和致癌性。黄曲霉毒素Ml是黄曲霉毒素B1在哺乳动物体内的主要代谢产物。霉菌毒素污染的饲料对动物生产性能带来的ELISA试剂盒负面影响有些是察觉不到的, 有些却是破坏性的。

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2016.07.18

小鼠的尾静脉注射具体操作步骤:

 首先要固定小鼠,最简单的固定方法就是把小鼠放在盒子里面,让它的尾巴伸在盒盖的外面,用手抓住小鼠ELISA试剂盒尾巴,轻轻往外拽,就可以固定好小鼠了。这种固定方法,小鼠可以在盒子里面活动,固定的也不是很牢固,但是只要你尾静脉注射的手法很熟练,就足以用来注射了。小鼠ELISA试剂盒还有的固定方法就是用一个小的圆筒,最好是金属做的,(可以在当地的铁匠铺,或者买白铁铺里面定做)首先是金属比较结实,而且可以用来固定在铁架台上,方便操作。圆筒的一段有个盖子可以拿下来,盖子中间有个小孔,可以让小鼠的尾巴伸出来(中间的小孔可以用胶布缠一下,防止锐利的边缘割伤小鼠尾巴)。另外一段可以用金属网的结构,网的形状可以做成zi弹头的头端形状。网状结构可以让光线透近来,方便小鼠钻进圆筒里面。圆筒的长度约10cm,直径约3~4cm,可以做个系列长度和直径的圆筒,适合不同大小的小鼠。  固定好小鼠后就是注射了,一般用一次性的1ml的注射器就可以了,玻璃的1ml的注射器也可以用,针头用4号的就可以了。注射前首先要让小鼠的血管充盈。可以采用75%的酒精棉球擦拭的方法或者采用温水浸泡的方法。若小鼠的血管很不清楚,推荐采用温水浸泡的方法,水温以不烫手为宜。温水浸泡2~3分钟后,取出小鼠尾巴,用干棉球擦拭。等一会儿,待血管充盈后,酒精棉球擦拭后就可以进针了。若血管还不充盈,可以反复用温水浸泡,切不可冒险注射,除非你手法很熟练,另当别论。小鼠ELISA试剂盒尾部共有四条血管,一般认为左右的两条静脉比较容易注射,多采用这两条静脉进针。一般要求进针部位靠近小鼠的尾端,这样若注射失败的话,还可以再向上选择进针点。但是进针部位也不可以太靠下,因为越往下,静脉越细,操作越难,一般以小鼠尾巴下三分之一的位置比较好。小鼠ELISA试剂盒最关键的就是进针了。进针时操作者左手食指和拇指固定住小鼠的尾巴,让小鼠的尾巴在经过拇指后向下弯曲,进针点靠近拇指指甲。针头和血管呈约30°角,针尖斜面朝上,轻轻挑刺入皮肤后针头立即和血管平行,一般情况下一次就可以进入血管,可以将针头刺入血管一大半,左右轻轻晃动针头,确定针头在血管内,就可以推注药液了,正常情况下,推注的过程应该没有明显阻力,血管也不会鼓起。推液时动作宜轻柔,若发现血管鼓起,那是针头没有刺入血管,需立即拔出针头。

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2016.07.18

ELISPOT法与ELISA试剂盒法对比区分

ELISPOT法与ELISA试剂盒法对比区分    目前ELISA试剂盒方法仍在研究当中占有着主流地位,ELISA试剂盒的普遍应用使得实验更加方便、经济和准确,ELISPOT技术的优点也决定了它的发展潜力。    LISPOT法来源于ELISA试剂盒,相比较传统的ELISA法有所突破,是定量ELISA技术的延伸和发展。由于游离的循环抗体或CK的半哀期不同,使之在体液中不断的被代谢或与靶器官结合,传统的酶联免疫吸附法(ELISA法)不能确切的反映体内的抗体及CK的水平。    80年代,国外的科研工作者根据ELISA技术的基本原理,建立了体外检测特异性抗体分泌细胞和CK分泌细胞的固相酶联免疫斑点技术(ELISPOT)。随着ELISPOT技术的不断发展,它的优势也渐渐显示出来,    下面将ELISPOT法与ELISA法对比区分。ELISA试剂盒通过显色反应,在酶标仪上测定吸光度,与标准曲线比较得出可溶性蛋白总量。ELISPOT也是通过显色反应,在细胞分泌这种可溶性蛋白的相应位置上显现清晰可辨的斑点,可直接在显微镜下人工计数斑点或通过计算机辅助的分析系统对斑点进行计数,1个斑点代表1个细胞,从而计算出分泌该蛋白的细胞的频率。(某些研究不仅要测细胞因子生成量,还需检测分泌此细胞因子的细胞频率)

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2016.07.12

ELISA试剂盒有益于青少年心理健康的家庭聚餐

ELISA试剂盒有益于青少年心理健康的家庭聚餐家庭聚餐或许对青少年的心理健康有益,ELISA试剂盒有助于保护青少年免于网络欺凌。网络欺凌和未成年人的心理健康直接相关,据调查,五分之一的青少年都经历过网络欺凌,这种现象容易增加青少年心理健康的风险,而且其和药物误用及酒精滥用对心理健康的影响等同。    这项研究中,研究者对49所学校18834名年龄在12至18岁的青少年进行了调查分析,研究人员测定了青少年的五种内化问题(即焦虑、抑郁、自我伤害、自杀意念及自杀未遂情况)在过去的12个月里将近有19%的青少年都报告有过网络欺凌的经历,而网络欺凌和11个所有的内化问题、外化问题及物质滥用问题直接相关;研究者表示,ELISA试剂盒家庭聚餐似乎可以有效调节网络欺凌和青少年心理健康之间的关系,比如每周家庭聚餐四次及以上就可以有效改善网络欺凌受害者和频繁的受害者的心理健康问题。    基于当前研究,ELISA试剂盒研究者们并不能很肯定地总结说,单独的网络欺凌可以引发青少年心理健康问题,以及单一的家庭聚餐就可以免于青少年患心理健康问题;随后研究人员Catherine P. Bradshaw发表社论说,这项研究中点强调了青少年网络欺凌和心理健康之间的关系,而家庭聚餐则可以有效改善二者的关联,帮助正确调节青少年的心理健康。 

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2016.07.11

人血清中小分子蛋白质分离电泳方法改进

人血清中小分子蛋白质分离电泳方法改进     建立一种灵敏易行分离分子量<10 000 Da低丰度蛋白质的电泳方法。    实验方法:用Hitrap Blue层析柱去除血清中白蛋白,用U9对血清样品进行变性处理,采用改进后的方法进行染色。    结果:经去除血清中的白蛋白、对样品进行变性处理及改进染色方法后,分辨率和灵敏度明显提高,可有效分离10 000 Da以下的小分子蛋白质。结论  改进后的电泳方法,不仅简便灵敏,而且还有利于蛋白质的洗脱回收。    患者血清中某些小分子蛋白标志物可以用于疾病监测和快速诊断,但分离分子量<10000Da的小分子蛋白质面临很多问题。三(羟甲基)甲基甘氨酸聚丙烯酰胺凝胶电泳(TricineSDSPAGE)是目前一种有效分离小分子蛋白、多肽的电泳方法,可以用于分离小至1kDa的小分子肽。但其分离效果与样品处理、样品中目的蛋白含量以及染色方法等密切相关。文献报道,使用TricineSDSPAGE分离小分子蛋白的样品多为蛋白质标准品。作者在分离小分子肽的实验中发现,根据文献报道的方法,对于分离蛋白标准品或高丰度蛋白效果尚可,但直接用于分离人血清中低丰度的小分子蛋白效果并不理想。因此,作者在样品的处理、染色等方面进行改进,建立了一种效果理想、简便灵敏的分离人血清中小分子蛋白质的方法。

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2016.07.07

上海盈公人血清医药产业博览会项目取得成果

上海盈公人血清医药产业博览会项目取得成果 联合行业领袖 ,对话生物医药——上海盈公人血清医药产业博览会项目取得成果随着“十二五”规划将生物产业列入战略性新兴产业,各省市相继发布地方性的关于生物产业“十二五”发展规划,一时间各种生物园区、生物基地、生物技术公司如雨后春笋般涌现。其中,尤以生物医药产业发展最为迅猛。急剧升温的生物医药产业带来的不仅仅是生物产业本身的快速发展,更是生物产业上下游整合的新机遇。在这样的形势下,如何办出有特色的生物医药产业博览会?如何更好的服务于展商、观众乃至于整个产业链?如何通过展览会的平台来促进行业发展?对于致力于服务行业、搭建平台的上海纪宁生物医药产业博览会组委会而言,解决了这些问题,才具备了成功举办生物医药展的基础。为了扩大展会影响力,提升展会国际化程度,获得更多的行业支持,组委会于3月上旬集中拜访了众多行业协会、学会和境外驻华机构。在拜访过程中,行业组织对于上海纪宁生物医药产业博览会坚持国际性、专业性、贸易性的展会定位普遍表示了高度认可,对于组委会提出的问题给予了专业、耐心的解答和指导,为展会稳步推进指明了方向。其中,众多国家级行业协会、学会明确表示将大力支持展会的招展、招商工作和同期会议、论坛的筹备工作。同时,本次拜访的数个生物产业发达国家驻华机构对于展会亦表现出强烈的兴趣,届时将组织境外企业参展、参观。具体推进情况请关注组委会的后续报道。在政府和行业的支持下,组委会将立足南京、辐射全国、面向世界,逐步把上海盈公生物医药产业博览会打造成一个全球范围内具影响力和号召力的“生物医药展”品牌。为我国的生物医药产业的发展搭建高效、优质的平台。我公司拥有雄厚的实力、合理的人血清价格和优良的服务,能够及时解决和满足客户的各方面的需求,与国内多家企业建立了良好的长期合作关系,在市场上树立了良好的信誉和形象。

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2016.07.05

ELISA试剂盒处理和保存方面考虑以下几个方面

ELISA试剂盒在处理和保存方面要考虑以下几个方面:(1)要注意避免出现严重溶血。血红蛋白中含有血红素基团,其有类似过氧化物的活性,因此,在以HRP为标记酶的ELISA测定中,如血清标本中血红蛋白浓度较高,则其就很容易在温育过程中吸附于固相,从而与后面加入的HRP底物反应显色。(2)样本的采集及血清分离中要注意尽量避免细菌污染,人ELISA试剂盒一则细菌的生长,其所分泌的一些酶可能会对抗原抗体等蛋白产生分解作用;二则一些细菌的内源性酶如大肠杆菌的β-半乳糖苷酶本身会对用相应酶作标记的测定方法产生非特异性干扰。(3)血清标本如是以无菌操作分离,则可以在2~8℃下保存一周,如为有菌操作,则建议冰冻保存。样本的长时间保存,应在-70℃以下。(4)冰冻保存的血清标本须注意避免因停电等造成的反复冻融。人ELISA试剂盒标本的反复冻融所产生的机械剪切力将对标本中的蛋白等分子产生破坏作用,从而引起假阴性结果。此外,冻融标本的混匀亦应注意,不要进行剧烈振荡,反复颠倒混匀即可。(5)标本在保存中如出现细菌污染所致的混浊或絮状物时,应离心沉淀后取上清检测。至今我们拥有了一支由销售、技术服务、化学市等人员构成的人ELISA试剂盒精英团队,随时为中国客户提供最优质的服务!

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2016.06.29

大鼠ELISA试剂盒解密辣椒为什么这么辣?

大鼠ELISA试剂盒解密辣椒为什么这么辣?     辣椒最早出自美洲,但自十五世纪被航海家们带至世界各地后,这种植物成为了全球最广泛种植的香料作物之一。辣椒不仅营养丰富,最重要的就是其口味中的辣令美食家们流连忘返,甚至还成为了一些城市的“地标”那么这种备受世界各地喜爱的植物为何会具有这样独特的辣味呢?本身从进化的角度上来看,野生辣椒的辣味能令食草动物退避三舍,不去咀嚼其种子,但是对于人类来说辣椒并不是必需的,主要是因为其辣味带来的神经刺激,让我们渐渐“上瘾”,这其中有何奥秘?辣椒辣味的遗传分子机制又是什么呢?野生辣椒与驯化后的辣椒有何区别?带来辣味的“辣基因”还存在于哪些蔬菜中呢?    大鼠ELISA试剂盒以及随后的航海探索,辣椒传遍了世界各地,这是由于辣椒能够适应于不同的农业气候,并且被具有不同文化背景的人们快速接受。 在对辣椒与其他茄科植物的比较基因组及进化分析中,还发现辣椒和西红柿、马铃薯一样,经历了一次三倍化事件和一次全基因复制事件,但是由茄科中分化出的辣椒属分支并未发生全基因组的复制,进一步证实辣椒的基因组扩张是由近期重复序列的扩张复制导致的。相对于马铃薯和西红柿,辣椒基因组产生了大量的重排和异位事件。辣椒为什么会辣,含有同源基因的西红柿为何不辣?   对于这个辣椒碱主要由辣椒素和二氢辣椒素组成,能够产生辣椒果实独特的辣味。在辣椒中发现了51个参与辣椒素生物合成的基因家族,虽然这些基因家族在西红柿、土豆、拟南芥中也存在同源基因,但部分关键的基因在辣椒中有明显的拷贝数扩增。ELISA试剂盒通过对不同辣度的辣椒相关转录组数据的比较分析,我们推测可能负责辣椒素最终合成的AT基因家族中AT3-D1和AT3-D2基因协同作用,合成并积累含量不同的辣椒素,这可能是一种与辣椒素积累相连的关键因素,可以决定不同品种辣椒的辣度。其它一些蔬菜,如西红柿,马铃薯种也含有辣椒碱生物合成相关的同源基因,那么为何这些蔬菜中没有辣味呢?      大鼠ELISA试剂盒西红柿和马铃薯AT同源基因比较,负责辣椒素最终合成的AT基因家族中AT3-D1和AT3-D2发生了保守结构域中重要氨基酸的突变,这种突变导致AT3-D1和AT3-D2基因发生了功能的变化,能够合成辣椒素并产生辣椒果实独特的辣味。 同时对野生辣椒和栽培辣椒进行了全基因组测序,并绘制了其完整的基因组图谱。 相关发现证实了前人推测的染色体异位现象。在人工驯化过程中,野生种的1号染色体和8号染色体发生了染色体的异位,导致了驯化后的栽培种1号染色体的长臂更长和8号染色体的长臂更短,但是8号染色体的短臂并没有丢失,只是低密度的遗传图谱观测不到。     ELISA试剂盒通过将3个野生/半野生和栽培辣椒基因组与20种重测序品种进行比对之后,研究人员发现了大量的驯化候选基因,这些基因揭示出人工选择的分子印迹。在驯化辣椒的选择区域内,有511个基因可能是与转录调控、压力、防御反应、生长、果实发育相关。另外,在栽培和驯化辣椒之间的形体和生理上的差别也可能与这些驯化的基因有关。此外,之前韩国的也完成了甜辣基因组测序,两个参考物种都是一年生辣椒,尽管表型不同,但基因组的特征非常相似,基因组的序列差异不到1%。

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2016.06.27

大鼠ELISA试剂盒解析不治性肿瘤侵袭机制

大鼠ELISA试剂盒解析不治性肿瘤侵袭机制一项小鼠研究表明,在疾病进程的早期侵袭性的胶质母细胞瘤细胞有可能劫持了脑血管,破坏了大脑的保护屏障。这一研究发现或可最终促成一些新方法来引起肿瘤死亡,因为一些疗法有可能能够在比以往预想的更早的时间点来触及这些致命的细胞。胶质母细胞是一种侵袭性的脑肿瘤,其是最具破坏性的癌症形式之一。由于大脑保护自身免受外来物质的攻击,这些肿瘤扩散迅速,难于治疗血脑屏障(BBB)的功能是阻碍有害物质渗漏到大脑中,大鼠ELISA试剂盒及调控大脑和血管之间重要分子的来回运输。紧密连接是血脑屏障的一个组成部分,其在血管内皮细胞之间形成密封。有几种细胞类型覆盖在血管之上,其中包括称之为星形胶质细胞的特化脑细胞,具有称作为终足(endfeet)的延伸突起,其覆盖在90%的血管表面。星形胶质细胞的终足会释放一些分子,调控内皮细胞之间的紧密连接。它们还释放一些特异的化学物质引起血管扩张或收缩,由此调节大脑血流量。整体上,血脑屏障可被视作是分隔大脑与血液的一个巧妙的防护层胶质母细胞、星形胶质细胞和脑血管之间的相互作用。大鼠ELISA试剂盒他们利用胶质母细胞瘤小鼠模型、荧光染料和各种成像技术,观察了肿瘤细胞是如何迁移通过大脑,与其他的细胞及血管相互作用的。主瘤体外部的几乎所有胶质母细胞瘤细胞都定位在星形胶质细胞终足与血管外表面之间的空间。通过利用小血管网作为支架,胶质母细胞瘤能够沿着血管迁移,从血管中提取营养物质绝大多数肿瘤细胞都与血管相关联。这些细胞似乎利用了血管作为公路,在大脑内远距离迁移,此外结果还揭示胶质母细胞劫持控制了血流量,将其从星形胶质细胞身边夺走。因此,紧密连接变得松动,导致了血脑屏障瓦解。非常小的肿瘤细胞群甚至个别细胞就足以在病程的早期削弱血脑屏障。在疾病早期血脑屏障不能够完全防御侵袭肿瘤细胞,大鼠ELISA试剂盒这些细胞或许更易受到经血液传送至大脑的一些药物影响。如果这些研究结果适用于人类,利用一些抗侵袭药物进行治疗或许对新确诊的胶质母细胞瘤患者有益。局部破坏血脑屏障或可实现区域性精确递送药物,在最早期的阶段来攻击肿瘤细胞提供了新的视角来调查胶质母细胞瘤细胞成功侵入大脑内部,控制血流满足它们的利益的机制。

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2016.06.21

暑期抗体大鼠ELISA试剂盒畅销

暑期抗体大鼠ELISA试剂盒畅销在西方国家,不孕夫妇的比例占总人群的10-15%(Haas et al,1980)。目前人们还不能精确的知道由免疫学因素导致不孕的发病率是多少。由于有很多不同的检测方法,人们对抗精子抗体在不孕中的作用存在着很大争议。在检测抗精子抗体的传统检测方法中,抗体大鼠ELISA试剂盒精子凝集检测和精子固定检测已被广泛应用。这些方法及其它凝集检测都很耗费时间,并且结果与其操作不协调。与传统的检测方法相比,用ELISA检测抗精子抗体具有很多优点。抗精子抗体ELISA试剂盒结合这些优点,并同时还具有高灵敏度和高特异性的特点。此试剂盒操作简单,并且可以检测很多种血清。我公司的精子抗体酶免试剂盒提供了人血清和精液中抗精子表面抗原抗体定量检测所需要的实验材料。此检测试剂盒利用的是非竞争性的原理。抗体大鼠ELISA试剂盒包被在包被板微孔中的精子表面抗原是从池子中提取到的,它采用的方法是Alexander在1984年所提及到的那种方法。将疑似免疫学不孕病人的血清(已稀释好)加入到包被孔中温育,之后洗板,再加入过氧酶标记的抗人免疫球蛋白(IgA,IgG和IgM)并温育。温育后洗板,再加入TMB底物液,并酶标仪检测所显示的颜色强度。微孔中所显示的颜色强度与结合的免疫球蛋白浓度成正比。实验结果可从标准曲线上读取,结果单位为units/ml。特价促销:节假日期间,我公司所有试剂盒一律8折优惠,抗体ELISA试剂盒并提供免费代测服务,只收取试剂盒的费用,其他辅助设施全部免费。

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2016.06.21

ELISA试剂盒分析中胸腺中新老细胞之间的竞争关系

ELISA试剂盒分析中胸腺中新老细胞之间的竞争关系    在胸腺中,T细胞从前体细胞形成,后者不断被新到达的骨髓祖细胞取代。ELISA试剂盒Hans-Reimer Rodewald及同事发现,这是“老"细胞与“新"细胞之间竞争的结果。    在没有细胞竞争的情况下,当新骨髓祖细胞的流入在小鼠体内被阻断时,老细胞就会重新获得自我更新并最终被改变的能力,导致“T-细胞急性淋巴细胞性白血病"(T-ALL)的发生,ELISA试剂盒与人类的这种白血病相似。    与此同时,基因表达会发生变化,也会出现经常在人类T-ALL中所见到的基因突变。因此,细胞竞争会充当一个“肿瘤抑制因子"机制。ELISA试剂盒这项研究也许还能帮助解释用基因矫正过的自体祖细胞治疗之后在“与X相关的严重联合免疫缺陷"患者身上所看到的、被广泛讨论过的T-细胞白血病。

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2016.06.16

酶联免疫试剂盒聚集有利于基因表达

酶联免疫试剂盒聚集有利于基因表达    各种分子在细胞内的聚集,与人群的聚集没有太大不同。论文第一作者、该校兰恩计算生物学中心博士后研究员谭志明(音译)解释说,如果一间屋子里只有少数人,聚拢一处或分散独立都很容易;但在一个拥挤的屋子里,想要四处移动就很困难,酶联免疫试剂盒个体之间就容易更长时间地保持近距离。在细胞内也是如此,如果细胞内的空间很拥挤,两个分子结合在一起的情况就会增加。“在学习怎样制造人造细胞方面,我们还处于刚刚起步阶段。"谭志明说。目前,在合成生物系统大部分研究是以化学溶液为基础,而这与分子聚集无关。大分子聚集是天然细胞的一个关键特征,通过体积排斥效应而影响生化动力学,减少扩散率而增加大分子的结合率。为了模仿拥挤的细胞内环境,酶联免疫试剂盒研究人员用了多种不同数量的聚合物,以检测它们在不同密度水平下的效果。结果发现,密集的环境使基因转录变得对环境缺乏敏感。当他们改变镁、铵和亚精胺(一种能调节大分子稳定性和结合能力的化学物质)的密度时,低密度环境下基因表达的扰动变化比在高密度环境下更大。    论文中指出,该研究证明大分子聚集会把生物线路和人造细胞纳米系统中的细胞成分结合在一起,从而增加了基因表达的稳定性。酶联免疫试剂盒研究人员认为,这些发现有助于理解细胞是如何适应分子聚集现象的,哪些是进化过程中保留下来的,而这些理解可能指导合成生物学家将来开发出人造细胞,用于药物递送、生物燃料生产和生物传感器等。

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2016.06.07

研究ELISA试剂盒称吃核桃有助人体应对压力

研究ELISA试剂盒称吃核桃有助人体应对压力    生活紧张,血压升高?心血管不好,血压偏高?美国最新研究发现,ELISA试剂盒这两种血压问题,吃点核桃就能应对。《美国营养学会》杂志近日刊登的一项最新研究发现,吃核桃有助于人体应对压力,降低高血压。   由美国宾夕法尼亚州立大学完成的这项新研究发现,ELISA试剂盒吃核桃和核桃油一周后,人们的平均舒张压明显下降。总体上,“坏胆固醇"水平高的患者吃富含核桃的饮食3周之后,即使面临很大压力,血压也会明显更低。   该研究负责人希拉·怀斯特教授表示,ELISA试剂盒新研究首次表明,吃核桃可降低心理压力造成的血压升高。这不仅进一步证实了“核桃可降低胆固醇和高血压",而且表明吃核桃也有助于减轻生活压力。

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2016.06.03

ELISA试剂盒帮你来决定分化功能性神经元

ELISA试剂盒帮你来决定分化功能性神经元    近日加州大学科学家发现了UPF1蛋白的新功能,该蛋白能够决定神经元前体细胞是否保持干细胞状态还是分化成为功能性神经元。    该研究称UPF1能够控制无义RNA降解(nonsense-mediated RNA decay)过程。之前研究发现NMD具有两大作用,第一是质量控制机制,细胞通过该过程降解错误mRNA。ELISA试剂盒第二是降解一些正常的mRNA,科学家一直认为该作用非常重要,但是还没有证据揭示其作用意义。    科学家在本研究中发现UPF1能够作为分子开关决定神经元前体细胞的命运。UPF1能够引起编码TGF-belta的mRNA降解,而TGF-belta能够促进神经元分化。ELISA试剂盒UPF1通过降解该mRNA,引起蛋白数量下降,导致分化过程被抑制。    同时NMD也促进编码增殖抑制因子的mRNA降解,这就使得细胞保持了干细胞的增殖能力。    该文章的通讯作者Miles F. Wilkinson博士称,该发现有重大的临床意义,一方面是NMD能够促进干细胞状态,ELISA试剂盒可能更有效的将已分化细胞重编程为干细胞。ELISA试剂盒另一方面是NMD对大脑正常发育有重要作用,NMD缺陷的人会出现智力障碍或精神分裂,促进NMD的方法有望能够使干细胞和分化神经元重新达到平衡,因此恢复大脑正常功能。该研究对开发治疗诸如自闭症,精神分裂等神经系统疾病的药物有重要意义。相关报道发表在近期的Cell Reports杂志上。

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2016.06.01

亲和层析纯化

亲和层析是利用待分离物质和它的特异性配体间具有特异的亲和力,从而达到分离目的的一类特殊层析技术。 具有专一亲和力的生物分子对主要有:抗原与抗体、DNA与互补DNA或RNA、酶与它的底物或竞争性抑制剂、激素(或药物)与它们的受体、维生素和它的特异结合蛋白、糖蛋白与它相应的植物凝集素等。可亲和的一对分子中的一方以共价键形式与不溶性载体相连作为固定相吸附剂,当含有混合组份的样品通过此固定相时,只有和固定相分子有特异亲和力的物质,才能被固定相吸附结合,其它没有亲和力的无关组份就随流动相流出,然后改变流动组成份,将结合的亲和物洗脱下来。亲和层析中所用的载体称为基质,与基质共价连接的化合物称配基。 亲和层析纯化过程简单、迅速,且分离效率高。对分离含量极少又不稳定的活性物质尤为有效。但本法必须针对某一分离对象,制备专一的配基和寻求层析的稳定条件. 使用亲和层析的方法可以简便、快速、高效地将目标蛋白从杂蛋白溶液中分离纯化出来,亲和层析技术已成为广泛应用的一种蛋白分离技术.或可为客户提供的抗体或抗血清制备亲和层析柱。 使用亲和层析的方法可以简便、快速、高效地将目标蛋白从杂蛋白溶液中分离纯化出来,亲和层析技术已成为广泛应用的一种蛋白分离技术。 我公司目录中的抗体均可根据客户的需求制备成亲和层析柱,或可为客户提供的抗体或抗血清制备亲和层析柱。 亲和层析可用于: 1、纯化生物大分子; 2、稀溶液的浓缩; 3、不稳定蛋白质的贮藏; 4、从纯化的分子中除去残余的污染物; 5、用免疫吸附剂吸附纯化对此尚无互补配体的生物大分子; 6、分离核酸是亲和层析应用的一个重要方面。

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2016.05.30

抗体冻干粉怎么溶解

抗体(冻干粉)已经包含了0.01M PBS、1% BSA和0.1% 防腐剂(叠氮钠或庆大霉素),您只需要加入灭菌的双蒸水就行了。抗体溶解后,置于-20℃保存,最好分装后使用,避免反复冻融,可保证至少1年有效;二、也可以只加入一半体积的双蒸水,再用一半体积的甘油补足,置于-20℃保存,这样抗体不会冻,有利于抗体的稳定。后续试验时,再使用对应的缓冲液稀释成工作液,即用即配。热休克蛋白60(HSP60)ELISA试剂盒 ,英文名: HSP60 ELISA Kit热休克蛋白40(HSP-40)ELISA试剂盒 ,英文名: HSP-40 ELISA Kit热休克蛋白27(HSP-27)ELISA试剂盒 ,英文名: HSP-27 ELISA Kit热休克蛋白27(HSP27)ELISA试剂盒 ,英文名: HSP27 ELISA Kit热休克蛋白22(HSP-22)ELISA试剂盒 ,英文名: HSP-22 ELISA Kit热休克蛋白20(HSP-20)ELISA试剂盒 ,英文名: HSP-20 ELISA Kit热休克蛋白20(HSP20)ELISA试剂盒 ,英文名: HSP20 ELISA Kit热稳定抗原(HSA/CD24)ELISA试剂盒 ,英文名: HSA/CD24 ELISA Kit缺氧诱导因子1α(HIF-1α)ELISA试剂盒 ,英文名: HIF-1α ELISA Kit缺血修饰白蛋白(IMA)ELISA试剂盒 ,英文名: IMA ELISA Kit犬尿氨酸(KYN)ELISA试剂盒 ,英文名: KYN ELISA Kit醛糖还原酶(AR)ELISA试剂盒 ,英文名: AR ELISA Kit醛缩酶(ALD)ELISA试剂盒 ,英文名: ALD ELISA Kit醛固酮(ALD)ELISA试剂盒 ,英文名: ALD ELISA Kit全段甲状旁腺素(i-PTH)ELISA试剂盒 ,英文名: i-PTH ELISA Kit去乙酰化酶Sirtuin-7(SIRT7/SIR2L7)ELISA试剂盒 ,英文名: SIRT7/SIR2L7 ELISA Kit去乙酰化酶Sirtuin-6(SIRT6/SIR2L6)ELISA试剂盒 ,英文名: SIRT6/SIR2L6 ELISA Kit去乙酰化酶Sirtuin-5(SIRT5/SIR2L5)ELISA试剂盒 ,英文名: SIRT5/SIR2L5 ELISA Kit去乙酰化酶Sirtuin-4(SIRT4/SIR2L4)ELISA试剂盒 ,英文名: SIRT4/SIR2L4 ELISA Kit去乙酰化酶Sirtuin-2(SIRT2/SIR2L/SIR2L2)ELISA试剂盒 ,英文名: SIRT2/SIR2L/SIR2L2 ELISA Kit去乙酰化酶Sirtuin-1(SIRT1/SIR2L1)ELISA试剂盒 ,英文名: SIRT1/SIR2L1 ELISA Kit

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2016.05.30

防暑降温防

     近来一直多雨,天气闷热,暑气逼人。所以,立秋后防暑降温要继续。     一、清热解暑类食品别一下子全撤除。此类饮食既能消暑敛汗补液,还能增进食欲。因此喝些绿豆汤,或者吃些莲子粥、百合粥和薄荷粥很有益处。多吃一些新鲜水果蔬菜,既可满足人体所需要的营养,又可补充经排汗而丢失的钾。     二、寒凉饮食要减少———西瓜、黄瓜要少吃。经过一个夏天后,人们的身体消耗很大,特别是一些老年人,大多脾胃虚寒。因此,在选择食物时,不宜过于寒凉,如西瓜、梨、黄瓜等,其性味寒凉,多吃可能伤及脾胃,所以要少吃。     三、饮食营养要加强———可适当吃肉食。人们不能只为了追求清热解暑,而使饮食过于清淡。事实上,到了立秋可以适当吃一些肉食,有许多食品如鸭肉、泥鳅、鱼、瘦猪肉、海产品等,既有清暑热又有补益的作用,可以放心食用。 还须防治“空调病"     炎炎夏日,许多家庭和办公室都开着空调,人们在享受清风凉意的同时,也有人患上“空调病"。在立秋后,天气早晚较凉,稍不注意,就会出现腹痛、吐泻、伤风感冒、腰肩疼痛等症状。     一、空调开放时间不宜过长,夜里最好不开或调在除湿档。     二、处在空调环境中的人们经常喝点姜汤。中医认为,生姜具有发汗解表、温胃止呕、解毒三大功效。     三、有哮喘、慢性支气管炎等慢,胃肠功能较弱,如经常腹泻的人,不宜开空调。必要时避免直吹或将腹部盖好。 预防胃肠疾病     秋天,面包、蛋糕、熟肉、鱼虾、奶、鸡蛋、桃、香蕉、甘蔗、大米、豆类等食物易发生霉变,因此,有关专家提醒人们,在这个季节打开封闭式包装的食物后,一天内应吃完,如时间较长,在确认没有变质的情况下要充分加热后才可食用。牛奶变质一定不能喝。霉变的大米、面包、蛋糕一定不要吃。经过清洗的水果更易发生溃烂,所以应现吃现洗。 

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2016.05.26

早起四个习惯堪比自杀

    俗话说“一天之计在于晨”,要想以最好的状态迎接新的一天,必须科学又合理地做好每件事。那么,早晨起来有哪些习惯是不好的,甚至是会危害到人体健康的呢?  1、对床依恋不舍  恋床是很多人都有的小毛病,尤其是上班族,平时工作繁忙,早上及时起床是件很困难的事情。那么恋床仅仅是一个小的生活习惯吗?诚然,充足的睡眠可解除疲劳、恢复精力。  但有的人错误地认为,多睡有益健康,尤其是有利于青少年生长发育,所以有的人早上一有机会就赖在床上不起来,使睡眠时间大大超过需要。这是一种不良习惯,长此以往,会有损身体健康。  而且,经过一个晚上,腹中空空,已出现明显得饥饿感,这时如恋床不起,势必打乱肠胃活动规律,时间一长,胃肠粘膜将遭到损害,容易诱发胃炎、胃溃疡及消化不良等疾病。  所以,必须注意睡眠时间的合理性,保持良好的生活习惯。。   2、醒来后立即起身小便  早晨一觉醒来,经过一整夜之后,膀胱内已充满了尿液,有迫切的排尿感,尿意越是紧迫,越要沉得住气,不可立即起身小便。可是这种一起身就立即小便的行为对人体有什么危害呢?  其实,醒来立即小便使得膀胱排空,这个时候容易引起头晕,甚至出现排尿性晕厥的现象。   3、醒后立即剧烈运动  一大早起来运动是好事吗?有些人喜欢晨起后习惯进行适当的体育锻炼,这样并无过错,但是如果不注意的话,对健康的益处其实不大。  如果真的有早晨运动的习惯,必须在晨起后稍作休息一下,待气血阴阳运行平衡后再进行。否则就容易发生心、脑血管的意外。  4、不吃早餐  据营养专家分析,早餐是一日中最重要的一餐。身体在经过睡眠的休息后,已做好充分准备迎接一天的工作、学习,这时需要摄取丰富的营养,来应付整日的消耗。  不吃早餐对大脑的危害:虽说脑组织的重量只占人体重的2-3%,但脑的血流量每分钟约为800毫升,耗氧量每分钟约为45毫升,耗糖量每小时约为5克。  青少年的脑组织正处于发育期,血、氧、葡萄糖的需求量比成人还高。如血糖过低,脑意识活动就会出现障碍,长期如此,势必影响脑的重量和形态发育。  不吃早餐对消化系统的危害:正常情况下,头天晚上吃的食物经过六小左右就从胃里排空进入肠道。第二天若不好吃早餐,胃酸及胃内的各种消化酶就会去“消化”胃粘膜层。  长此以往,细胞分泌粘液的正常功能就会遭到破坏,很容易造成胃溃疡及十二指溃疡等消化系统疾病。  早晨做好4件事提升全天状态促进健康   第一件、活动四肢。  早上睁开眼睛后,先躺在床上活动一下四肢,三五分钟后再慢慢起来。这个好习惯不但可以避免因为猛然起身而导致的血压波动、头晕等现象,而且可以让你从迷迷糊糊的状态中快速清醒。  推荐3种活动四肢的方法:将双腿弯曲再伸直;双手抱住膝盖在胸部维持10秒;双手尽量向后伸直。   第二件、晨起排便。  这个好习惯一经养成,会让你终身受益。还没这个习惯的人可以有意培养,比如多吃白菜、粗粮等高纤维食物,早起后不管有没有便意,都要蹲一蹲厕所,久而久之,习惯就会养成。  第三、早上一定要好好刷牙。  即使临睡前刷了牙,但夜间口腔环境属于恒定状态,最适合细菌繁殖生长,产生口气,有害口腔健康。因此,早晨一定要好好刷牙,至少刷够2分钟。  第四、早晨起来喝杯白开水。  晨起一杯白开水可以补充身体代谢失去的水分,又可以促进排泄,防治便秘。而且它还能稀释血液,促进血液循环,防止心脑血管疾病的发生,对中老年人尤为重要。也可以用淡盐水代替白开水。专家建议:起床后最好先排便,再刷牙、洗脸,然后空腹喝杯白开水,最后吃饭。但根据个人体质和习惯,排便时间可能会有不同,不必太强求。  但最好先刷去牙齿上残留的牙垢以及繁殖的细菌后,再喝水、吃饭,这样更利于健康,饭后再用清水漱漱口。

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2016.05.20

JBC神经学新成果

    神经元迁移的扰乱,可能会导致多种神经系统疾病。转化生长因子β(TGF-β)信号和头小畸型相关蛋白WDR62,对于大脑发育过程中的神经元迁移至关重要,然而,潜在的分子机制尚不清楚。研究表明,TGF-β激活的激酶1(TAK1),可与RAC1和支架蛋白WDR62、POSH形成一个蛋白复合物,介导TGF-β-JNK信号,并在大脑皮层发育期间的神经元迁移中,发挥至关重要的作用。   神经元的辐射状迁移,对于大脑发育过程中的大脑皮层分层和功能性神经连接,起着至关重要的作用。在大脑皮质形成过程中,来源于脑室区(VZ)的新生神经元,经历了放射状胶质细胞引导的迁移,到达它们最终在大脑皮层的目的地。神经元迁移的扰乱,可能会引起各种神经学疾病,例如主常染色体隐性头小畸型(MCPH)和平脑症。    转化生长因子β(TGF-β)信号控制着细胞增殖、分化、形态发生和组织内稳态等发育过程。有研究表明,通过敲除II型TGF-β受体(Tβr2)扰乱TGF-β信号,在大脑发育期间的轴突规范和神经元迁移中,发挥重要的作用,然而,TGF-β信号在神经元迁移过程中所涉及的相关机制,仍然是未知的。    TGF-β信号是通过Smad依赖性(典型)和Smad非依赖性(非典型)的途径而被调控的。与TGF-β相关的一种这样的非典型途径是,c-Jun N末端激酶(JNK)途径。一种JNK途径蛋白复合物——PJAC,以及GTP酶家族成员RAC1、MLKs的几个成员和MAP激酶(MKK)4和7,已被证明参与了神经元细胞凋亡。有趣的是,在发育的大脑中,几个PJAC成分,包括POSH、RAC1、MKK4和MKK7,对于辐射状的神经元迁移,也是必不可少的。然而,在大脑发育过程中,JNK是促进还是抑制神经元辐射,仍然是有争议的。    WD40重复蛋白62(WDR62)的突变体,已被确定为可引发人类MCPH。研究表明,WDR62在大脑发育过程中,控制着JNK信号和神经发生,包括神经元迁移。WDR62如何参与JNK信号的调控,仍然不是非常明确。    在这项研究中,研究人员表明,在大脑皮层发育过程中,TGFβ激活的激酶1(Tak1)和c-Jun N末端激酶2(Jnk2)可扰乱神经元迁移,由Tβr2或Tak1敲除或/和敲入引起的这种迁移缺陷,可分别通过TAK1和JNK2的表达而得以部分修复。    此外,TAK1与RAC1,和JNK途径的两个支架蛋白——WDR62和POSH,形成一个蛋白复合物。这个复合物的各个成分相互协调,调控着TAK1以及JNK的活性。研究人员指出,这种独特的JNK蛋白复合物,参与了大脑发育过程和疾病发病机理中的各种生物学和病理学功能。

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2016.05.13

如何选择液位变送器

1,确定测量介质;根据介质的腐蚀程度的大小选择接触式或非接触式液位变送器,一般来说非强酸强碱均可以使用以不锈钢为隔离单元的投入静压式液位变送器,否则只能选择专为防腐蚀设计的非接触式液位变送器(如雷达物位计,超声波液位计等) 2,测量介质的粘稠度:如果很粘稠 ( 比如流动很迟缓 ) 应选非接触式液位变送器, 3,选择测量范围(量程);选择量程以最大测量范围为准。4,选择测量方式;确定测量开口或带压容器的液位,区分负压还是真空压,选择投入静压式液位变送器或差压变送器或非接触式液位变送器(如雷达物位计,超声波液位计等) 5,确定精度范围;根据您生产工艺的最低测量要求,选择略高于所要求最低精度的产品。 6,确定温度范围;一般选择时略大于要求的温度范围 7,确定按装方式,电气接口,机械尺寸等 8,确定是否需要防爆,以及外壳防水的环境指标9,考虑长期稳定性指标.

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2016.05.12

培养基灭菌的方法

     什么是培养基灭菌?培养基灭菌的方法有哪些?我司与您共享培养基灭菌的方法。一、热灭菌的主要原理1.微生物的热阻2.对数残存定律3.理论灭菌时间的计算4.灭菌温度的选择二、灭菌方法1、高压蒸汽灭菌:高压蒸汽灭菌适合于耐高温培养基、接种器械和蒸馏水的灭菌。培养基在爱制备过程中混入各种杂菌,分装后应立即灭菌,至少应在24h内完成灭菌工作。灭菌时一般是在0.105MPa压力下,温度121℃时,灭菌15~30min即可。消毒时间不宜过长,也不能超过规定的压力范围,否则有机物质特别是维生素类物质就会在高温下分解,失去营养作用,也会使培养基变质、变色,甚至难以凝固。 将蒸馏水或自来水装在三角瓶中,装水量一般不超过瓶的2/3,用牛皮纸或硫酸纸包扎封口,然后放入高压锅中灭菌后即为无菌水。 灭菌后的培养基可放到培养室中预培养3d,若无污染现象,则证明灭菌是彻底的,可以使用。暂时不用的培养基置于10℃下保存。含IAA或GA3的培养基应在1周内用完,其他培养基最多也不要超过1个月。2、过滤灭菌:一些植物生长调节剂及有机物,如IAA、GA3、ZT、CM等,遇热容易分解,不能与培养基一起进行高温灭菌,而要使用细菌过滤器滤去其中的杂菌。细菌过滤器与滤膜(孔径0.45微米)使用之前要先进行高压灭菌。过滤后的溶液要立即加入培养基中,若为液体培养基,可在培养基冷却至30℃时加入;若为固体培养基,必须在培养基凝固之前(5060℃)加入,振荡使溶液与其他成分混合均匀。

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2016.05.05

解析血清的质量标准

    血清是我公司主营产品之一,质量保证,价格优惠。血清质量高低取决于两方面因素:一是取材对象,二是取材过程。用于取材的动物应健康无病并且在指定的出生天数之内,取材过程应严格按照操作规程执行,制备出的血清要经过严格的质量鉴定。在此,古朵生物解析血清的质量标准:    1.牛血清必须来自有文件证明无牛海绵状脑病的牛群或国家。并应具备适当的监测系统。    2.证明所用牛血清中不含对所生产疫苗病毒的抑制物。    3.有些国家还要求牛血清来自未用过反刍动物蛋白饲料的牛群。    4.无细菌、霉菌、支原体和病毒的污染,有些国家要求无细菌噬菌体污染。    5.对细胞有良好的支持繁殖作用。    6.血清要通过滤膜过滤除菌,保证无菌。

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2016.05.05

关于人ELISA试剂盒洗板两点方法讲解

关于人ELISA试剂盒洗板两点方法讲解    由于“人ELISA试剂盒”具有的特异性,抗原抗体的结合发生在抗原的决定簇与抗体的结合位点之间。那么ELISA试剂盒洗板方法有以下两点。1.  手工洗板方法:吸去(不可触及板壁)或甩掉酶标板内的液体;在实验台上铺垫几层吸水纸,酶标板朝下用力拍几次;将推荐的洗涤缓冲液至少0.3ml注入孔内,浸泡1-2分钟,根据需要,重复此过程数次。2.  自动洗板:如果有自动洗板机,应在熟练使用后再用到正式实验过程中。待检样本:体液、血清、血浆、细胞培养上清液、尿液、组织匀浆、心房水标本等人ELISA试剂盒的样品采集方法,是收集标本前必须清楚要检测的成份是否足够稳定。对收集后当天进行检测的标本,储存在4℃备用,如有特殊原因需要周期收集标本,将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。避免反复冻融。标本2-8℃可保存48小时,-20℃可保存1个月。-70℃可保存6个月。部分激素类标本需添加抑肽酶。

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2016.04.26

心脏外层细胞具有修复受损组织功能

心脏外层细胞具有修复受损组织功能英国科学家研究发现,心脏最外层中的细胞接受刺激后可以深入心肌,帮助修复受损组织。据《独立报》日前报道,英国伦敦儿童健康研究所的科学家发现,心脏最外层包含一种叫做祖细胞的细胞。它像干细胞一样,具有生长成心脏中任何一种新组织的能力。此前,科学家一直认为成熟心脏的细胞处于“静止”状态,任何参与修复心脏的祖细胞必须从骨髓移植到心脏。但伦敦儿童健康研究所负责这项研究的保罗·赖利说,这种祖细胞已经存在于心脏本身,所需要的是“适当”的指令,使它们形成新血管,帮助修复心肌损伤。研究人员说,利用蛋白质胸腺素-β4刺激这种细胞,可以使其进入心肌并形成新血管。在新血管运送氧气和养分的过程中,受损心肌可以生长出新组织并自我修复。研究人员专门培育出心脏缺少胸腺素-β4的实验鼠并进行试验,发现这些实验鼠的心脏发育不正常,心肌出现组织损失的早期迹象,血管生长也差。赖利说:“为了研究胸腺素-β4是否对受损成熟心脏有治疗作用,研究小组从成年鼠心脏最外层取出细胞并在实验室培养。我们发现当用胸腺素-β4处理后,这些成熟细胞能和胚胎细胞一样产生健康心脏组织。这表明胸腺素-β4具有治疗效用。”研究人员称,他们的发现朝找到心脏自我修复机制迈出了“一大步”,将来有可能开发出基于病人自身心脏细胞的疗法。

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2016.04.25

ELISA试剂盒中抗原与抗体的影响因素

ELISA试剂盒中抗原与抗体的影响因素抗原是能在机体中引起特异性免疫应答的物质。小分子化合物在与大分子蛋白质结合后能引起机体产生特异性抗体的,称为半抗原(hapten)。抗原进入机体后,可刺激机体产生抗体和引起细胞免疫。例如某些激素、药物等。能在机体中引起抗体产生的抗原多为分子量大于5000的蛋白质。ELISA是一种免疫测定。一个抗原分子可带有不同的决定簇。如将多种抗原或含有多个抗原决定簇的抗原注入机体,则将由多系的B细胞产生相应的多种抗体,这些抗体均存在于免疫血清中。含有抗体的血清称为抗血清。免疫测定中所用的抗血清一般用抗原免疫兔、羊或马制得。将免疫的脾细胞(含产生抗体的B细胞)与小鼠肿瘤细胞融合,分离杂交瘤细胞,接种于小鼠腹腔,产生的腹水中含有浓度很高的单克隆抗体。ELISA是一种免疫测定。一个抗原分子可带有不同的决定簇。在免疫测定中,抗原是指能与抗体结合的物质。在临床检修中主要通过抗原抗体反应检测体液中的抗体或抗原性物质。抗原的反应性取决于抗原决定簇(antigenic determinant),或称为表位(epitope)。免疫测定(immunoassay,IA)是应用免疫学技术测定标本的方法。

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2016.04.19

人ELISA试剂盒实验之试剂配置

人ELISA试剂盒实验之试剂配置人血清中IgM、IgG型类风湿因子(RF)可以与ELISA系统中的捕获抗体及酶标记二抗的FC段直接结合,从而导致假阳性。ELISA试剂盒解决该情况的办法是:ELISA试剂盒①用F(ab)2替代完整的IgG;②标本用联有热变性(63℃,10 min)IgG的固相吸附剂处理(将热变性IgG加入到标本稀释液中同样有效);③检测抗原时,可以用2-巯基乙醇等加入到标本稀释液中,使RF降解。(2)补体ELISA系统中固相一抗和标记二抗过程中,抗体分子发生变构,其FC段的补体C1q分子结合位点被暴露出来,使C1q 可以将二者连接起来,从而造成假阳性。解决的办法是:①用EDTA稀释标本;②用53℃,10 min或56℃,30 min加热血清使C1q灭活。(3)嗜异性抗体人类血清中含有能与啮齿类动物(如鼠等)Ig (s) 结合的天然嗜异性抗体,可将ELISA系统中一抗和二抗连接起来,也能造成假阳性。解决的办法是:可在标本稀释液中加入过量的动物Ig (s) ,但加入量不足或亚类不同时无效。(4)嗜靶抗原的自身抗体抗甲状腺球蛋白、抗胰岛素等嗜靶抗原的自身抗体,有时能与靶抗原结合形成复合物,在ELISA方法中均可干扰抗原抗体测定结果。为避免以上情况出现,解决的办法是:测定前需用理化方法将其解离后再测定。(5)医源性诱导的抗鼠Ig (s) 抗体临床开展的用鼠源性CD3等单克隆抗体治疗,用放射性同位素标记鼠源性抗体的影像诊断及靶向治疗等新技术,均有可能使这些病人体内产生抗鼠抗体;另外,被鼠等啮齿类动物咬伤的病人体内也可以产生抗鼠Ig (s) 抗体。这些病人ELISA测定时均可产生假阳性。解决的办法是:测定抗原时,在标本中加入足量的正常鼠Ig (s) ,从而克服由于上述原因造成的假阳性。(6)交叉反应物质ELISA试剂盒类、类AFP样物质等,是与靶抗原有交叉反应的物质。在用多抗测定抗原时对测定结果影响不大,但在用单克隆抗体测定抗原时,如果交叉抗原决定簇正好是所用单克隆抗体相对应的靶决定簇时,也会出现假阳性结果。(7)标本中其它成分的影响 血清脂质过高、胆红素、血红蛋白及血液粘度过大等,ELISA试剂盒均对ELISA测定结果有干扰作用。

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2016.04.19

细胞培养中污染的预防与清除

细胞培养中污染的预防与清除 一、污染的预防预防是防止细胞培养过程中发生污染的最好办法。只有预防工作做在前,才能将发生污染的可能性降到最小程度。一般预防可从以下几方面着手:(一)从操作者做起1、操作者责任心要强,要细心稳重,操作技术要熟练。进无菌室前要用肥皂洗手或用5%新洁尔灭浸泡5分钟,按规定穿隔离衣。进入后关好门,坐下来尽量少走动。工作开始要先用75%酒精棉球擦手、擦瓶口和烧灼瓶口。事先要严格检查器材、溶液和培养物,不要把污染品或未经消毒的物品带入无菌室内,更不能随便使用,以免造成大批污染。2、操作者动作要轻,必须在火焰周围无菌区内打开瓶口,并将瓶口转动烧灼。操作时尽量不要谈话,若打喷嚏或咳嗽应转向背面。3、操作时要常更换吸管,切勿一根吸管做到底。一旦发现吸管口接触了手和其他污染物品应弃去。实验完毕及时收拾,保持实验室清洁整齐,最后用消毒水浸泡的纱布擦台面。(二)从物品、用品消毒灭菌着手细胞培养所用物品清洗、消毒要彻底,各种溶液灭菌除菌要仔细,并在无菌试验阴性后才能使用。操作室及剩余的无菌器材要定期清洁消毒灭菌。(三)防止细胞交叉污染在进行多种细胞培养操作时,所用器具要严格区分,最好做上标记便于辨别。并按顺序进行操作,避免一起进行时易发生混乱。在进行换液或传代操作时,注射器和滴管不要触及细胞培养瓶瓶口,以免把细胞带到培养液中污染其他细胞。所有细胞一旦购置,或从别处引入,或自己建立,均应及早留种冻存,一旦发生污染可弃之复苏,重新培养。二、污染的清除培养细胞一经污染,多数较难处理。如果污染细胞价值不大,宜弃之;有细胞株留存的或可购置的,可在寻找原因后彻底消毒操作室,复苏或重新购置细胞,再培养。若污染细胞价值较大,又难于重新得到,可采取以下办法清除。(一)使用抗生素抗生素对杀灭细菌较有效。联合用药比单独用药效果好。预防用药比污染后再用药效果好。预防用药一般用双抗生素(青霉素100u/mL加链霉素100μg/mL),污染后清除用药需采用大于常用量5~10倍的冲洗法,于加药后作用24~48小时,再换常规培养液。此法在污染早期可能有效。所用抗生素品种除青霉素、链霉素外,还可用庆大霉素、卡那霉素、多粘菌素、四环素、制霉菌素等。常用400~800μg/mL卡那霉素或200μg/mL四环素处理,每隔2~3日换液1次,传1~2代进行治疗。近年来有报道,4-氟,2-羟基喹啉(Ciprofloxacin,Cip)、截耳素衍生物(Pleu-romutilinderivative,BM-Cyclin2:BM-1和四环素衍生物(BM-2)等三种抗生素单用或合用对杀灭支原体有效。这三种抗生素均用PBS配成250X浓缩液,-20℃保存备用,使用浓度Cip为10μg/mL,BM-1为10μg/mL,BM-2为5μg/mL。使用时先吸除污染的培养液,加入含BM-1的RPMI1640培养液,3天后再吸除培养液,加入含BM-2的RPMI1640培养液,培养4天,如此连续3个轮次,直至用33258荧光染色镜检证明已清除支原体后,再加正常培养液培养传代3-4次。(二)使用支原体特异性血清用5%的兔支原体免疫血清(血凝效价1:320以上)可去除支原体污染,因特异抗体可抑制支原体生长,故经抗血清处理后11天即转为阴性,并且5个月后仍为阴性。但此法比较麻烦,不如用抗生素方便、经济。(三)加温处理将污染的组织培养物放在41℃培养18小时,可杀死支原体,但对细胞有不良影响。所以在处理前要进行预试验,摸索能最大限度杀死支原体又对细胞影响最小的加热时间。此法有时不可靠。若先用药物处理后,再以41℃加温处理效果更佳。(四)其他方法除了上述去除污染的方法外,还有动物体内接种除菌法、巨噬细胞吞噬法、污染培养瓶中加溴尿嘧啶再用光照射的方法及过滤法等,但均较麻烦,且效果不确定。所以一旦支原体污染,除非有特别重要价值,一般均弃之重新培养。

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2016.04.13

揭开细胞复制的秘密

揭开细胞复制的秘密        在发育和干细胞生物学、癌症研究和药物开发中,测定细胞的增殖能力是一种基本方法。Life Technologies推出了一系列产品,可高效准确地测定细胞在整个细胞周期中的进程。Premo? FUCCI Cell Cycle Sensor为单个细胞或细胞群体中的细胞周期进程提供了准确、灵敏的读数。而Click-iT? EdU assay则能检测进入DNA合成期的细胞,并将S期的细胞与其他细胞区分开来。研究细胞周期Premo? FUCCI Cell Cycle Sensor是基于两个细胞周期调控蛋白geminin和Cdt1,它们分别与绿色和红色荧光蛋白相融合。Cdt1和geminin蛋白的降解是时间上调控的,这样G1期只存在Cdt1,G1/S期存在两种蛋白,而S、G2和M期只存在geminin。            因此,细胞核的荧光就从红色(G1)变成绿色(S、G2、M),为监控细胞周期进程提供了一种简单的方法。FUCCI系统是基于BacMam 2.0技术,它利用杆状病毒来实现哺乳动物细胞的高效转导和瞬时表达。BacMam 2.0大大提高了这种基因导入平台的效率和实用性。过去与BacMam 1.0不兼容的细胞类型(神经元),或转导效果不佳(一些干细胞、CHO)的细胞类型,现在也能通过简单的一步过程定量转导。BacMam 2.0融合了新元件,大大增强了转导效率和表达水平,故性能改善。Premo? FUCCI Cell Cycle Sensor实现了细胞周期进程和细胞分裂的活细胞成像,它也与固定和透化处理兼容。这种细胞周期传感器是即用型的,操作过程也很简单——只需将Premo? FUCCI试剂加入您的细胞,孵育过夜,并利用荧光显微镜或流式细胞仪观察即可。          Click-iT? EdU assay则是我们常用的BrdU分析的替代。在DNA合成过程中,核苷类似物EdU(5-乙炔-2’-脱氧尿苷)掺入新生的DNA链中。EdU不是通过抗体检测,而是基于一个click反应——铜催化的叠氮化物和炔烃之间的共价反应。EdU核苷中含有炔烃,而Alexa Fluor或Pacific Blue荧光基团上含有叠氮化物。利用成像技术、流式细胞术或高内涵分析即可判定群体中S期细胞的比例。Click-iT? EdU标记的一个主要优势在于荧光叠氮化物(分子量Premo? FUCCI Cell Cycle Sensor让细胞周期分析可在活细胞中开展,它与延迟成像结合时特别有用。对于固定细胞的成像,Click-iT? EdU标记实现了温和条件下掺入EdU的高效检测

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2016.04.11

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