Copure® MCX SPE 60mg/3mL固相萃取小柱

SPE 柱净化（Copure® MCX，60 mg/3 mL） 活化：MCX 固相萃取柱使用前用 3 mL 甲醇、3 mL 2% 甲酸水溶 液活化。 上样和洗脱：往固相萃取柱中加入 2% 甲酸水溶液提取备用 液，弃去流出液；加入 3 mL 水淋洗，弃去淋洗液 3 mL 固 相萃取柱洗脱液（1% 氨水溶液：甲醇 =3:7）洗脱收集洗脱 液 ( 整个上样淋洗洗脱过程中流速控制在 1 mL/min 以内 )。 重新溶解：50℃缓慢氮气流条件下吹至近干，加 1 mL 流动相 复溶，0.22 µm 滤膜过滤，滤液上机测试。

样品净化（Copure® MCX，60 mg/3 mL） 活化：MCX 柱依次加入 3 mL 甲醇活化，3 mL 水平衡。 上样和洗脱：取上述待净化液 1 mL 加入经活化的小柱中，重 力作用下待液体流尽，依次加入 3 mL 0.1% 甲酸水溶液、3 mL 水，3 mL 甲醇淋洗固相萃取柱，弃去流出液。用 6 mL 5% 氨 水甲醇溶液进行洗脱，收集洗脱液，于 45℃氮吹至尽干。 重新溶解：残渣用含 0.1% 甲酸的乙腈水溶液定容至 1 mL，混 匀过 0.22 µm 尼龙滤膜，供上机测试。

SPE 柱净化（Copure® MCX，60 mg/3 mL） 活化：使用前依次用 3 mL 甲醇、5 mL 水活化柱子。 上样和洗脱：将待净化液转移至固相萃取柱中。依次用 3 mL 水、3 mL 甲醇洗涤，抽至近干后，用 6 mL 5% 氨化甲 醇溶液洗脱。整个固相萃取过程流速不超过 1 mL/min。 重新溶解：洗脱液于 50℃下用氮气吹干，残留物用 1 mL 流 动相定容，涡旋混合 1 min，过微孔滤膜后，供 HPLC 测定。

SPE 柱净化（Copure® MAX，60 mg/3 mL） 活化：加入 2 mL 甲醇、2 mL 水活化。 上样和洗脱：将样品上清液上柱，流速为 1 mL/min，依次用 1 mL 5% 氨水溶液，0.5 mL 甲醇淋洗，弃去淋洗液，用 4 mL 甲 酸 /甲醇溶液 (1:19, v/v)洗脱，流速为 1 mL/min，收集洗脱液。 重新溶解：洗脱液于 40℃氮吹至吹干，加入 1 mL 流动相，涡 旋 30 s 溶解。过 0.22 µm 滤膜后，用于 HPLC 测定。

SPE 柱净化（Copure® MAX，60 mg/3 mL） 活化：MAX 固相萃取柱使用前依次使用 3 mL 甲醇和 3 mL 水 活化。 上样和洗脱：将待净化的样品清液加入已活化好的固相萃取 柱中，以 1 mL/min 的流速过柱，弃去滤液。用 3 mL 甲醇 / 水溶液 (5:95, v/v) 淋洗固相萃取柱，弃去淋洗液，用吸 耳球吹出小柱中残留液。用 5 mL 甲酸 / 乙酸乙酯溶液 (1:9, v/v) 洗脱固相萃取柱，收集洗脱液。 重新溶解：洗脱液于 40℃氮吹吹干，用 2 mL 甲醇定容，0.22 µm 微孔滤膜过滤，供 HPLC 上机测试。

SPE 净化（Copure® MCX, 60 mg/3 mL） 活化：向 MCX 柱中依次加入 3 mL 甲醇，3 mL 水和 3 mL 2% 甲 酸水溶液进行活化。 上样和洗脱：准确移取待净化液 5 mL 过柱，依次用 5 mL 2% 甲酸水溶液，1% 甲酸乙腈淋洗，弃去全部流出液，抽干小柱， 用 4 mL 5% 氨水甲醇溶液洗脱，收集洗脱液，45℃氮吹至干。 重新溶解：准确加入 1 mL 复溶液（乙腈 - 甲醇 - 水 =70:20:10） 涡旋溶解，过 0.22 µm 尼龙滤膜供上机分析。

SPE 柱净化（Copure® MCX，60 mg/3 mL） 活化：MCX 柱使用前依次用 3 mL 甲醇活化、3 mL 0.1 mol/L 盐酸平衡。 上样和洗脱：在 MCX 固相萃取柱上加入盐酸提取备用液，弃 去流出液；依次用 2 mL 0.1 mol/L 盐酸、2 mL 甲醇淋洗，弃 去淋洗液；抽干小柱；用 6 mL 甲醇 -10% 氨水溶液（6:4, v/ v）洗脱，收集洗脱液（整个上样、洗脱过程保持流速 1 mL/ min）。 重新溶解：洗脱液于 40℃氮吹至 1 mL 以下，用水定容至 1 mL，过 0.22 µm 滤膜，供 HPLC 上样测试。

SPE 柱净化（Copure® MCX，60 mg/3 mL） 活化：MCX 柱依次用 3 mL 甲醇和 3 mL 水活化。 上样和洗脱：取上述残渣溶液上柱，控制流速 0.5 mL/min。 后依次用 2 mL水、2 mL 2%甲酸水、2 mL甲醇淋洗柱子并抽干， 最后用 2 mL 5% 氨化甲醇溶液洗脱柱子上的待测成分。 重新溶解：收集洗脱液，于 40℃氮气吹干，准确加入 1.0 mL 5% 甲酸水溶液 ( 含 0.1% 甲酸 ) 溶液溶解残余物，0.22 µm 滤 膜过滤，供高效液相色谱测定。