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猪肉中 3 种 β- 受体激动剂检测的固相萃取方法（Copure® MCX）

2021/12/02 11:06

阅读：67

应用领域：

食品/农产品

发布时间：

2021/12/02

检测样品：

畜禽肉及副产品

检测项目：

非法添加

浏览次数：

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参考标准：

GB/T 22286-2008 动物性食品中多种 β- 受体激动剂残留量的测定液相色谱串联质谱法

方案摘要：

SPE 柱净化（Copure® MCX，60 mg/3 mL）活化：MCX 柱依次用 3 mL 甲醇和 3 mL 水活化。上样和洗脱：取上述残渣溶液上柱，控制流速 0.5 mL/min。后依次用 2 mL水、2 mL 2%甲酸水、2 mL甲醇淋洗柱子并抽干，最后用 2 mL 5% 氨化甲醇溶液洗脱柱子上的待测成分。重新溶解：收集洗脱液，于 40℃氮气吹干，准确加入 1.0 mL 5% 甲酸水溶液 ( 含 0.1% 甲酸 ) 溶液溶解残余物，0.22 µm 滤膜过滤，供高效液相色谱测定。

产品配置单：

前处理设备

智能水浴氮吹

型号： BN24

产地：深圳

品牌： Biocomma

¥5.98万

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HN-32 全自动均质仪

型号： HN-32

产地：深圳

品牌： Biocomma

¥15.8万

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设备配件

Copure® MCX SPE 60mg/3mL固相萃取小柱

型号：

产地：

品牌： Copure

¥1015

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方案详情：

一、样品提取

称取 2±0.01 g 经捣碎的猪肉样品，于 50 mL 离心管中，加 8 mL 乙酸钠缓冲液 (0.2 mol/L，pH=5.2)，充分混匀，再加 50 µL β- 葡萄糖醛苷酶 / 芳基硫酸酯酶，混匀后， 37℃水浴水解 12 h。振荡提取 15 min，4000 r/min 离心 10 min，取上清液 4 mL 于 50 mL 离心管中，并加入 0.1 mol/L 高氯酸溶液 5 mL，混合均匀，用高氯酸调节 pH 到 1±0.3。4000 r/min 离心 10 min 后将全部上清液转移到 50 mL 离心管中，用 10 mol/L 氢氧化钠溶液调节 pH=11。加入 10 mL 饱和氯化钠和 10 mL 异丙醇 - 乙酸乙酯 (6:4, v/v) 混合溶液，充分提取 5 min，在 4000 r/ min 离心 10 min。转移全部有机相，在 40℃水浴下氮吹干。加入 5 mL 乙酸钠缓冲液 (0.2 mol/L，pH=5.2)，超声混匀，使残渣充分溶解后备用。

二、SPE 柱净化（Copure® MCX，60 mg/3 mL）

活化：MCX 柱依次用 3 mL 甲醇和 3 mL 水活化。

上样和洗脱：取上述残渣溶液上柱，控制流速 0.5 mL/min。后依次用 2 mL水、2 mL 2%甲酸水、2 mL甲醇淋洗柱子并抽干，最后用 2 mL 5% 氨化甲醇溶液洗脱柱子上的待测成分。

重新溶解：收集洗脱液，于 40℃氮气吹干，准确加入 1.0 mL 5% 甲酸水溶液 ( 含 0.1% 甲酸 ) 溶液溶解残余物，0.22 µm 滤膜过滤，供高效液相色谱测定。

三、仪器条件

设备：Waters Alliance 2695 色谱柱：XB-C18 (4.6 mm×250 mm, 5 µm) 检测器：紫外检测波长：249 nm 荧光检测波长：激发波长：226 nm 发射波长：306 nm 流动相：A：甲醇 B：0.1% 甲酸水溶液洗脱方式：梯度洗脱，见表 1

表 1 流动相梯度洗脱程序

柱温：30℃ 流速：1.0 mL/min 进样量：20 µL

四、实验结果

表 2 添加水平为 1.0 mg/kg 猪肉基质中 3 种 β- 受体激动剂的添加回收结果

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Copure® PWAX | GB 5009.35-2023糖果和水果罐头中11种合成着色剂的测定

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