台式高速离心机、转速 16500

SPE 柱净化（Copure® PSA，60 mg/6 mL） 活化：加 5 mL 甲基叔丁基醚 / 正己烷 (1:1, v/v) 活化。 上样和洗脱：将待净化液转移至固相萃取柱中，用 2×2.5 mL正己烷淋洗，弃去流出液，抽干小柱；加入 6 mL甲醇洗脱， 收集洗脱液（整个过程控制流速在 1 mL/min 以内）。 重新溶解：洗脱液于 40℃缓慢氮气流条件下吹至近干，加 1 mL 甲醇溶解，经 0.22 µm 滤膜过滤，供 HPLC 测定。

SPE 柱净化（Copure® HLB，200 mg/6 mL） 活化：HLB 柱使用前用 5 mL 甲醇活化，5 mL 水平衡。 上样和洗脱：取备用液加入固相萃取柱中，弃去流出液；各 取 5 mL 水、40% 甲醇水淋洗，弃去淋洗液；抽干小柱，用 10 mL 乙腈洗脱，收集洗脱液，于 50℃氮吹至近干（整个上样、 洗脱过程控制流速在 1 mL/min 内）。 重新溶解：加 1 mL 流动相（53% 乙腈水溶液）混匀，经 0.45 µm 滤膜过滤，供上机测试。

、SPE 柱净化（Copure® HLB，150 mg/6 mL） 活化：净化前用 5 mL 甲醇活化，5 mL 的水平衡。 上样和洗脱：取 10 mL 进行上样，将提取液以 2 mL/min 的 速度过柱，弃去滤液，依次用 5 mL 水，5 mL 甲醇淋洗，弃 去淋洗液，将小柱抽干，再用 10 mL 甲醇洗脱并收集洗脱液。 重新溶解：40℃缓慢氮吹至近干，加 1 mL 乙腈溶解。涡旋混 合 1 min，过 0.22 µm 有机滤膜，待上机测试。

免疫亲和柱净化（Copure® 赭曲霉毒素 A 免疫亲 和柱，3 mL） 上样：取待净化样品 2 mL 过柱，弃掉流出的液体。 淋洗和洗脱：加入 20 mL 水淋洗柱子，分两次淋洗，弃掉流 出的液体，抽干小柱；加入 2 mL 甲醇缓慢洗脱亲和柱，流速 约为 2-3 秒 / 滴。 重新溶解：40℃下氮吹至近干，加 1 mL 初始流动相复溶，0.22 µm 滤膜过滤，供 HPLC 分析。

免疫亲和柱净化（Copure® 呕吐毒素免疫亲和柱，3 mL） 上样：将 20 mL 上样器连接于免疫亲和柱上端，取待净化液样 品液 1 mL 以 1-2 滴 / 秒的速度通过免疫亲和柱，弃掉流出的 液体。 淋洗和洗脱：加 20 mL 水淋洗柱子 , 分两次淋洗，弃掉流 出的液体，抽干小柱；加入 4 mL 甲醇缓慢洗脱（先浸泡约 30s），分两次洗脱，流速约为 2-3 秒 / 滴，收集流出液。 重新溶解：在 50℃下氮吹至近干，加 20% 甲醇水溶液 1 mL 重 新溶解。经 0.22 µm 滤膜过滤，待上机测试。

免疫亲和柱净化（Copure® 黄曲霉毒素 B1 免疫亲 和柱，3 mL） 上样：将 20 mL 上样器连接于免疫亲和柱上端，取待净化液样 品液以 1-2 滴 / 秒的速度通过免疫亲和柱，弃掉流出的液体。 淋洗和洗脱：用 20 mL 水淋洗柱子，分两次淋洗，弃掉流出 的液体；抽干小柱；加入 2×2 mL 甲醇缓慢洗脱亲和柱，流速 约为 2-3 秒 / 滴；50℃下氮吹至近干，待衍生。

一、样品提取 准确移取火锅料 2.0 g 于 50 mL 离心管中加入 5 mL 水，涡旋 分散均匀，加入 15 mL 乙腈，涡旋震荡 1 min，加入 QuEChERS 萃取盐包（6 g 无水硫酸镁和 1.5 g 无水醋酸钠），用力振摇 涡旋 14000 r/min 离心 5 min。上层乙腈层待净化。 二、样品净化 取 Copure® QuEChERS 净化管（50 mg PSA、100 mg MgSO4、100 mg C18），移取待净化的乙腈层 1.5 mL 上清液至此 QuEChERS 净化管中，漩涡混合 1 min，以 10000 r/min 离心 2 min。取 上清液 1 mL，过 0.22 µm 滤膜，待上机测试。

样品净化 取 Copure® QuEChERS 净化管（50 mg PSA、100 mg MgSO4、100 mg C18），移取待净化的乙腈层 1.5 mL 上清液至此 QuEChERS 净化管中，漩涡混合 1 min，以 10000 r/min 离心 2 min。取 上清液 1 mL，过 0.22 µm 滤膜，待上机测试。